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原文传递一种植物组织硅分布的固相荧光显微检测方法

专利名称：	一种植物组织硅分布的固相荧光显微检测方法
摘要：	本发明属于植物组织检测技术领域，公开了一种植物组织硅分布的固相荧光显微检测方法。其主要技术特征为：该方法包括制取片状试材、浓硫酸软化处理片状试材、纯水清洗浓硫酸、制备氯化锌溶液、氯化锌溶液浸泡处理片状试材、氯化钡覆盖处理片状试材、荧光显微镜观察片状试材几个步骤。本发明所提供的一种植物组织硅分布的固相荧光显微检测方法，将硅酸锌的荧光特性应用于硅的组织化学定位，将氯化钡的物理化学特性用于灰化过程中的灰相固定。该方法对实验条件、药剂浓度、处理时间的要求都不严格，适于具有倒置荧光显微镜和马弗炉基础条件的实验室开展工作。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	河北省农林科学院旱作农业研究所
发明人：	王雪征;茜晓哲;王晨阳;陈洁;庞建周
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-02T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910157709.5
公开号：	CN109668868A
代理机构：	衡水市盛博专利事务所
代理人：	李志华
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	053000 河北省衡水市胜利东路1966号
主权项：	1.一种植物组织硅分布的固相荧光显微检测方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：第一步，制取片状试材采集叶片或茎秆，叶片或茎秆的表面进行擦拭或水洗，去掉叶片或茎秆表面可干扰实验的灰尘，将叶片或茎秆徒手横切片或纵切段，做成厚度小于1毫米、长宽小于石英载玻片长宽的片状试材；第二步，浓硫酸软化处理片状试材将片状试材设置在石英载玻片上，向片状试材滴加浓硫酸，浓硫酸均布在片状试材上后，室温下平放石英载玻片4-24小时，至片状试材基本透明，以消化有机物，减少灰化时气体的扰动；第三步，纯水清洗浓硫酸趁纤维未完全消失，将石英载玻片稍微倾斜，使石英载玻片一端高一端低，用塑料滴管在石英载玻片高端滴加纯水，纯水稀释石英载玻片上的浓硫酸后形成液体，在石英载玻片低端吸走液体，重复滴加纯水至液体呈中性，消除盐类结晶对观察视野的影响；第四步，制备氯化锌溶液在通风橱中，将40毫升-60毫升浓盐酸置塑料烧杯中，将剪成细条状的锌片放入浓盐酸，注意通风和降温，不断加入锌片，至不再产生气泡，且部分锌片不再溶解为止，制成氯化锌溶液；第五步，氯化锌溶液浸泡处理片状试材平放石英载玻片，将氯化锌溶液用塑料滴管滴加在经浓硫酸软化处理的片状试材上，保持1-2小时；用吸水纸蘸尽多余液体，盖上另外一片石英载玻片，70-80℃温度下干燥23-25小时；第六步，氯化钡覆盖处理片状试材取出石英载玻片，小心将两片石英载玻片分开，将粉状氯化钡覆盖到粘有片状试材的石英载玻片上，材料较大较厚时，加一片石英载玻片压住，以防片状试材卷曲；将粘有片状试材的石英载玻片设置在马弗炉中，以120℃温度下1-2小时、200℃温度下1-2小时、300℃温度下1-2小时、500℃温度下1-2小时、720℃温度下3-4小时程序升温，然后自然冷却；第七步，荧光显微镜观察片状试材将粘有片状试材的石英载玻片由马弗炉取出，使石英载玻片粘有片状试材的一面向上，放置到倒置的荧光显微镜上，用绿色荧光模块观察植物组织硅分布。
所属类别：	发明专利