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原文传递一种基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法

专利名称：	一种基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法
摘要：	一种基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法，包括：制备3,5‑二氨基‑1,2,4‑三唑重氮盐溶液、TNA/g‑C3N4，构建TNA/g‑C3N4/DAT传感器，光电化学法检测测定酸性磷酸酶的浓度获得工作曲线及TNA/g‑C3N4/DAT传感器的再生。本发明的方法是一种新型的基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法，与现有检测技术相比，操作简便，选择性好，灵敏度高，准确度好，构建的传感器稳定性更好，而且通过再生可反复使用，有效地降低了经济成本和时间成本，可实现规模化生产和快速获取酸性磷酸酶的含量以便于临床快速诊断。
专利类型：	发明专利
申请人：	江苏师范大学
发明人：	卢菊生;田久英;黄明娟;周春红
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T07:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
申请号：	CN202010013385.0
公开号：	CN111189895A
分类号：	G01N27/30;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/30
申请人地址：	221000 江苏省徐州市铜山区上海路101号
主权项：	1.一种基于电子转移抑制策略的光电化学检测酸性磷酸酶的方法，其特征在于，包括： S1：制备3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐溶液； S2：通过电解氧化制备二氧化钛纳米管阵列，在二氧化钛纳米管阵列上原位合成类石墨氮化碳，得TNA/g-C3N4； S3：使用三电极系统进行电化学接枝3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐到TNA/g-C3N4电极表面，其中TNA/g-C3N4为工作电极，铂片为对电极，饱和甘汞电极为参比电极，以3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐溶液为电解质溶液，在一定的电位窗口范围内通过循环伏安法进行扫描若干个循环，得到TNA/g-C3N4/DAT传感器； S4：首先测量可见光照射下TNA/g-C3N4/DAT的光电流，记为I0；将TNA/g-C3N4/DAT浸入若干组Tris-HCl缓冲溶液中，各组Tris-HCl缓冲溶液中含有一定浓度的Fe(III)、抗坏血酸2-磷酸酯和一定浓度的酸性磷酸酶，平衡一段时间，可见光照射，测得光电流值为I；传感器的光电流变化值△I＝I-I0，根据△I与酸性磷酸酶的浓度C的变化关系获得线性回归方程为△I＝0.767C(U L-1)+1.595，0.05U L-1≤C≤100U L-1； S5：首先测量可见光照射下TNA/g-C3N4/DAT的光电流，记为I0；将TNA/g-C3N4/DAT浸入Tris-HCl缓冲溶液中，Tris-HCl缓冲溶液中含有一定浓度的Fe(III)、抗坏血酸2-磷酸酯和未知浓度的酸性磷酸酶，平衡一段时间，可见光照射，测得光电流值为I；传感器的光电流变化值△I＝I-I0，将△I代入步骤S4中的线性方程计算出待测酸性磷酸酶的浓度。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1具体包括：配制3,5-二氨基-1,2,4-三唑的0.2M盐酸溶液，并通干燥氮气一段时间，然后在饱和氮气氛下将一定体积的亚硝酸钠溶液加入到3,5-二氨基-1,2,4-三唑盐酸溶液中，冰水浴中搅拌一段时间，生成3,5-二氨基-1,2,4-三唑重氮盐溶液。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的亚硝酸钠溶液与所述3,5-二氨基-1,2,4-三唑盐酸溶液的体积比为1：50。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2具体包括：通过电解氧化制备二氧化钛纳米管阵列,将二氧化钛纳米管阵列浸渍在一定浓度的尿素溶液中，静止保持一定时间，取出晾干，置于坩埚中并放入高温炉，盖上坩埚盖，升温至煅烧温度煅烧一段时间，得TNA/g-C3N4。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述尿素溶液的浓度为10wt％，二氧化钛纳米管阵列在尿素溶液中静止时间为8小时，高温炉的升温速率为3℃min-1，煅烧温度为550℃，煅烧时间为3小时。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中，循环伏安法的电位窗口范围为-0.8至+0.6V，扫描速率为10mV s-1，循环次数为15次。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S4和S5中，Tris-HCl缓冲溶液中Fe(III)和抗坏血酸2-磷酸酯的浓度分别为0.5μM和1.0μM。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括步骤S6：将一次检测完毕的TNA/g-C3N4/DAT/Fe(II)浸入含有配位剂的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，室温下放置一段时间，使传感器获得再生。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述步骤S6具体包括：将一次检测完毕的TNA/g-C3N4/DAT/Fe(II)浸入含有邻二氮菲的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，室温下放置一段时间，使传感器获得再生。 10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液的浓度为0.1M，pH＝4.0，邻二氮菲的浓度为10mM，室温下放置时间为30分钟。
所属类别：	发明专利