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原文传递 使用流式细胞仪检测荧光素酶标记细胞的方法
专利名称: 使用流式细胞仪检测荧光素酶标记细胞的方法
摘要: 本发明公开了流式细胞仪在检测荧光素酶标记细胞的新用途,属于细胞检测领域。本发明使用流式细胞仪替代荧光酶标仪检测细胞中的荧光素酶与底物反应的发光信号,扩展了流式细胞仪的用途,为检测荧光素酶标记细胞提供了新的方法。
专利类型: 发明专利
申请人: 四川大学华西医院
发明人: 王方芳;黄菁草;杨艳;范庆超
专利状态: 有效
申请日期: 1900-01-20T06:00:00+0805
发布日期: 1900-01-20T15:00:00+0805
申请号: CN202010013013.8
公开号: CN111157434A
代理机构: 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 李高峡;张娟
分类号: G01N15/14;G;G01;G01N;G01N15;G01N15/14
申请人地址: 610000 四川省成都市武侯区国学巷37号
主权项: 1.一种使用流式细胞仪检测荧光素酶标记细胞的方法,其特征在于: 它包括如下步骤:将带有荧光素酶基因的细胞与荧光素盐共同孵育1~10min后,使用流式细胞仪488nm波长激发光激发荧光,用第二通道接收发射荧光,最后经处理得到荧光信号; 所述第二通道的带通滤光片能接受515nm-544nm波长范围的发射荧光。 2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:荧光素盐浓度为2.25~3.75mg/mL。 3.如权利要求2所述的方法,其特征在于:细胞密度是(10~50)×104个/mL。 4.如权利要求1~3任一所述的方法,其特征在于: 它还包括如下步骤: 1)将不带有荧光素酶基因的细胞与荧光素盐共同孵育1~10min后,使用流式细胞仪488nm波长激发光激发荧光,用第二通道检测荧光信号,作为阴性对照; 2)将带有荧光素酶基因的细胞直接用流式细胞仪检测,使用的激发光波长为488nm,用第二通道检测荧光信号,作为空白对照。 5.如权利要求4所述的方法,其特征在于: 步骤1)和步骤2)中细胞密度是(10~50)×104个/mL; 和/或,步骤1)中的荧光素盐浓度为2.25~3.75mg/mL。 6.如权利要求1~3任一所述的方法,其特征在于:所述细胞为肿瘤细胞。 7.如权利要求1~3任一所述的方法,其特征在于:所述细胞为干细胞。
所属类别: 发明专利
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