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原文传递一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明提供一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法，属于免疫分析技术领域。该试剂盒包括：1)校准品；2)磁珠包被TOXO抗原；3)发光标记物标记的抗人IgG抗体；4)项目稀释液5)化学发光激发液A和B以及清洗液。本发明还提供一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒的制备方法。本发明的试剂盒具有检测快速、线性范围宽、灵敏度高、干扰因素少、费用低廉等优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	迪瑞医疗科技股份有限公司
发明人：	高智玲;翟涛;高威;孙成艳;何浩会
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T01:00:00+0805
申请号：	CN201911366039.4
公开号：	CN111089975A
代理机构：	长春众邦菁华知识产权代理有限公司
代理人：	李外
分类号：	G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543;G01N21/76;G;G01;G01N;G01N33;G01N21;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543;G01N21/76
申请人地址：	130000 吉林省长春市高新区宜居路3333号
主权项：	1.一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括： 1)校准品；2)磁珠包被TOXO抗原；3)发光标记物标记的抗人IgG抗体；4)项目稀释液5)化学发光激发液A和B以及清洗液。 2.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，磁珠包被TOXO抗原中，磁珠的粒径是0.05～3.0μm，磁珠包被TOXO抗原浓度为0.5％～5％。 3.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物标记的抗人IgG中，抗人IgG是鼠抗人IgG或羊抗人IgG。 4.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述的抗人IgG抗体与化学发光标记物的标记摩尔比例是1:3～20。 5.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶酯、吖啶酯衍生物和三联吡啶钌。 6.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述的项目稀释液为pH6.0～8.0的含有盐、表面活性剂、防腐剂及蛋白的缓冲液。 7.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述化学发光激发液A为过氧化氢和硝酸溶液，B为氢氧化钠溶液；清洗液为PB缓冲液。 8.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述校准品是以TOXO IgG抗体配制而成。 9.根据权利要求1所述的一种检测弓形虫IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：一、校准品的制备用含有小牛血清的PBS缓冲液将TOXO IgG抗体稀释成校准品，分装成0U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、200U/mL；二、磁珠包被TOXO抗原溶液配制使用涡旋混匀仪将磁珠充分混匀，加入混悬的液体于离心管中，将离心管置于磁力分离架上1～3min，移除上清液，加入封闭剂，使用涡旋混匀仪充分混匀，然后将离心管置于磁力分离架上，移除上清液，重复封闭步骤共3次，再次加入封闭剂，使用涡旋混匀仪充分混匀，加入包被抗体，充分涡旋混匀，使用360°旋转混匀仪室温旋转混匀孵育2～4h，将离心管置于磁力分离架上，移除上清液，加入清洗缓冲液，使用涡旋混匀仪充分混匀，将离心管置于磁力分离架上，移除上清液，重复清洗，使用储存缓冲液重悬磁珠，收集保存；三、发光标记物标记的抗人IgG抗体溶液的制备将抗体放入离心管中，加入碳酸缓冲溶液，充分混匀，混匀后加入发光标记物溶液，用离心机室温条件下离心，将离心管用封口膜密封后放入避光暗盒中，之后将暗盒放入气浴恒温振荡器，混匀2～4h，加入赖氨酸封闭液，放入气浴恒温振荡器，中速混匀，封闭时间为0.5～2h，将封闭好的抗体上葡聚糖凝胶G250柱纯化，用PB缓冲液洗脱，分步收集，将收集好的抗体溶液放置于2～8℃保存；四、项目稀释液项目稀释液为pH6.0-8.0的含有盐、表面活性剂、防腐剂及蛋白的缓冲液。
所属类别：	发明专利