详情

原文传递一种β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途

专利名称：	一种β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途
摘要：	本发明属于医疗技术领域，公开了一种β‑羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，所述β‑羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途为用于调控鼻咽癌基因的转录与表达。具体方法包括：分析确定β‑羟丁酸对鼻咽癌细胞中蛋白的活性影响；利用染色质免疫共沉淀试剂盒检测β‑羟丁酸对启动子区组蛋白水平的影响；利用染色质免疫共沉淀检测方法检测β‑羟丁酸对鼻咽癌细胞中启动子区域组蛋白水平的影响；联合染色质免疫共沉淀高通量测序和RNA转录组测序描绘β‑羟丁酸对鼻咽癌细胞表观基因组的影响。本发明分析确定了β‑羟丁酸能够用于调控鼻咽癌基因的转录与表达，为探讨鼻咽癌的发生发展提供了新的思路。
专利类型：	发明专利
申请人：	贞丰县人民医院
发明人：	卢远英;吴垠
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T23:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T10:00:00+0805
申请号：	CN201911341361.1
公开号：	CN110988329A
代理机构：	北京国坤专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	赵红霞
分类号：	G01N33/539;G01N33/574;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/539;G01N33/574
申请人地址：	562200 贵州省贞丰县珉谷镇南环路
主权项：	1.一种β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途为用于调控鼻咽癌基因的转录与表达。 2.如权利要求1所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，所述β-羟丁酸调控鼻咽癌基因的转录与表达方法包括以下步骤：步骤一，将包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品共同孵育；使底物去除相应蛋白，用赖氨酸显影剂进一步处理使其产生荧光团；使用荧光板读数器或荧光计分析荧光团，得到鼻咽癌细胞中蛋白的活性变化；步骤二，利用染色质免疫共沉淀试剂盒检测β-羟丁酸对启动子区组蛋白水平的影响；步骤三，利用染色质免疫共沉淀检测方法检测β-羟丁酸对鼻咽癌细胞中启动子区域组蛋白水平的影响；步骤四，联合染色质免疫共沉淀高通量测序和RNA转录组测序描绘β-羟丁酸对鼻咽癌细胞表观基因组的影响。 3.如权利要求2所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤一中，所述包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品利用孵育盒进行孵育；所述孵育为旋转孵育，所述旋转孵育的转速为20循环/分钟～30循环/分钟，所述孵育在5℃～10℃过夜进行。 4.如权利要求3所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，所述进行孵育的方法具体包括： (1)所述孵育盒接收孵育指令； (2)控制设置在试管孔板上方的上层加热板的温度为第一加热温度，设置在所述试管孔板下方的下层加热板的温度为第二加热温度；其中，所述第一加热温度大于所述第二加热温度； (3)通过所述上层加热板和所述下层加热板对包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品共同进行加热孵育。 5.如权利要求4所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤(3)中，所述通过上层加热板和所述下层加热板对包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品共同进行加热孵育之后，还包括： 1)当对所述包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品共同加热时长达到所述第一预设时长时，控制所述上层加热板的温度为第一退火温度，所述下层加热板的温度为第二退火温度； 2)通过上层加热板和下层加热板对所述包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品进行第二预设时长的退火处理；其中，所述第一退火温度小于所述第一加热温度，所述第二退火温度小于所述第二加热温度，且所述第一退火温度大于所述第二退火温度。 6.如权利要求5所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤2)中，所述通过上层加热板和所述下层加热板对所述包含赖氨酸侧链的蛋白底物与具备蛋白活性的样品进行第二预设时长的退火处理之后，还包括：向报警设备发送报警提示指令。 7.如权利要求2所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤三中，所述染色质免疫共沉淀检测方法检测β-羟丁酸对鼻咽癌细胞中启动子区域组蛋白水平的影响具体包括： (Ⅰ)提取鼻咽癌细胞细胞核、蛋白质和DNA交联固定，形成交联的蛋白质染色质复合物； (Ⅱ)加入蛋白酶抑制剂利用超声波粉碎技术进行细胞核膜的裂解，利用超声波剪切染色质； (Ⅲ)加入缓冲液进行离心，弃上清，保留沉淀； (Ⅳ)纯化DNA，并进行目的基因的定量分析，蛋白结合DNA全基因组分析。 8.如权利要求7所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤(Ⅰ)中，所述采用甲醛进行所述交联固定，所述甲醛的终浓度为0.1％(v/v)～5％(v/v)，所述交联的时间为5分钟～20分钟。 9.如权利要求7所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤(Ⅱ)中，所述采用超声方法进行所述剪切，所述超声方法为：开启超声30秒～50秒和停止超声40秒～80秒为一个循环，进行5个～10个循环；所述超声的频率为30kHz～70kHz。 10.如权利要求7所述β-羟丁酸或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，步骤(Ⅲ)中，所述离心速度为1500～2000r/min；离心时间为2分钟～4分钟。
所属类别：	发明专利