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原文传递一种ZIF纳米酶及其制备方法和应用

专利名称：	一种ZIF纳米酶及其制备方法和应用
摘要：	本发明涉及一种ZIF纳米酶及其制备方法和应用。制备方法为：制备铜纳米团簇CuNCs；制备铜纳米团簇加Al离子CuNCs+Al3+溶液；最后制备纳米酶CuNCs‑GOx/ZIF‑90溶液。本发明提供的人工纳米酶易于合成、成本低且低毒无污染，在优化后的最佳实验条件下以葡萄糖为模型，通过纳米酶催化的级联反应，实现了对葡萄糖的高灵敏度和高选择性检测。将其应用于活体大鼠的血糖监测，取得了满意的结果，对糖尿病的研究和临床诊断有一定的指导意义。
专利类型：	发明专利
申请人：	烟台职业学院
发明人：	韩艳艳
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T01:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T08:00:00+0805
申请号：	CN202010248480.9
公开号：	CN111122533A
代理机构：	北京中济纬天专利代理有限公司
代理人：	马国冉
分类号：	G01N21/64;G01N1/38;G;G01;G01N;G01N21;G01N1;G01N21/64;G01N1/38
申请人地址：	264032 山东省烟台市莱山区滨海中路2018号
主权项：	1.一种ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，步骤包括： 1）铜纳米团簇CuNCs的制备：将谷胱甘肽水溶液与 CuSO4·5H2O水溶液充分混合，调节pH=7，待溶液由白色悬浊状态变至澄清透明状态后，得铜纳米团簇溶液； 2）铜纳米团簇加Al离子CuNCs+Al3+溶液的制备：在所述铜纳米团簇溶液中加入0.1 M的Al离子水溶液,搅拌5分钟，待溶液由澄清透明状态变至白色浑浊状态，得CuNCs+Al3+溶液； 3）纳米酶CuNCs-GOx/ZIF-90溶液的制备：在所述CuNCs+Al3+溶液中加入葡萄糖氧化酶，再与ZIF-90 DMF溶液混合，混合均匀搅拌12 h，静置30-60分钟，移除上清液，8000–10000 rpm离心5–10分钟，再用5-10 mL DMF溶液洗涤3次，洗涤后8000–10000 rpm离心5–10分钟，烘干后得纳米酶CuNCs-GOx/ZIF-90。 2.如权利要求1所述的ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，所述谷胱甘肽水溶液的浓度为50 mM，所述CuSO4·5H2O水溶液的浓度为10 mM，谷胱甘肽和 CuSO4·5H2O的摩尔比是5:1。 3.如权利要求1所述的ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，所述铜纳米团簇溶液中的铜纳米团簇和Al离子水溶液中的Al离子的摩尔比是5:1。 4.如权利要求1所述的ZIF纳米酶的制备方法，其特征在于，所述CuNCs+Al3+、葡萄糖氧化酶以及ZIF-90的摩尔比是5:1:10。 5.一种ZIF纳米酶，其特征在于，如权利要求1-4任一项所述的ZIF纳米酶的制备方法制备得到。 6.一种ZIF纳米酶的应用，其特征在于，所述应用是ZIF纳米酶应用于生物体内葡萄糖的检测。 7.如权利要求6所述的ZIF纳米酶的应用，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：将大脑皮层微透析液100 μL加入到200–500 μL ZIF纳米酶溶液中，混匀后加入aCSF溶液至1 mL；在25–37 ℃温度下孵育10–60分钟；在365 nm的激发波长下测定其荧光发射强度，并将强度值代入线性关系式，确定葡萄糖的浓度范围。 8.如权利要求7所述的ZIF纳米酶的应用，其特征在于，所述检测葡萄糖的线性关系式的获得是：取100 μL含有0-1 mM不同浓度葡萄糖的Tris-HCl溶液分别加入盛有400 μL的2mg/mL的ZIF纳米酶水溶液的离心管中，室温下反应五分钟后，超纯水定容至2 mL，最终的混合溶液在37 °C的条件下孵化60分钟，以365 nm为激发波长测定发射强度，并将得到的实验数据整理作图获得线性关系式，线性关系为I0-I/I0=0.0011c1+0.0310（10-100 μM）、I0-I/I0=0.00011c2+0.1126 （100-1000 μM），其中I0为不加葡萄糖时的荧光强度，I为加入不同浓度葡萄糖后的荧光强度。
所属类别：	发明专利