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原文传递一种检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条及制备方法

专利名称：	一种检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条及制备方法
摘要：	本发明公开了一种检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条，包括底板，所述底板上固定有硝酸纤维素膜、结合垫、吸水纸和样品垫，所述结合垫上固载有链霉亲和素化胶体金，所述硝酸纤维素膜上由前向后依次设有测试线和控制线，所述测试线上固载有金黄色葡萄球菌单克隆抗体，所述控制线上固载有与金黄色葡萄球菌适配体互补的单链DNA。该胶体金试纸条能够实现金黄色葡萄球菌的即时检测，检测时间缩短至5‑10分钟，且不需要大型仪器设备以及复杂的实验步骤。可通过对比反应前后体系的胶体金试纸条的颜色变化对金黄色葡萄球菌进行定性识别，也可通过读取胶体金卡读卡仪数据进行定量检测。
专利类型：	发明专利
申请人：	佛山科学技术学院
发明人：	曾令文;陆琼
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T23:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911342425.X
公开号：	CN111077313A
代理机构：	广州嘉权专利商标事务所有限公司
代理人：	朱继超
分类号：	G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/52;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/52
申请人地址：	528000 广东省佛山市南海区狮山镇广云路33号
主权项：	1.一种检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条，其特征在于，包括底板，所述底板上固定有硝酸纤维素膜、结合垫、吸水纸和样品垫，所述硝酸纤维素膜的后端与所述吸水纸接触，其前端与所述结合垫接触，所述结合垫的后端与硝酸纤维素膜接触，其前端与所述样品垫接触，所述结合垫上固载有链霉亲和素化胶体金，所述硝酸纤维素膜上由前向后依次设有测试线和控制线，所述测试线上固载有金黄色葡萄球菌单克隆抗体，所述控制线上固载有与金黄色葡萄球菌适配体互补的单链DNA。 2.根据权利要求1所述的检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条，其特征在于，所述控制线至硝酸纤维素膜后端的距离为9-10mm，所述控制线与所述测试线之间的距离为8-10mm。 3.根据权利要求1所述的检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条，其特征在于，所述样品垫与结合垫的前端搭接；所述结合垫的后端与所述硝酸纤维素膜的前端搭接；所述吸水纸与硝酸纤维素膜的后端搭接；所述搭接的覆盖部分宽度为1-2mm。 4.根据权利要求1所述的检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条，其特征在于，所述底板为条形PVC构件，其宽度3-4mm。 5.根据权利要求1所述的检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条，其特征在于，所述吸水纸的长度为18-20mm、所述硝酸纤维素膜的长度为25-27mm、所述结合垫的长度为8-10mm，所述样品垫的长度为18-20mm。 6.检测金黄色葡萄球菌的胶体金试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)胶体金溶液的制备：将50mL 0.01％的HAuCl4溶液加入到圆底烧瓶中，边加热边搅拌至沸腾；然后，在搅拌条件下向上述溶液中加入5mL 1％柠檬酸钠，待溶液变为酒红色后，继续煮沸10min，停止加热后，继续搅拌15min，得到胶体金溶液，4℃避光保存； 2)生物素化胶体金的制备：向1mL的胶体金溶液中加入0.1mol/LK2CO3(5μL)混匀，5min后加入8μg的链霉亲和素，室温震荡30min，加入100μL浓度10％的牛血清白蛋白封闭30min，4℃离心10min，弃清液，用100μL浓度为0.2mol/L硼酸缓冲液重悬生物素化胶体金； 3)将所述生物素化胶体金固载在结合垫内，并将带有测试线和控制线的硝酸纤维素膜、固载有生物素化胶体金的结合垫以及吸水纸和样品垫依次粘结在底板上。 7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤2所述离心速率为10×103rpm。 8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤2所述硼酸缓冲液的pH为9.0。
所属类别：	发明专利