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原文传递一种快速检测血清中酪氨酸酶的试纸条及其制备方法与应用

专利名称：	一种快速检测血清中酪氨酸酶的试纸条及其制备方法与应用
摘要：	本发明公开了一种快速检测血清中酪氨酸酶的试纸条及其制备方法与应用。该试纸条检测酪氨酸酶的方法，首先制备检测试纸条；然后配制一系列不同浓度的酪氨酸酶标准溶液与相同浓度的多巴胺混合一定时间后，将混合溶液滴在检测试纸条上反应，试纸条显现不同的颜色，作为标准比色卡使用；本发明通过设计标准比色卡，可实时、快速的根据体系的颜色来检测待测酪氨酸酶的活性，并且设计了紫外吸光度与酪氨酸酶活性的标准曲线，通过测试体系的紫外可见光吸收光谱，将相关数据代入标准曲线即可得到准确的酪氨酸酶活性，不需要使用贵重的仪器，检测方法更简便、经济，具有较高的实用价值。
专利类型：	发明专利
申请人：	福建师范大学
发明人：	卢玉栋;陆德婵;游瑞云;黄祖芳;沈慧英
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T17:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010187085.4
公开号：	CN111208130A
代理机构：	福州科扬专利事务所
代理人：	李晓芬
分类号：	G01N21/78;G01N21/65;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78;G01N21/65
申请人地址：	350300 福建省福州市福清市龙江街道校园新村一号福建师范大学研发中心
主权项：	1.一种快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、AuPB@Au 胶体的合成取10mL纳米金胶溶液，加入10-20μL浓度为0.1mol/L的普鲁士蓝溶液作为拉曼信号分子，搅拌混合均匀后离心，重新悬浮于10mL超纯水中，得Au@PB胶体；往10mL的制备好的Au@PB胶体中加入250μL浓度为6*10-2 mol/L的柠檬酸钠溶液，磁力搅拌加热至沸腾后，加入2.5mL浓度为1mmol/L氯金酸溶液后停止加热，继续磁力搅拌1h后，将胶体离心洗涤2次，重新分散于5mL超纯水中，得到AuPB@Au胶体； S2、功能化AuPB@Au NPs的制备将步骤S1制备好的AuPB@Au胶体与Fe（NTA）溶液按体积1:1混合后，搅拌混合后，离心洗涤除去未反应的Fe（NTA），去除上清液，重分散备用，即得功能化AuPB@Au NPs； S3、将试纸条基材充分浸泡在3-巯丙基甲基二甲氧基硅烷乙醇溶液中，取出后用蒸馏水和无水乙醇分别进行漂洗，通过有机硅烷耦合作用在纸张纤维表面自组装形成一层单分子层，烘干备用即为功能化的试纸条；将其功能化的试纸条基材放入100mLG4的玻璃砂芯漏斗装置中，取50mL-100mL的制备好的功能化AuPB@Au NPs材料倒入均匀的砂芯漏斗装置中，抽滤，最后将滤纸取出干燥即为检测试纸条。 2.根据权利要求1所述的快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述Fe（NTA）溶液的合成方法如下：首先取浓度为10−3 M的九水硝酸铁溶液和浓度为10−3 M的氨三乙酸三钠溶液按体积1:1混合后，往溶液中添加pH调节剂调节Fe（NTA）溶液的pH 为7.0，混合液静置，得Fe（NTA）溶液。 3.根据权利要求1所述的快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述纳米金胶溶液的制备方法如下：取100mL质量分数为0.01%的氯金酸溶液在磁力搅拌下加热至沸腾；然后取1-1.5 mL质量分数为1%柠檬酸钠溶液，加入到沸腾的上述氯金酸溶液中，待沸腾15min后，反应结束，冷却至室温，制成纳米金溶胶。 4.根据权利要求1所述的一种快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法，其特征在于：步骤S3中的试纸条基材为滤纸、玻璃纸、无纺布、纤维素膜或淀粉膜。 5.根据权利要求1所述的快速检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条的制备方法，其特征在于：步骤S3中滤纸与3-巯丙基甲基二甲氧基硅烷乙醇溶液的浸泡时间为20-60min。 6.一种如权利要求1-5任一项所述方法制备的检测血清中酪氨酸酶的检测试纸条。 7.一种利用权利要求6所述检测试纸条检测酪氨酸酶的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1）制作标准比色卡：将不同浓度的酪氨酸酶标准溶液（500U/mL、400U/mL、300U/mL、200U/mL、100U/mL、50U/mL、10U/mL、0U/mL）与多巴胺混合，依次滴加10μL在检测试纸条上，室温反应0.5-1.5分钟后晾干，记录检测试纸条颜色，根据不同颜色，整理得到酪氨酸酶标准比色卡； 2）检测酪氨酸酶：将待测样品与多巴胺混合后滴到检测试纸条上，室温反应0.5-1.5分钟后晾干，然后观察检测试纸条的颜色，并与步骤1）所得标准比色卡进行对照，通过颜色对比，估算出待测血清中的酪氨酸酶含量。 8.根据权利要求6所述的一种检测酪氨酸酶的方法，其特征在于：酪氨酸酶标准溶液的浓度为500U/mL、400U/mL、300U/mL、200U/mL、100U/mL、50U/mL、10U/mL和0U/mL；分别对应的比色卡的颜色分别为深红、酒红、紫红、淡紫红、淡紫、蓝紫、紫灰和灰色。 9.根据权利要求6所述的一种检测酪氨酸酶的方法，其特征在于：步骤1）中的多巴胺浓度为10-3M。
所属类别：	发明专利