详情

原文传递一种检测噻虫嗪残留的方法

专利名称：	一种检测噻虫嗪残留的方法
摘要：	本发明提供了一种检测噻虫嗪残留的方法，属于农药残留检测技术领域。本发明将能量供体UCNPs与噻虫嗪抗体偶联，用能量受体AuNPs标记噻虫嗪抗原。噻虫嗪与抗体UCNPs结合的抗原AuNPs之间发生竞争性免疫反应，利用荧光检测信号计算得到噻虫嗪残留含量。本发明检测噻虫嗪残留的方法，灵敏度高、选择性好、准确度和可靠性高，适用于现场、批量、快速检测。
专利类型：	发明专利
申请人：	河北省农林科学院遗传生理研究所(河北省农林科学院农产品质量安全研究中心)
发明人：	张嘉坤;钱训;郑振山;陈勇达;李丽梅;张少军
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T18:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911310426.6
公开号：	CN111060682A
代理机构：	石家庄轻拓知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	王占华
分类号：	G01N33/53;G01N33/543;G01N33/58;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/58
申请人地址：	050051 河北省石家庄市新华区和平西路598号
主权项：	1.一种检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)将上转换纳米颗粒与噻虫嗪抗体偶联，得到噻虫嗪抗体-UCNPs偶联物； (2)用金纳米颗粒标记噻虫嗪抗原，得到噻虫嗪抗原-AuNPs结合物； (3)噻虫嗪与噻虫嗪抗体-UCNPs偶联物以及噻虫嗪-抗原AuNPs结合物之间发生竞争性免疫反应，利用上转换纳米颗粒与金纳米颗粒之间的内滤波效应获得不同的荧光检测信号值，计算得到噻虫嗪残留量。 2.根据权利要求1所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，所述噻虫嗪抗体-UCNPs偶联物的制备方法包括：将COOH-UCNPs颗粒用N-N-羟基琥珀酰亚胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺在水溶液中震荡活化，得到活性颗粒；将活性颗粒与噻虫嗪抗体于磷酸缓冲液中混合反应，得到噻虫嗪抗体-UCNPs偶联物。 3.根据权利要求2所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，所述噻虫嗪抗体-UCNPs偶联物悬浮在储备溶液中，所述储备液为含有1％牛血清白蛋白、0.1％吐温-20和1％海藻糖的0.03M pH7.4的磷酸缓冲液。 4.根据权利要求1所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，所述金纳米颗粒用柠檬酸钠还原法制备。 5.根据权利要求4所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，所述金纳米颗粒的制备方法包括：将氯化金水溶液在冷凝回流条件下加热至沸点，搅拌下加入柠檬酸三钠溶液，当溶液的颜色从深蓝色变为酒红色时，再加热后冷却，得到含有金纳米颗粒的悬浮液。 6.根据权利要求1所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，所述噻虫嗪抗原-AuNPs结合物的制备方法包括：调节胶体金颗粒悬浮液的pH值至8.0，将噻虫嗪抗原加入上述溶液中搅拌孵育，得溶液I；向溶液I中加入含有牛血清白蛋白和聚乙二醇的Tris-HCl溶液混合并搅拌，使溶液I中牛血清白蛋白的终浓度为1％，聚乙二醇的终浓度为1％，继续孵育后，离心得到噻虫嗪抗原-AuNPs结合物。 7.根据权利要求1或6所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，所述噻虫嗪抗原-AuNPs结合物分散在0.05M pH 8.5的Tris HCl混合溶液中，所述Tris HCl混合溶液包含1％牛血清白蛋白、1％聚乙二醇和5％蔗糖。 8.根据权利要求1所述检测噻虫嗪残留的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述利用荧光强度变化值与噻虫嗪浓度之间的关系建立标准曲线，利用标准曲线计算噻虫嗪浓度。
所属类别：	发明专利