详情

原文传递一种硝基呋喃类代谢物的前处理方法及其检测方法

专利名称：	一种硝基呋喃类代谢物的前处理方法及其检测方法
摘要：	本发明提供一种硝基呋喃类代谢物的前处理方法及其检测方法。其中，硝基呋喃类代谢物的前处理方法为：将样品搅碎后加入盐酸和2‑硝基苯甲醛，超声混合均匀后，在160～500W微波条件下反应1.5～5min；再加入功能化纳米磁珠悬浮液，超声混匀后静置、分离，获得待测液。本发明的样品衍生化反应采用低功率微波处理，反应可以在短时间内迅速完成，反应时间短，衍生效率高，且该前处理方法可有效缩短检测时间；采用具有较高的特异性识别能力，吸附能力强的功能化纳米磁珠富集硝基呋喃类代谢物，可通过外加磁场快速方便的从复杂基质中分离出来，不需要额外的离心或过滤过程，操作简便。
专利类型：	发明专利
申请人：	杭州南开日新生物技术有限公司
发明人：	桑丽雅;叶茂;陶润华;张少恩;王振国;陈笑笑;王伟萍;陈青舟
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010120807.4
公开号：	CN111207991A
代理机构：	杭州创智卓英知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	张迪
分类号：	G01N1/40;G01N1/44;G01N33/558;G;G01;G01N;G01N1;G01N33;G01N1/40;G01N1/44;G01N33/558
申请人地址：	310000 浙江省杭州市萧山区宁围镇民和路481号联合中心南区B座10楼
主权项：	1.一种硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，将样品搅碎后加入盐酸和2-硝基苯甲醛，超声混合均匀后，在160～500W微波条件下反应1.5～5min；再加入功能化纳米磁珠的悬浮液，超声混匀后静置、分离，获得待测液。 2.如权利要求1所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，将样品搅碎后加入盐酸和2-硝基苯甲醛，超声混合均匀后，在160W微波条件下反应5min；再加入功能化纳米磁珠的悬浮液，超声混匀后静置、分离，获得待测液。 3.如权利要求1所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，将样品搅碎后加入盐酸和2-硝基苯甲醛，超声混合均匀后，在350W微波条件下反应3min；再加入功能化纳米磁珠的悬浮液，超声混匀后静置、分离，获得待测液。 4.如权利要求1所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，将样品搅碎后加入盐酸和2-硝基苯甲醛，超声混合均匀后，在500W微波条件下反应1.5min；再加入功能化纳米磁珠的悬浮液，超声混匀后静置、分离，获得待测液。 5.如权利要求1～4中任一项所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，所述功能化纳米磁珠的制备方法包括以下步骤：步骤S1：在60～80℃、惰性气体条件下向FeCl3和FeSO4的水溶液中加入氨水调整至pH值为9～11，反应1～2h后，分离、洗涤、干燥，获得Fe3O4，其中，Fe3+、Fe2+的摩尔比为2:(1～1.5)；步骤S2：将Fe3O4溶于无水乙醇、氨水的混合溶液中，混合均匀后，加入四乙氧基硅烷，反应5～7h后磁性分离，并洗涤、干燥，获得Fe3O4@SiO2纳米颗粒；步骤S3：将Fe3O4@SiO2纳米颗粒分散于无水乙醇中，加入γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷并分散均匀，在50～70℃条件下反应10～13h，分离、洗涤、干燥后获得改性Fe3O4@SiO2纳米颗粒；步骤S4：将所述改性Fe3O4@SiO2纳米颗粒分散于惰性有机溶剂中，加入N-乙烯基吡咯烷酮、二乙烯基苯、偶氮二异丁腈并混合均匀，在55～70℃条件下反应8～12h后，分离、洗涤、干燥，获得功能化纳米磁珠。 6.如权利要求5所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，在步骤S1中，将3.28g FeC13·6H2O和1.68g FeSO4·7H2O超声溶于200mL水中，在75℃、氮气保护下搅拌加入20mL质量分数为25％的氨水，反应1.5h后冷却，在磁场作用下进行分离后依次用无水乙醇和去离子水洗涤，40℃真空干燥，获得Fe3O4。 7.如权利要求5所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，在步骤S2中，将1.0g Fe3O4加入100mL去离子水、800mL无水乙醇和10mL质量分数为25％的氨水的混合液中，超声混匀后加入8mL四乙氧基硅烷，30℃搅拌、反应6h后分离，并依次用无水乙醇和去离子水洗涤，40℃真空干燥，获得Fe3O4@SiO2纳米颗粒。 8.如权利要求5所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，在步骤S3中，将0.4g所述Fe3O4@SiO2纳米颗粒分散于80mL的无水乙醇中，加入4mLγ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷，超声15min分散均匀，在60℃、氮气保护下振荡反应12h后磁性分离，并依次用无水乙醇和去离子水洗涤，40℃真空干燥，获得改性Fe3O4@SiO2纳米颗粒。 9.如权利要求5所述的硝基呋喃类代谢物的前处理方法，其特征在于，在步骤S4中，将0.2mg所述改性Fe3O4@SiO2纳米颗粒分散于惰性有机溶剂中，加入0.5g N-乙烯基吡咯烷酮、0.3mg二乙烯基苯、0.1g偶氮二异丁腈，超声混匀后在65℃条件下振荡反应10h后冷却、磁性分离，并依次用乙醇和去离子水洗涤，40℃真空干燥，获得功能化纳米磁珠。 10.一种硝基呋喃类代谢物的检测方法，其特征在于，将权利要求1～9中任一项所述的前处理方法获得的待测液滴加到免疫胶体金检测板上，3～5min读取结果。
所属类别：	发明专利