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原文传递一种阴道加德纳菌量子点免疫检测方法

专利名称：	一种阴道加德纳菌量子点免疫检测方法
摘要：	本发明公开了一种阴道加德纳菌量子点免疫检测方法，涉及医学领域，本发明中用量子点偶联加德纳菌抗体，实现了对加德纳菌的特异性检测，大大提高了加德纳菌检出率、准确率；示踪物量子点具有激发光谱宽、发射光谱窄的特点，可实现在荧光显微镜下直接观察，降低了对检测人员的操作技能及实验室检测仪器的要求；同时量子点荧光效率高，荧光强度强，稳定性好，抗漂白能力强，可经受多次，激发而不易发生荧光淬灭，即已染色的标本可以长期保存，可疑结果可以多次阅片。
专利类型：	发明专利
申请人：	济南德亨医学科技有限公司
发明人：	李万寿
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010131686.3
公开号：	CN111208295A
分类号：	G01N33/569;G01N21/64;G;G01;G01N;G01N33;G01N21;G01N33/569;G01N21/64
申请人地址：	250000 山东省济南市天桥区蓝翔中路30号时代总部基地H8号楼107、202
主权项：	1.一种阴道加德纳菌量子点免疫检测方法，其特征在于，包括量子点荧光探针的制备方法及其使用方法。一种量子点荧光探针的制备方法，包括如下步骤：（1）采用EDC偶联法标记抗体，将量子点溶液和EDC溶液按照按1:5~1:10的比例混合，然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化；（2）加入过量的加德纳菌标记抗体，并调整整个溶液的反应pH，使得反应pH在6~8之间，将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时；（3）对反应结束的液体进行超滤，在10000rpm条件下离心20分钟；（4）吸出超滤后的标记抗体，用含20mM Tris、15%蔗糖、1%BSA，pH7.5~8.5的溶液复溶至原体积，如此，即得到制备好的量子点标记抗体。一种量子点荧光探针的使用方法，包括如下步骤：（1）根据需求挑取若干样本放置在载玻片上并制成涂片，然后用无水乙醇进行固定；（2）将含有样本的载玻片标本水平放置，加10ul制备好的量子点标记抗体在标本上，使之完全覆盖在标本上；（3）将制备好的载玻片置于37℃的环境下孵育25~35分钟，然后使用蒸馏水缓缓全覆盖洗涤3遍；（1）将洗涤后的载玻片放置在显微镜下，使用荧光显微镜在100倍油镜条件下进行观察。 2.根据权利要求1所述阴道加德纳菌量子点免疫检测方法，其特征在于，一种量子点荧光探针的制备方法，步骤（1）中，所述量子点溶液和EDC溶液按照按1:5的比例混合，然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化；步骤（2）中，调整整个溶液的反应pH，使得反应pH值为6，将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时；步骤（4）中，用含20mMTris、15%蔗糖、1%BSA，pH7.5的溶液复溶至原体积，如此，即得到制备好的量子点标记抗体。 3.根据权利要求2所述阴道加德纳菌量子点免疫检测方法，其特征在于，一种量子点荧光探针的制备方法，步骤（1）中，所述量子点溶液和EDC溶液按照按1:10的比例混合，然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化；步骤（2）中，调整整个溶液的反应pH，使得反应pH值为8，将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时；步骤（4）中，用含20mMTris、15%蔗糖、1%BSA，pH8.5的溶液复溶至原体积，如此，即得到制备好的量子点标记抗体。 4.根据权利要求1所述阴道加德纳菌量子点免疫检测方法，其特征在于，一种量子点荧光探针的制备方法，步骤（1）中，所述量子点溶液和EDC溶液按照按1:8的比例混合，然后在常温、避光的条件下对混合溶液进行搅拌使之活化；步骤（2）中，调整整个溶液的反应pH，使得反应pH值为7，将调整完成的混合溶液置于避光环境下反应1小时；步骤（4）中，用含20mMTris、15%蔗糖、1%BSA，pH8.0的溶液复溶至原体积，如此，即得到制备好的量子点标记抗体。
所属类别：	发明专利