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原文传递一种基于光子晶体的外泌体多元检测方法

专利名称：	一种基于光子晶体的外泌体多元检测方法
摘要：	本发明公开了一种基于光子晶体的外泌体多元检测方法，基于核壳式光子晶体材料，通过在其表面修饰不同的肿瘤特异性适配体，实现对不同肿瘤来源的外泌体亚群多元检测，最终通过CD63适配体的双重识别及杂交链式反应得到放大的荧光，进而对外泌体进行检测。该方法具有稳定性好、准确、高效、节省时间、避免重复劳动等优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	东南大学
发明人：	陈宝安;马晓燕;栾成欣;吴雪;周芳;张静
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T14:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T15:00:00+0805
申请号：	CN202010039641.3
公开号：	CN111157504A
代理机构：	南京苏高专利商标事务所(普通合伙)
代理人：	冒艳
分类号：	G01N21/64;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/64
申请人地址：	211102 江苏省南京市江宁区东南大学路2号
主权项：	1.一种基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：首先在活化后的核壳式光子晶体材料表面修饰不同的肿瘤特异性适配体，实现对不同肿瘤来源的外泌体亚群多元检测，与外泌体溶液共同孵育后，利用CD63适配体进行双重识别及杂交核酸链式反应得到放大的荧光。 2.根据权利要求1所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述核壳式光子晶体材料的制备方法，包括如下步骤： (1)制备光子晶体微球模板：单分散的胶体晶体纳米粒子加去离子水稀释形成胶体溶液，用微流控装置剪切成单分散的液滴，固化液滴模板，清洗，煅烧之后，即可； (2)制备核壳式光子晶体水凝胶微球：将光子晶体微球投入水凝胶聚合前体溶液中，固化后将水凝胶浸泡在去离子水中，根据微球内外不同的膨胀程度从水凝胶中剥离光子晶体微球，通过腐蚀得到核壳式光子晶体材料。 3.根据权利要求2所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中胶体晶体纳米粒子为二氧化硅胶体粒子、二氧化钛胶体粒子或聚苯乙烯类聚合物溶液。 4.根据权利要求2所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中水凝胶聚合前体溶液为聚乙二醇双丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯明胶或丙烯酸中的一种或几种的混合。 5.根据权利要求2所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中腐蚀所用的腐蚀剂是氢氟酸或氢氧化钠。 6.根据权利要求1所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述肿瘤特异性适配体为Epcam适配体、PSMA适配体、MUC-1适配体或AS1411适配体。 7.根据权利要求1所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述CD63适配体有一段能够触发杂交链式反应的序列，所述序列为SEQ ID NO.1： 5’-caccccacctcgctcccgtgacactaatgctat ttt ttt aaccctaaccct-3’。 8.根据权利要求1所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述杂交核酸链式反应所用的两段序列为SEQ ID NO.2∶5’-actttgaaccctagggttagggtt-3’；SEQ IDNO.3：5’-agggttcaaagtaaccctaaccct-3’，两段序列均为FAM荧光修饰。 9.根据权利要求1所述的基于光子晶体的外泌体多元检测方法，其特征在于：所述用MES/EDC/NHS活化系统进行活化。
所属类别：	发明专利