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原文传递尿结石风险因子检测纸芯片及其制备方法

专利名称：	尿结石风险因子检测纸芯片及其制备方法
摘要：	本发明涉及临床检验分析化学技术领域，具体涉及尿结石风险因子检测纸芯片及其制备方法，通过上层检测芯片和下层辅助芯片配合检测，将多种比色及络合试剂等结合到纸芯片上，滴加定量尿液即可实现对于尿结石风险因子钙、磷、草酸、尿酸的实时快速检测，患者可通过配套移动设备App或者对照比色卡目视实现对以上风险因子含量的半定量检测，实现随时随地，长期跟踪监测健康状况，对于泌尿结石的快速诊断、疗效监测以及复发预测具有重要指导意义，具有操作简单、检测快速、无需等待、节约费用等许多优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	东北大学
发明人：	杨婷;李昕;冯立霞;王建华
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T12:00:00+0805
申请号：	CN201911420944.3
公开号：	CN111141898A
代理机构：	北京君泊知识产权代理有限公司
代理人：	李丹
分类号：	G01N33/50;C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/62;C12Q1/28;C12Q1/26;G;C;G01;C12;G01N;C12M;C12Q;G01N33;C12M1;C12Q1;G01N33/50;C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/62;C12Q1/28;C12Q1/26
申请人地址：	110819 辽宁省沈阳市和平区文化路3号巷11号
主权项：	1.尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，所述的纸芯片为纸基微流控芯片，所述的纸芯片包括上层检测芯片和下层辅助芯片，所述的上层检测芯片包括上层外围疏水区和上层亲水区，所述的上层亲水区包括中心加样区、流通区和检测区，所述的中心加样区位于上层检测芯片的中心，呈圆形结构，流通区沿着中心区周向均匀排布，所述的流通区与中心区连通，所述的流通区呈条状结构，所述的流通区的外端部匹配设置检测区，所述的检测区为圆形结构；所述的下层辅助芯片包括下层外围疏水区和下层亲水区，所述的下层亲水区连接上层亲水区的流通区和检测区。 2.根据权利要求1所述的尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，所述的尿结石风险因子包括：钙、磷、草酸和尿酸。 3.根据权利要求1所述的尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，所述的检测区为五个，分别为钙检测区、磷检测区、草酸检测区、尿酸检测区和质控区，所述的质控区用于检查待测溶液浸润程度和完全浸润所需的时间。 4.根据权利要求2或3任一项所述的尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，所述的检测区预先固载上显色剂，其中：钙检测区采用邻甲酚酞络合酮为显色剂；磷检测区采用二价Pb2+离子与4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)等摩尔比例络合的产物为显色剂；草酸和尿酸检测区均采用3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(TMB)为显色剂。 5.根据权利要求1所述的尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，所述的上层外围疏水区和下层外围疏水区均为疏水蜡封。 6.根据权利要求1所述的尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，所述的上层亲水区的中心加样区的直径为8mm，所述的流通区的宽度为2mm，长度为6mm，所述的检测区的直径为4mm，所述的下层亲水区为边长3mm的正方形结构，所述的下层亲水区连接上层亲水区的流通区和检测区时，流通区和检测区之间的距离小于下层亲水区的边长。 7.根据权利要求1所述的尿结石风险因子检测纸芯片，其特征在于，检测时，待检测尿液混合物样品滴加至上层检测芯片的中心加样区，尿液混合物样品在纸纤维的毛细作用下自发均匀地经由流通区定量地流向检测区方向，流到流通区的端部时，渗透至下层辅助芯片上，并由下层亲水区辅助渗透至检测区。 8.根据权利要求1、2、3、5、6、7任一项所述的尿结石风险因子检测纸芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)设计上层检测芯片和下层辅助芯片按照中心加样区直径为8mm，流通区的宽度为2mm，长度为6mm，检测区的直径为4mm，设计好上层检测芯片，下层亲水区为沿着周向均匀排布的边长为3mm的正方形； (2)使用彩色喷蜡打印机，将步骤(1)设计好的上层检测芯片和下层辅助芯片的构型打印于普通定性滤纸上，置于120±2℃的烘箱内烘干55-65s； (3)在上层检测芯片的检测区固载显色剂对于钙检测区，按照以下配方配制工作试剂：pH8-10的1.25wt％2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)缓冲液，0.46wt％邻甲酚酞络合剂，11.3wt％聚乙烯吡咯烷酮，0.45wt％8-羟基喹啉，0.04wt％柠檬黄的水溶液；将配好的溶液取2.5uL均匀加到检测区，并室温下晾干10-15min；对于磷检测区，将40-50mmol/L二价Pb2+离子及4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)的混合液加入5％曲拉通X-100，混匀后，取2.5uL均匀加到检测区；对于尿酸及草酸的检测区，依次将显色剂沉淀型TMB、氧化酶及辣根过氧化物酶三种溶液，加到检测区，每加一种试剂后，室温晾干10-15min；其中尿酸检测所用尿酸酶浓度为1000U/mL，沉淀型TMB浓度为10mmol/L，辣根过氧化物酶浓度为2.38mg/mL，三种溶液体积均为2.5μL；草酸检测所用草酸氧化酶浓度为500U/mL，沉淀型TMB浓度为50mmol/L，辣根过氧化物酶浓度为10μg/mL，三种溶液体积均为2.5μL； (4)将上层检测芯片和下层辅助芯片叠加，将下层亲水区完全覆盖住上层检测芯片的流通区和检测区，通过夹持装置将上层检测芯片和下层辅助芯片固定住；使得上层检测芯片和下层辅助芯片充分接触。 9.根据权利要求8所述的尿结石风险因子检测纸芯片的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的对于尿酸及草酸的检测区，加入显色剂之前采用10uL0.5mol/L高碘酸钠滴加至检测区，室温避光30-35min后用10uL超纯水清洗若干次，然后将检测区底部与吸墨纸接触，吸收检测区底部多余的洗涤液，室温晾干。
所属类别：	发明专利