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原文传递一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法

专利名称：	一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法
摘要：	本发明公开了一种HPLC‑MS‑MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，包括以下步骤：分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测人血浆中加入50.0ng/mL卡马西平‑d8内标工作液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍即可进样分析。分别向空白基质和水样中加入50％乙腈水溶液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍即可进样分析。将上述处理后的各个样品分别注入液相色谱质谱联用仪中，对卡马西平以及卡马西平‑d8成分进行定量检测。本发明对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。
专利类型：	发明专利
申请人：	安领生物医药(苏州)有限公司
发明人：	王樱桃;滕馨莹
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T15:00:00+0805
申请号：	CN201911420890.0
公开号：	CN111157641A
代理机构：	苏州隆恒知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	周子轶
分类号：	G01N30/02;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72
申请人地址：	215000 江苏省苏州市工业园区金鸡湖大道99号11栋504室
主权项：	1.一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、样品制备：制备校正标示样品：以卡马西平为溶质，以50％乙腈水溶液为溶剂，配制卡马西平梯度浓度为20～20000ng/mL的校正标示工作液；分别取各浓度校正标示工作液，用空白基质稀释20倍，得到校正标示样品；制备质控样品：以卡马西平为溶质，以50％乙腈水溶液为溶剂，配制卡马西平梯度浓度为20～16000ng/mL的质控工作液；分别取各浓度质控工作液，用空白基质稀释20倍，得到质控样品；制备内标样品：以卡马西平-d8为溶质，以甲醇二甲基亚砜溶液为溶剂，得到卡马西平-d8储备液；将储备液用50％乙腈水溶液稀释得到卡马西平-d8浓度为50.0ng/mL、10000ng/mL的内标工作液；分别取各浓度内标工作液，用空白基质稀释20倍，得到内标样品；步骤二、样品处理：分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测人血浆中加入50.0ng/mL卡马西平-d8内标工作液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍；分别向空白基质和水样中加入50％乙腈水溶液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍；步骤三、样品检测：将上述步骤二中处理后的校正标示样品、质控样品、内标样品、待测人血浆、空白基质和水样分别注入液相色谱质谱联用仪中，对卡马西平以及卡马西平-d8成分进行定量检测。 2.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述步骤一中甲醇二甲基亚砜溶液中，甲醇和二甲基亚砜的体积比为1:1。 3.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：固定相：填料粒径为5μm，直径2mm，长度50mm的Gemini C18色谱柱；流动相：流动相为为A和B的混合体系，A为甲酸水溶液，其中甲酸与水的体积比为0.1:100；B为甲酸乙腈溶液，其中甲酸与乙腈的体积比为0.1:100；洗脱梯度为： 0.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％； 1.3min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％； 2min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％； 2.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％； 3min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％。 4.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，所述液相色谱进样器清洗液为：强洗采用30％乙腈水溶液，弱洗采用甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、水、氨水按照体积比30:30:10:10:20:1混合而成。 5.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：流速：0.2～0.6mL/min。 6.根据权利要求5所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：流速：0.4mL/min；柱温：40℃；自动进样器温度：8℃；进样量：5μL。 7.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述质谱条件进行检测：离子源：电喷雾离子源；离子化模式：正离子模式；分辨力模式为Unit；碰撞气、气帘气、雾化气、辅助气1和辅助气2均为高纯氮气；喷雾电压5000V。
所属类别：	发明专利