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原文传递 检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器和方法
专利名称: 检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器和方法
摘要: 本发明提供了一种利用核酸适配体修饰的电极构建的电化学传感器和检测方法,可以实现快速灵敏检测黄曲霉毒素B1。本发明将电化学标记物(例如亚甲基蓝)标记到核酸适配体的特定碱基位点上,相应的核酸适配体利用末端标记的硫醇,核酸适配体被固定到金电极表面。通过测定亚甲基蓝的电化学信号变化可以实现对黄曲霉毒素B1的检测。
专利类型: 发明专利
申请人: 中国科学院生态环境研究中心
发明人: 赵强;王超
专利状态: 有效
申请日期: 1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期: 1900-01-20T00:00:00+0805
申请号: CN201911373639.3
公开号: CN111060576A
代理机构: 中科专利商标代理有限责任公司
代理人: 崔亚松;柴云峰
分类号: G01N27/327;G01N27/48;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/327;G01N27/48
申请人地址: 100085 北京市海淀区双清路18号
主权项: 1.一种检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器,包括:利用黄曲霉毒素B1核酸适配体修饰的电极,其特征在于,所述黄曲霉毒素B1核酸适配体带有电化学标记物,所述电化学标记物位于所述黄曲霉毒素B1核酸适配体的特定碱基上以增强检测信号。 2.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器,其特征在于,所述黄曲霉毒素B1核酸适配体为特异性结合黄曲霉毒素B1的DNA序列。 3.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器,其特征在于,所述电化学标记物为亚甲基蓝或二茂铁。 4.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器,其特征在于,所述特定碱基选自A、G、C或T。 5.根据权利要求2所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器,其特征在于,所述DNA序列包括SEQ ID NO:1或由SEQ ID NO:1组成,其5’端或3’端利用硫醇分子修饰,所述电化学标记物位于所述序列的第14、18、20或22位的T碱基上,或者,所述DNA序列包括在SEQ IDNO:1的一端或两端减少或增加一个或多个碱基的序列,所述电化学标记物位于与SEQ IDNO:1的上述T碱基对应的T碱基上。 6.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1的电化学传感器,其特征在于,所述电极为金电极或具有金涂层或纳米金材料修饰的电极。 7.一种权利要求1-6任一项所述电化学传感器的制备方法,包括:将带有电化学标记物的黄曲霉毒素B1核酸适配体固定在电极上。 8.根据权利要求7所述的电化学传感器的制备方法,其特征在于,所述电极为经过表面处理的金电极;优选地,所述表面处理包括将所述金电极打磨后使用超纯水超声清洗,再进行电化学清洗或化学清洗。 9.一种利用权利要求1-6任一项所述电化学传感器检测黄曲霉毒素B1的方法,包括将所述电极在含有待测样品的反应缓冲溶液中温育,然后采用电化学法进行测定;优选地,所述反应缓冲溶液为含有Mg2+(例如MgCl2,其浓度为1-100mM,优选为10-30mM)的Tris-HCl缓冲溶液、HEPES缓冲溶液或磷酸盐缓冲溶液,pH为7-8(例如7.2、7.5或7.8)。 10.根据权利要求9所述的方法,所述电化学法选自方波伏安法、差分脉冲伏安法或交流伏安法。
所属类别: 发明专利
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