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原文传递基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒及其应用

专利名称：	基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒及其应用
摘要：	本发明公开了一种基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒及其应用，碱性磷酸酶便携式检测试剂盒包括二氧化锰纳米片、L‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐、多巴胺和缓冲溶液。该检测试剂盒利用便携式近红外激光器对反应产物进行照射，基于其温度变化，低成本的温度计或变色测温贴片便可实现对目标物的灵敏检测，可应用于检测碱性磷酸酶，具有简便、快捷、选择性好、灵敏度高等优势。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	湖南大学
发明人：	王青;刘晓峰;王柯敏;羊小海;邹利媛
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910099989.9
公开号：	CN109668881A
代理机构：	湖南兆弘专利事务所(普通合伙)
代理人：	陈晖
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	410082 湖南省长沙市岳麓区麓山南路麓山门
主权项：	1.一种基于温度变化的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，其特征在于，包括二氧化锰纳米片、L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐、多巴胺和缓冲溶液。 2.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，其特征在于，还包括氯化镁。 3.根据权利要求2所述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲溶液为Tris-HCl缓冲液。 4.根据权利要求3所述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，其特征在于，所述二氧化锰纳米片的浓度为15μg/mL～20μg/mL；和/或，所述L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的浓度为23μg/mL～46μg/mL；和/或，所述多巴胺的浓度为20μg/mL～40μg/mL；和/或，所述氯化镁的浓度为0.48mg/mL～4.8mg/mL；和/或，所述Tris-HCl缓冲液的pH为7.4。 5.根据权利要求1所述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒，其特征在于，所述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒包括20μg/mL的二氧化锰纳米片、23μg/mL的L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐、0.48mg/mL的氯化镁和20μg/mL的多巴胺和Tris-HCl缓冲液。 6.一种权利要求1至5中任一项所述的碱性磷酸酶便携式检测试剂盒在检测碱性磷酸酶中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，应用方法包括以下步骤： (1)将二氧化锰纳米片和L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐加入到缓冲液中得到检测试剂； (2)将梯度浓度的碱性磷酸酶溶液加入所述检测试剂中孵育； (3)加入多巴胺反应试剂进行反应； (4)用近红外光照射，用温度计采集温度变化，以碱性磷酸酶溶液的浓度为横坐标，以温度计上温度的变化为纵坐标绘制标准曲线，根据标准曲线计算出待测碱性磷酸酶的含量；或，用近红外光照射Ep管，观察Ep管上变色测温贴片的变化，根据碱性磷酸酶标准样品的浓度，以Ep管上变色测温贴片的变化绘制标准比色卡，根据所述标准比色卡，来与待测样品所得的条带进行对比，确定待测样品的碱性磷酸酶浓度。 8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述(2)为将氯化镁溶液和梯度浓度的碱性磷酸酶溶液加入所述检测试剂中孵育。 9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，所述(2)中孵育的时间为：30min～60min；和/或，所述(3)中所述反应的时间为20min。 10.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，所述(4)中所述近红外光照射的功率为0.4W/cm2～1.0W/cm2；照射的时间为8min～20min；环境温度为20～30℃。
所属类别：	发明专利