详情

原文传递一种河豚毒素成分分析标准物质的制备方法

专利名称：	一种河豚毒素成分分析标准物质的制备方法
摘要：	本发明公开了一种河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，以河豚鱼为样本，经清洗、去杂、均质、定量混合、冻干、粉碎、过筛、分装、辐照、保藏等工艺，制得候选标准物质。对分装好的标准物质，进行最小取样量、均匀性、稳定性检验，确保其满足国家标准物质特性的需求。本发明的制备方法，可更好地保留基质中的原有成分，且具有较好的均匀性、稳定性、复水性以及更长的保质期，填补了国内外河豚毒素基质标准物质的空白；本发明的基质标准物质可有效评价相关实验室的河豚毒素检测能力和水平，可用于河豚毒素定性定量分析的质量控制，确保水产品中河豚毒素检测的准确性，为食品安全保驾护航。
专利类型：	发明专利
申请人：	浙江清华长三角研究院
发明人：	王兴龙;任一平;蔡强;诸寅;杨大进;许娇娇
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T08:00:00+0805
申请号：	CN202010119461.6
公开号：	CN111122752A
代理机构：	浙江千克知识产权代理有限公司
代理人：	赵卫康
分类号：	G01N30/06;G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/88
申请人地址：	314001 浙江省嘉兴市南湖区亚太路705号A座915
主权项：	1.一种河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤： S1. 样本采集：采集野生河豚鱼作为基质标准物质的阳性样本，养殖的河豚鱼作为阴性样本； S2. 样本处理：分别将阳性样本和阴性样本分解出肌肉、肝脏，称量后将组织剪碎，充分均质； S3. 候选物制备： ① 利用液相色谱-串联质谱法，对阳性、阴性样本中的河豚毒素含量进行测定，然后按照预设的标准物质总质量、毒素含量，计算出阳性样本、阴性样本混合所需的质量，按计算值混合阳性样本和阴性样本； ② 将混合样本搅拌混匀，再进行冷冻干燥； ③ 将干燥后的块状样本粉碎过筛，得到河豚毒素成分分析候选物； S4. 标准物质制备：将得到的候选物混匀，然后随机抽取至少10份小样，进行均匀性初筛，如果测得小样的河豚毒素含量的RSD≤5%，则可作为河豚毒素成分分析标准物质进行样本分装，否则继续延长混匀时间；样本分装密封，在-20～-80℃冷冻保存， S5. 性能评估：对步骤S4制备的标准物质，进行最小取样量、均匀性、稳定性检验。 2.根据权利要求1所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤S5中最小取样量和均匀性采用F检验进行分析；稳定性包括25℃短期稳定性和4℃长期稳定性。 3.根据权利要求2所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：分别对均匀性和稳定性的检验结果合成标准物质定值不确定度。 4.根据权利要求1所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤S3中冷冻干燥的具体过程和工艺参数如下：预冻温度 -25～-30℃，预冻时间1 h；升华干燥设定为两个阶段，第一阶段升华温度设定为-15～-25℃，升华时间10～15h，第二阶段升华温度设定为 -4～-8℃，升华时间10～15h；解析干燥温度设定为10～20℃，解析干燥时间5～10h。 5.根据权利要求4所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：冷冻干燥前需要将混匀的组织样本平铺，平铺厚度在1～4cm。 6.根据权利要求1所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤S3混合样本混匀过程采用旋转搅拌机连续搅拌至少2h；步骤S4候选物混匀过程采用三维混匀机至少混匀12 h。 7.根据权利要求1所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤S3中过筛目数为75～100目。 8.根据权利要求1所述的河豚毒素成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中样本分装密封后经Co-60γ射线照射灭菌再进行冷冻保存。 9.根据权利要求1～8任一所述的制备方法制得的河豚毒素成分分析标准物质。 10.根据权利要求9所述河豚毒素成分分析标准物质的用途，包括水产品中河豚毒素检测方法的验证，以及实验室间对河豚毒素检测能力和水平的考核。
所属类别：	发明专利