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原文传递一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法

专利名称：	一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法
摘要：	本发明公开了一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，属于化学分析技术领域。本发明构建了一种同时微量定量分析根系分泌物中多种有机酸的HPLC方法，首先采用水培法收集植物的根系分泌物，收集的根系分泌物进行冻干，得到根系分泌物粉末，整个收集和冻干过程所用的仪器工具溶剂等都事先进行灭菌处理，这样可以减少微生物的影响，便于长期储存。定量分析根系分泌物中有机酸时，取根系分泌物粉末溶于甲醇，静置震荡后加入无菌水，再次震荡后进行过滤，最后对滤液进行HPLC分析。本发明的HPLC方法可以同时定量12种有机酸，并在10min内测定完毕，定量限普遍低于1mg/L，适用于微量定量分析根系分泌物中的有机酸。
专利类型：	发明专利
申请人：	江南大学
发明人：	李祎飞;廉杰;邹华;王晓暄;叶彬;王震宇
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T07:00:00+0805
申请号：	CN201911358023.9
公开号：	CN110967432A
代理机构：	哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司
代理人：	仇钰莹
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	214000 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
主权项：	1.一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： (1)冻干：采用水培法收集植物的根系分泌物，收集的根系分泌物进行冻干，得到根系分泌物粉末； (2)预处理：将步骤(1)得到的根系分泌物粉末溶于甲醇，静置震荡后加入无菌水，再次震荡后进行过滤，得到滤液； (3)HPLC分析：对步骤(2)得到的滤液进行HPLC分析，测定根系分泌物中有机酸含量。 2.根据权利要求1所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，所述根系分泌物粉末与甲醇的质量体积比为(0.5～2)：0.1。 3.根据权利要求1所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，HPLC分析过程中流动相pH为2.5-2.6。 4.根据权利要求1所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，所述HPLC的色谱条件为：采用ZORBAX SB-AQ色谱柱，柱温为33-36℃。 5.根据权利要求1-4任一所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，所述的根系分泌物收集、冻干和预处理过程中用到的器具和溶剂都先经过灭菌处理。 6.根据权利要求1所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，采用外标法对根系分泌物中有机酸含量进行定量分析。 7.根据权利要求1-6任一所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法，其特征在于，所述的有机酸包括草酸、L-乳酸、丙二酸、丙酸、琥珀酸、柠檬酸、L-酒石酸、L-苹果酸、乙酸、富马酸、奎尼酸和反乌头酸。 8.一种根系分泌物的预处理方法，其特征在于，所述预处理方法是采用水培法收集植物的根系分泌物，收集的根系分泌物进行冻干，得到根系分泌物粉末。 9.根据权利要求1或8所述的方法，其特征在于，所述冻干为真空冷冻干燥；所述真空冷冻干燥是在于-60～-50℃下干燥48～72h。 10.权利要求1-9任一所述的一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法在植物或根系分泌物检测方面的应用。
所属类别：	发明专利