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原文传递抗MCV抗体定量检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	抗MCV抗体定量检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明提供一种抗MCV抗体定量检测试剂盒及其制备方法。所述抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法包括：分别制备包被板、酶标液、系列校准品、质控品、样本稀释用缓冲液、底物液和洗涤液。本发明的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，容易操作，原料成本低，制得的抗MCV抗体定量检测试剂盒使用方便，能够准确定量检测样本中的抗MCV抗体含量，可用于类风湿性关节炎的诊断。
专利类型：	发明专利
申请人：	北京森美希克玛生物科技有限公司
发明人：	肖文峰
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T02:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010002462.2
公开号：	CN111077321A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	王闯
分类号：	G01N33/68;G01N33/58;G01N33/545;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/545
申请人地址：	100000 北京市北京经济技术开发区地盛西路6号院8号楼3层301
主权项：	1.一种抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：分别制备包被板、酶标液、系列校准品、质控品、样本稀释用缓冲液、底物液和洗涤液；其中，制备包被板的步骤包括：将含有突变型瓜氨酸波形蛋白的包被液加入微孔板条的微孔中进行包被，之后弃去孔内液体，将封闭液加入微孔板条的微孔中进行封闭，之后弃去孔内液体，对微孔板条进行干燥；制备酶标液的步骤包括：将酶标物和酶联抗体进行偶联；其中，所述酶联抗体为采用抗MCV抗体作为抗原对机体进行免疫后获得的抗体；制备系列校准品的步骤包括：在校准品基质液中分别加入不同浓度的抗MCV抗体，得到不同浓度的校准品，其中，所述校准品基质液为含有8wt％～12wt％体检健康人血清的缓冲液；以缓冲液作为零点校准品；所述零点校准品选用的缓冲液与所述校准品基质液中的缓冲液相同；制备质控品的步骤包括：在质控品基质液中加入已知浓度的抗MCV抗体，其中，所述质控品基质液为体检健康人血清；制备底物液的步骤包括：在缓冲液中加入所述酶标物的反应底物；制备样本稀释用缓冲液的步骤包括：在缓冲液中加入表面活性剂，混合均匀；制备洗涤液的步骤包括：在缓冲液中加入盐与表面活性剂，混合均匀。 2.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，制备包被板的步骤中：可选的，所述包被液为含有0.5wt％～1.5wt％突变型瓜氨酸波形蛋白的碳酸盐缓冲液，所述碳酸盐缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为8.8～11.8；可选的，所述封闭液为含有0.8wt％～1.2wt％牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为6.9～7.9；可选的，将包被液加入微孔板条中进行包被的条件为：2℃～8℃，包被16～24小时；将封闭液加入微孔板条中进行封闭的条件为：34℃～40℃，封闭1.5～2小时。 3.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，制备包被板的步骤中：可选的，对微孔板条进行干燥的方式为：将微孔板条置于干燥箱中35℃～40℃干燥1.5～2小时；可选的，所述微孔板条的材质为聚苯乙烯。 4.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，制备酶标液的步骤中：可选的，将酶标物和酶联抗体进行偶联后，用缓冲液将酶标物和酶联抗体的偶联产物稀释至工作浓度；可选的，将偶联产物稀释至工作浓度用的缓冲液为含有0.5wt％～1.5wt％表面活性剂的Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液；所述Tris缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为9.3～12.3，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为6.9～7.9；可选的，所述酶标物包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和吖啶酯中的至少一种；优选的，所述酶联抗体为采用抗MCV抗体作为抗原对机体进行免疫后获得的IgG类抗体。 5.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述包被板上包被的突变型瓜氨酸波形蛋白为人源性突变型瓜氨酸波形蛋白；所述酶联抗体为采用人源性抗MCV抗体作为抗原对机体进行免疫后获得的抗体；可选的，所述酶联抗体包括羊抗人抗体、兔抗人抗体和鼠抗人抗体中的至少一种。 6.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，制备系列校准品的步骤中：可选的，所述缓冲液为Tris缓冲液，所述Tris缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为9.3～12.3；可选的，所述系列校准品包括抗MCV抗体浓度分别为0U/mL、20U/mL、40U/mL、100U/mL、300U/mL、1000U/mL的校准品。 7.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，制备质控品的步骤中：所述质控品包括抗MCV抗体浓度为0U/mL～20U/mL的第一水平质控品与抗MCV抗体浓度为100U/mL～300U/mL的第二水平质控品。 8.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，制备底物液的步骤中：可选的，所述酶标物的反应底物为化学发光底物；可选的，所述酶标物为辣根过氧化物酶和/或吖啶酯时，所述酶标物的反应底物包括过氧化物；所述酶标物为碱性磷酸酶时，所述酶标物的反应底物包括3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐；可选的，所述底物液中的缓冲液为柠檬酸缓冲液或Tris缓冲液，所述柠檬酸缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为4.8～6.4，所述Tris缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为9.3～12.3。 9.如权利要求1所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，可选的，制备样本稀释用缓冲液的步骤中，在Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液中加入0.5wt％～1.5wt％的表面活性剂，所述Tris缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为9.3～12.3，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.03mol/L～0.07mol/L，pH为6.9～7.9；可选的，制备洗涤液的步骤中，在磷酸盐缓冲液中加入160～200g/L的氯化钠和0.5wt％～1.5wt％的表面活性剂，混合均匀，所述磷酸盐缓冲液的浓度为0.3mol/L～0.7mol/L，pH为7.3～8.3；可选的，所述表面活性剂为吐温-20或吐温-80。 10.一种抗MCV抗体定量检测试剂盒，由如权利要求1-9任一项所述的抗MCV抗体定量检测试剂盒的制备方法制得，其特征在于，包括：包被板、酶标液、系列校准品、质控品、样本稀释用缓冲液、底物液和洗涤液。
所属类别：	发明专利