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原文传递一种分离检测血清脂蛋白的方法

专利名称：	一种分离检测血清脂蛋白的方法
摘要：	本发明提供了一种分离检测血清脂蛋白的方法，其是将血清样品与缓冲溶液混合，配制血清样品稀释液，向其中加入苏丹黑B的有机溶剂溶液，并置于恒温摇床中震荡≥3 h，得到染色后的血清样品稀释液，采用非对称场流分离联用紫外可见光检测器对染色后的血清样品稀释液中的高密度脂蛋白与低密度脂蛋白进行分离并检测两者的粒径分布。本发明方法操作简单，分析时间短，既能定性检测血清中的脂蛋白，又能够准确地定量分析高密度脂蛋白与低密度脂蛋白的粒径分布，避免血清样品中游离蛋白质对脂蛋白分离的干扰，减小脂蛋白样品与过滤膜的交联，具有广泛的应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	河北大学
发明人：	窦海洋;张潇月;陈雪;张晶;申世刚
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910315377.9
公开号：	CN110031555A
代理机构：	石家庄国域专利商标事务所有限公司
代理人：	黄慧慧
分类号：	G01N30/00(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	071002 河北省保定市五四东路180号河北大学
主权项：	1.一种从血清样品中区分脂蛋白的方法，其特征在于，向血清样品或血清样品稀释液中加入苏丹黑B的有机溶剂溶液，并置于恒温摇床中震荡≥3 h；所述血清样品稀释液是将血清样品与缓冲溶液混合，所述血清样品与所述缓冲溶液的体积比为1∶6~8。 2.根据权利要求1所述的从血清样品中区分脂蛋白的方法，其特征在于，所述缓冲溶液为包括NaCl、PBS和NaN3的混合水溶液。 3.根据权利要求1所述的从血清样品中区分脂蛋白的方法，其特征在于，所述苏丹黑B的有机溶剂溶液中，所述有机溶剂为乙醇或丙酮。 4.根据权利要求3所述的从血清样品中区分脂蛋白的方法，其特征在于，所述苏丹黑B的有机溶剂溶液为苏丹黑B的乙醇溶液，所述苏丹黑B固体与乙醇的质量体积比为0.3 %。 5.根据权利要求1所述的从血清样品中区分脂蛋白的方法，其特征在于，所述恒温摇床的温度为35~40℃，震荡频率为150~300 rpm，在恒温摇床中的震荡时间为3~6 h。 6.一种检测血清脂蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：（a）将血清样品与缓冲溶液混合，配制血清样品稀释液；（b）向步骤（a）所得血清样品稀释液中加入苏丹黑B的有机溶剂溶液，并置于恒温摇床中震荡≥3 h，得到染色后的血清样品稀释液；（c）采用非对称场流分离联用紫外可见光检测器对染色后的血清样品稀释液中的高密度脂蛋白与低密度脂蛋白进行分离并检测两者的粒径分布。 7.根据权利要求6所述的检测血清脂蛋白的方法，其特征在于，步骤（c）中，采用非对称场流分离联用紫外可见光检测器进行检测分析时，所采用的载液为包括NaCl、PBS和NaN3的混合水溶液。 8.根据权利要求7所述的检测血清脂蛋白的方法，其特征在于，所述载液为包括50~200mMNaCl、10 mM PBS和3 mM NaN3的混合水溶液。 9.根据权利要求6所述的检测血清脂蛋白的方法，其特征在于，步骤（c）中，所述检测器流速为1 mL/min，交叉流流速为1~2 mL/min。 10.根据权利要求6所述的检测血清脂蛋白的方法，其特征在于，步骤（c）中，所述检测器波长λ=600 nm，所采用的过滤膜为可再生纤维素过滤膜，垫片厚度为350 μm。
所属类别：	发明专利