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原文传递一种单粒小麦直链淀粉含量检测方法

专利名称：	一种单粒小麦直链淀粉含量检测方法
摘要：	本发明属于淀粉含量检测技术领域，公开了一种单粒小麦直链淀粉含量检测方法，每种小麦品种选取一粒种子称重压碎；每毫克籽粒组织中加入HCl冷藏提取过夜；在剩余提取物中加入NaOH调节提取液的pH并抽吸混合均匀，将混悬液在室温下保持30分钟；用HCl中和，再用100μl蒸馏水稀释；抽取部分提取液至另一离心管，以1:10在离心管中稀释，取25ul稀释品于酶标板上，每个孔滴加100ul 0.3％I：1.5％KI储备液，抽吸数次混匀；静置10‑15min后使用酶标仪读取吸光度，计算直链淀粉的百分比。本发明可准确地测定单粒小麦中直链淀粉含量，快速简捷的测定直链淀粉含量，降低了检测成本。
专利类型：	发明专利
申请人：	海南大学
发明人：	刘东莉;吴依宣;王琦琦
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T08:00:00+0805
申请号：	CN201911374176.2
公开号：	CN111122470A
代理机构：	重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	陈炳萍
分类号：	G01N21/31;G01N1/28;G;G01;G01N;G01N21;G01N1;G01N21/31;G01N1/28
申请人地址：	570228 海南省海口市美兰区人民大道58号
主权项：	1.一种单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述单粒小麦直链淀粉含量检测方法包括以下步骤：第一步，每种小麦品种选取一粒种子称重压碎；第二步，每毫克籽粒组织中加入HCl冷藏提取过夜；第三步，在剩余提取物中加入NaOH调节提取液的pH并抽吸混合均匀，将混悬液在室温下保持；第四步，用HCl中和，再用蒸馏水稀释；第五步，抽取部分提取液至另一离心管，在离心管中稀释，取稀释品于酶标板上，每个孔滴加I：KI储备液，抽吸数次混匀；第六步，静置后使用酶标仪在620nm和535nm处读取吸光度，利用测定公式1.4935exp(2.7029)(OD620/OD535)计算直链淀粉的百分比。 2.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第二步中每毫克籽粒组织中加入10ul 0.4M HCl冷藏提取过夜。 3.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第二步中每种样品至少三个平行样品，三个标准品对照96％直链淀粉标准品，三个空白对照，每个样品在酶标板上至少点三个孔，结果取均值。 4.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第三步中在剩余提取物中加入300μl 2M NaOH调节提取液的pH并抽吸混合均匀，将混悬液在室温下保持30分钟。 5.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第四步中用200μl 1M HCl中和，再用100μl蒸馏水稀释。 6.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第五步中抽取部分提取液至另一离心管，以1:10在离心管中稀释，取25ul稀释品于酶标板上，每个孔滴加100ul 0.3％I：1.5％KI储备液，抽吸数次混匀。 7.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第五步中抽取部分提取液20ul至另一离心管。 8.如权利要求1所述的单粒小麦直链淀粉含量检测方法，其特征在于，所述第六步中静置10-15min后使用酶标仪在620nm和535nm处读取吸光度。
所属类别：	发明专利