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原文传递抗磷脂酶A2受体自身抗体的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法

专利名称：	抗磷脂酶A2受体自身抗体的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法
摘要：	本发明公开了抗磷脂酶A2受体自身抗体免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法，其包括，PLA2R‑IgG荧光免疫层析试纸条、微球溶液；所述微球溶液中，其微球为偶联有抗人IgG抗体的荧光微球；所述PLA2R‑IgG荧光免疫层析试纸条，包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板，层析膜上设置检测线和质控线，检测线上涂有PLA2R抗原，质控线上涂有能捕获微球表面抗体的二抗。本发明在现有试纸条基础上改变了试纸条的构造，去除结合垫；并采用了不同的检测步骤，即：两步法反应，第一步加入样本孵育，第二步加入示踪物。本发明研究发现，采用本发明方法显著提高了特异性的荧光信号强度。
专利类型：	发明专利
申请人：	江苏省原子医学研究所
发明人：	张艺;周彬;郭明明;谢敏浩;金浩然
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T14:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010036023.3
公开号：	CN111198273A
代理机构：	南京灿烂知识产权代理有限公司
代理人：	朱妃
分类号：	G01N33/68;G01N33/58;G01N33/564;G01N33/558;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/564;G01N33/558
申请人地址：	214063 江苏省无锡市滨湖区钱荣路20号
主权项：	1.一种抗磷脂酶A2受体自身抗体的免疫检测试剂盒，其特征在于：包括，PLA2R-IgG荧光免疫层析试纸条、微球溶液；所述PLA2R-IgG荧光免疫层析试纸条，包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板，所述层析膜上设置检测线和质控线，所述检测线上涂有PLA2R抗原，所述质控线上涂有能捕获微球表面抗体的二抗；所述微球溶液中，其微球为偶联有抗人IgG抗体的荧光微球；所述微球溶液，其微球的浓度为10～50μg/mL；所述抗体与微球偶联反应的质量比为1：10～100。 2.如权利要求1所述的抗磷脂酶A2受体自身抗体免疫检测试剂盒，其特征在于：所述微球溶液为含有蛋白和表面活性剂的缓冲液，所述荧光微球为塑料材质；所述微球，其直径为100～500nm。 3.如权利要求1或2所述的抗磷脂酶A2受体自身抗体免疫检测试剂盒，其特征在于：所述荧光微球，其荧光物质包括异硫氰酸荧光素或镧系元素；所述层析膜包括醋酸纤维素膜。 4.如权利要求1或2所述的PLA2R-IgG的免疫检测试剂盒，其特征在于：所述检测线，其涂有的PLA2R抗原含量为5～50ng/mm2。 5.制备如权利要求1所述的PLA2R-IgG的免疫检测试剂盒的方法，其特征在于：包括制备微球溶液，所述制备微球溶液的制备方法为：活化微球：将微球加入碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺进行活化；偶联：加入2-(N-吗啉)乙磺酸溶液清洗后，再加入抗人IgG抗体，按抗体与微球的质量比为1：10～100进行偶联；封闭：加入封闭液进行封闭；洗涤：去除未反应物，获得偶联微球；稀释：将偶联得到的微球稀释至10～50μg/mL待用。 6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述2-(N-吗啉)乙磺酸溶液，其pH为4.0-6.5；所述封闭液，含有10％牛血清白蛋白；所述洗涤，其洗涤液为含有Tween-20的Tris-HCl缓冲液。 7.权利要求1所述的免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于：包括，将样品滴加在样品垫中孵育10～30min；向样品垫加入微球溶液，孵育10～30min；进行荧光检测。 8.如权利要求7所述的免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于：所述样品，其在滴加到样品垫之前先进行稀释，稀释倍数为50～200倍。
所属类别：	发明专利