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原文传递肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法

专利名称：	肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法
摘要：	本发明公开了肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法，其包括，荧光免疫层析试纸条、微球溶液、样品稀释液；所述荧光免疫层析试纸条，包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板，所述层析膜上设置检测线和质控线，所述检测线上涂有抗人IgM抗体；所述微球溶液中，含有偶联着MP抗原的微球。本发明通过采用免疫层析试纸条提高了检测速率。通过采用荧光物质实现定量检测。通过在现有试纸条基础上改变了试纸条的构造，去除结合垫；并采用了不同的检测步骤，从而显著提高了特异荧光信号的强度和灵敏度，降低了检测背景干扰和非特异结合。
专利类型：	发明专利
申请人：	江苏省原子医学研究所
发明人：	张艺;胡志刚;周彬;金浩然;郭明明;杨润琳;谢敏浩;范俊
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T20:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010062441.X
公开号：	CN111208292A
代理机构：	南京灿烂知识产权代理有限公司
代理人：	朱妃
分类号：	G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/546;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/546
申请人地址：	214063 江苏省无锡市滨湖区钱荣路20号
主权项：	1.一种肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其特征在于：包括，荧光免疫层析试纸条、微球溶液、样品稀释液；所述荧光免疫层析试纸条，包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板，所述层析膜上设置检测线和质控线，所述检测线上涂有抗人IgM抗体；所述微球溶液中，含偶联有MP抗原的微球，微球的浓度为5～50μg/mL；所述MP抗原与微球偶联反应的质量比为1：10～100。 2.如权利要求1所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其特征在于：所述样品稀释液中含有蛋白质和表面活性剂。 3.如权利要求2所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其特征在于：所述样品稀释液包括0.1～1.0％BSA和0.1～2.0％S9。 4.如权利要求1～3中任一项所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其特征在于：所述荧光微球，其为聚苯乙烯材质；所述微球，其直径为100～500nm。 5.如权利要求1～3中任一项所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其特征在于：所述荧光微球，其荧光物质包括异硫氰酸荧光素或镧系元素；所述层析膜包括硝酸纤维素膜。 6.如权利要求1～3中任一项所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒，其特征在于：所述检测线，其抗人IgM抗体的含量为20～250ng/mm2。 7.制备如权利要求1所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的方法，其特征在于：包括，制备含有偶联着MP抗原的微球，所述微球的制备方法为：活化微球：将碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺加入微球进行活化；偶联：加入2-(N-吗啉)乙磺酸溶液清洗后，再加入MP抗原，按抗体与微球的质量比为1：10～100进行偶联；封闭：加入封闭液进行封闭；洗涤：去除未反应物，获得偶联微球；稀释：将偶联得到的微球稀释至10～50μg/mL。 8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述2-(N-吗啉)乙磺酸溶液，其pH为4.5；所述活化液，含有碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺；所述封闭液，含有10％牛血清白蛋白；所述洗涤，其洗涤液为含有Tween-20的Tris-HCl缓冲液。 9.权利要求1所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于：将样品滴加在样品垫中孵育5～30min；向样品垫加入微球溶液，孵育5～30min；进行荧光检测，获得样本值。 10.如权利要求9所述的肺炎支原体抗体IgM的免疫检测试剂盒的使用方法，其特征在于：所述样品，其在滴加到样品垫之前先进行稀释，稀释倍数为50～1000倍。
所属类别：	发明专利