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原文传递一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法

专利名称：	一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法
摘要：	一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，涉及真菌毒素的检测。用柠檬酸钠还原氯金酸制备Au纳米粒子溶胶；制备TGA修饰的金纳米粒子；OTA的定量检测。用巯基乙酸修饰的金纳米粒子作为SERS基底，一方面降低了金纳米粒子的表面能，提高金纳米粒子的稳定性，防止纳米粒子团聚；另一方面借助于TGA分子中游离的羧基与OTA分子中的羰基氧形成氢键，将OTA拉进金纳米粒子的局域电磁场增强区，即SERS热点区，增强拉曼检测信号。利用OTA在1265cm‑1处的特征拉曼峰的信号强度与浓度具有线性关系，建立了简单、快速、低成本，无需复杂的特异性修饰，直接利用OTA的SERS特征峰对其进行定量的分析方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	福建;35
申请人：	集美大学
发明人：	张芹;贺路影;陈艳红;苏文金
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-09T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910282105.3
公开号：	CN110044868A
代理机构：	厦门南强之路专利事务所(普通合伙)
代理人：	马应森
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	361021 福建省厦门市集美区银江路185号
主权项：	1.一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于包括以下步骤： 1)用柠檬酸钠还原氯金酸制备Au纳米粒子； 2)制备TGA修饰的金纳米粒子； 3)OTA的定量检测。 2.如权利要求1所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述用柠檬酸钠还原氯金酸制备Au纳米粒子溶胶,可通过控制反应物的浓度、反应温度、反应时间、搅拌速度，制得粒径均一的Au纳米粒子溶胶，所述Au纳米粒子溶胶为AuNPs溶胶。 3.如权利要求1所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述柠檬酸钠的质量百分浓度为0.8％～1.5％，柠檬酸钠与氯金酸的体积比为120～150；所述氯金酸的质量百分浓度为0.01％～0.05％。 4.如权利要求2所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于所述反应温度为90～100℃，反应时间为30～50min，搅拌速度为2000～3000r/min；所述Au纳米粒子为球形Au纳米粒子或椭圆形Au纳米粒子，所述球形Au纳米粒子的粒径为50±10nm。 5.如权利要求1所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于在步骤1)中，所述用柠檬酸钠还原氯金酸制备Au纳米粒子溶胶的反应条件为：在磁力搅拌下加热回流至沸腾，然后迅速加柠檬酸三钠，继续加热回流30～50min，反应后自然冷却至室温。 6.如权利要求1所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述制备TGA修饰金纳米粒子的具体方法为：通过控制金纳米粒子溶液的体积、TGA的用量、反应时间、磁力搅拌速度，获得TGA修饰的金纳米粒子，对TGA修饰的金纳米粒子进行红外光谱、EDS、SEM表征，测量共振吸收谱探究TGA的用量对Au纳米粒子修饰的影响；所述金纳米粒子溶液的体积为30～50mL；所述TGA的用量为200～800μL；反应时间为15～30min；磁力搅拌速度为800～1500r/min；所述TGA修饰的金纳米粒子可为球形或椭圆形，所述球形TGA修饰的金纳米粒子的粒径可为60±5nm。 7.如权利要求1所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于在步骤2)中，所述TGA修饰金纳米粒子的制备条件为：在常温下，取金纳米粒子溶胶于容器中，在磁力搅拌下加入TGA溶液，持续反应，得到TGA修饰的金纳米粒子。 8.如权利要求6所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于所述TGA修饰的金纳米粒子的红外光谱表征是指将TGA修饰的金纳米粒子溶液浓缩后，与溴化钾一起置于100～150℃温度的干燥箱中烘烤后，将TGA修饰金纳米粒子样品与溴化钾加入玛瑙研钵中充分研磨，压片后，进行红外光谱测试；TGA修饰金纳米粒子样品与溴化钾的质量比1︰(95～99)；所述EDS、SEM表征是指取0.8～1.5mL TGA修饰的金纳米粒子溶液，7000～9000r/mim，5min离心，弃去上清液，加入200～500μL超纯水，7000～9000r/mim离心清洗，去掉上清液，将TGA修饰的金纳米粒子溶液浓缩至10～20μL，取3～5μL浓缩TGA修饰的金纳米粒子溶液滴加于镀金玻片上，自然干燥后，制备SERS基底，进行EDS、SEM表征；所述探究TGA的用量对金纳米粒子修饰的影响是指取合成的金纳米粒子溶液原液40～50mL于容器中，在1000～2000r/min的磁力搅拌下，加入不同体积同浓度的TGA溶液，持续反应15～30min，得到TGA修饰的金纳米粒子，采集TGA修饰的金纳米粒子溶液的表面等离子体共振吸收谱，进行表征。 9.如权利要求1所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于在步骤3)中，所述OTA的定量检测的具体方法为：在最佳激发波长下，将不同浓度的OTA溶液滴加在SERS基底上，基底置于加热板上，进行表面增强拉曼检测，随着OTA浓度的增加，OTA在特定波长处的拉曼峰逐渐增强，利用OTA拉曼特征峰的强度与OTA的量成正比，对OTA进行定量分析检测。 10.如权利要求9所述一种赭曲霉毒素A的SERS检测方法，其特征在于所述最佳激发波长是指532～785nm激发波长；控制加热板的温度为40～60℃；所述OTA在特定波长处的拉曼峰是指OTA在1265cm-1处的特征拉曼峰；所述定量分析检测，是指以浓度的负对数值为横坐标，即以OTA浓度的负对数为横坐标，以OTA在最强特征峰1265cm-1处的峰强为纵坐标，建立标准曲线，对OTA定量检测，检测范围2.48×10-5～10-10mol/L，线性范围10-5～10-9mol/L，线性相关系数0.9846，检测限10-10mol/L。
所属类别：	发明专利