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原文传递一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的制备方法及应用

专利名称：	一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的制备方法及应用
摘要：	本发明属于新型纳米材料、免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种检测甲胎蛋白的电流型免疫传感器，具体涉及一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的构建方法，具有检测范围宽、检测下限低、灵敏度高、操作简单、检测速度快等优点，并且具有良好的重现性、稳定性和选择性，构建此电化学免疫传感器对甲胎蛋白的检测具有十分重要的意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东理工大学
发明人：	刘青;董慧;刘会;谭召灵;颜芹;董云会
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910361773.5
公开号：	CN110045121A
分类号：	G01N33/574(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	255086 山东省淄博市高新技术开发区高创园A座313室
主权项：	1.一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的制备方法及应用，其特征包括以下几个步骤：（1）将直径为3.0 ~ 5.0 mm的玻碳电极用氧化铝抛光粉抛光成镜面，在无水乙醇中超声清洗干净；（2）取6.0 µL、0.3 ~ 3.0 mg/mL的负载空心立方体的氨基化MXene纳米复合材料分散液滴加到电极表面，室温下晾干，用超纯水冲洗电极表面，在室温下晾干；（3）继续将6.0 µL、5.0 ~ 15.0 µg/mL的甲胎蛋白抗体滴加到电极表面，4 ℃冰箱中干燥；（4）继续将3.0 µL、1.3 ~ 2.6 wt%的BSA溶液滴加到电极表面，用以封闭电极表面上非特异性活性位点，pH = 6.98磷酸盐缓冲液冲洗电极表面，4 ℃冰箱中晾干；（5）滴加6.0 µL、0.0001 ~ 40 ng/mL的一系列不同浓度的甲胎蛋白抗原溶液，pH =6.98磷酸盐缓冲液冲洗电极表面，4 ℃冰箱中晾干，制得一种检测甲胎蛋白抗原的电流型免疫传感器的工作电极。 2.如权利要求1所述的一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的制备方法及应用，所述氨基化MXene纳米材料的制备，步骤如下：（1）制备MXene 首先，在玛瑙研钵中用水研磨钛碳化铝粉末，取体积比为1:15，浓度为0.02 ~ 0.06 g/mL的钛碳化铝悬浮液与20% ~ 40%氢氟酸均匀混合，超声处理1 h，之后，将混合物在50 ℃下搅拌12 h以促进分层过程，最后，离心分离，将得到的上层液冷冻干燥得到少层MXene，并在真空干燥下保存；（2）制备氨基化MXene 取50 ~ 100 mg MXene溶解于含0.1 mL有氨基丙基三乙氧基甲硅烷的10 mL乙醇溶液中，超声处理30 min后，将溶液在70 ℃下加热1.5 h，最后，25.0 mL超纯水洗涤，离心分离，将得到的上清液冷冻干燥得到氨基化MXene。 3.如权利要求1所述的一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的制备方法及应用，所述一种负载空心立方体的氨基化MXene纳米复合材料的制备，步骤如下：（1）制备氧化铜纳米立方体分散液在连续搅拌下依次将氯化铜（1 mL，0.05 mM）和聚丙烯酸钠（0.5 mL，0.5 mM）加入到28~ 48 mL水中，将氢氧化钠（1 mL，0.5 mM）后，将0.3 ~ 0.5 mL的抗坏血酸（0.5 mM）加入到混合溶液中，并在45 ℃下加热搅拌40 min，最终得到氧化铜纳米立方体分散液用铝箔包裹并储存在4 ℃的冰箱中；（2）制备空心立方体铂铑铜三金属纳米分散液首先向制备好的氧化铜纳米立方体分散液（10 mL，0.36 mg/mL）中加入0.258 ~ 0.358mL的四氯铂酸钠（0.0024 mM）、三氯化铑（0.015 mL，0.024 mM）、聚丙烯酸钠（0.05 mL，0.5mM），用氢氧化钠将混合液的PH调至8，将该溶液转入到聚四氟乙烯内衬的高压反应釜中，加热到120 ℃反应6 h，冷却后，再用硝酸将混合液PH调至2，常温搅拌20 ~ 40 min，最后用乙醇以及超纯水离心洗涤，收集黑色沉淀物，将其分散在1.0 mL超纯水中进一步使用，得到空心立方体铂铑铜三金属纳米分散液；（3）制备负载空心立方体的氨基化MXene纳米复合材料将0.1 ~ 0.5 g的氨基化MXene加入100.0 mL水中，取2.0 ~ 3.0 mL空心立方体铂铑铜三金属纳米分散液分散在氨基化MXene分散液中，将混合液连续搅拌24 h，用超纯水离心洗涤，所得到的沉淀重新分散于20 mL超纯水，得到负载空心立方体的MXene纳米复合材料分散液用铝箔包裹并储存在4 ℃的冰箱中。 4.如权利要求1所述的一种基于空心立方体状的三金属纳米复合材料免疫传感器的制备方法及应用，用于甲胎蛋白抗原的检测，检测步骤如下：（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的传感器为工作电极，在10 mL的pH值为6.98的磷酸盐缓冲溶液中进行测试；（2）用时间-电流法对分析物进行检测，输入电压为- 0.4 V，取样间隔0.1 s，运行时间400 s；（3）当背景电流趋于稳定后，每隔50 s向的磷酸盐缓冲溶液中注入10 µL、5 mol/L的双氧水溶液，记录电流变化。
所属类别：	发明专利