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原文传递一种高通量拉曼单细胞分选装置及方法

专利名称：	一种高通量拉曼单细胞分选装置及方法
摘要：	本发明提供了一种高通量单细胞分选装置与方法。包括：微流控芯片，用于放置单细胞样品；PMT(光电倍增管)窄带拉曼单细胞预筛选模块，用于对单细胞样品进行预筛选检测，获得对应于单细胞样品的窄带拉曼信号和窄带背景信号；线阵拉曼单细胞识别模块，用于获取单细胞样品的全谱信息。所述芯片包括依次连接窄带拉曼检测预筛选部分、线阵拉曼检测部分、液滴包裹形成部分、单细胞分选部分；本发明可实现细胞样品的高通量检测、分析和分选。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	中国科学院青岛生物能源与过程研究所
发明人：	李远东;阚凌雁;任立辉;葛安乐;籍月彤;马波;徐健
专利状态：	有效
申请日期：	2020-09-25T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-29T00:00:00+0800
申请号：	CN202011025438.7
公开号：	CN114252425A
代理机构：	上海一平知识产权代理有限公司
代理人：	徐迅;祝莲君
分类号：	G01N21/65;G01N21/01;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/65;G01N21/01
申请人地址：	266101 山东省青岛市崂山区松岭路189号
主权项：	1.一种高通量拉曼单细胞分选装置，其特征在于，包括： -PMT窄带拉曼单细胞预筛选模块，用于对单细胞样品进行预筛选检测，获得对应于单细胞样品的窄带拉曼信号和窄带背景信号； -线阵拉曼单细胞识别模块，用于获取单细胞样品的全谱信息； -微流控芯片，用于放置单细胞样品。 2.根据权利要求1所述的高通量单细胞分选装置，其特征在于，所述PMT窄带拉曼单细胞预筛选模块包括激光光源、光电倍增管。 3.根据权利要求1所述的高通量拉曼单细胞分选装置，其特征在于，所述线阵拉曼单细胞识别模块包括激光光源、线阵光生成器、光谱仪。 4.根据权利要求1所述的高通量拉曼单细胞分选装置，其特征在于，所述PMT窄带拉曼单细胞预筛选模块、线阵拉曼单细胞识别模块具有同一个激光光源。 5.根据权利要求1所述的高通量拉曼单细胞分选装置，其特征在于，所述微流控芯片包括依次连接的窄带拉曼检测预筛选部分、线阵拉曼检测部分、液滴包裹形成部分、单细胞分选部分；所述窄带拉曼检测预筛选部分包括依次连接的进样口、第一储液池、第一通道、所述第一通道设有废液池，所述第一通道外侧设有第一分选电极；所述线阵拉曼检测部分依次包括第二储液池、第二通道，所述第二通道设有缓冲液进入口，所述第二通道外侧设有捕获电极；所述液滴包裹形成部分依次包括储油池和液滴包裹形成口；所述单细胞分选部分依次包括第三通道和至少两个分离口，所述第三通道外设有第二分选电极。 6.根据权利要求5所述的高通量拉曼单细胞分选装置，其特征在于，所述电极外接电源。 7.根据权利要求1所述的高通量拉曼单细胞分选装置，其特征在于，所述微流控芯片放置于三维移动平台上。 8.一种高通量拉曼单细胞分选方法，其特征在于，利用权利要求2-7任一所述的高通量拉曼单细胞分选装置，并包括以下步骤： S1：单细胞样品注入微流控芯片； S2：当单细胞样品位于第一通道时，使用PMT窄带显微拉曼单细胞预筛选模块，对所述单细胞样品进行预筛选检测，获得对应于单细胞样品的窄带拉曼信号和窄带背景信号，识别出具有特异性的单细胞样品； S3：在第一分选电极上施加电压，使具有特异性的单细胞样品进入第二储液池并进入第二通道； S4：在捕获电极上施加电压，线阵拉曼单细胞识别模块对单细胞样品进行探测，获得一个或者多个单细胞样品的拉曼光谱，识别单细胞样品； S5：在储油池内注入油相，使单细胞样品在液滴包裹形成口生成液滴，生成的液滴进入第三通道； S6：在第二分选电极上施加电压，使液滴进入不同的分离口进行分选。 9.根据权利要求8所述的高通量单细胞分选方法，其特征在于，所述步骤S2识别出具有特异性的单细胞样品包括对获得的窄带拉曼信号和窄带背景信号进行数据处理，得到信噪比值，根据预先设置的值做比较，从而分辨单细胞样品是否为具有特异性。 10.根据权利要求8所述的高通量单细胞分选方法，其特征在于，所述步骤S4中的识别出所需单细胞包括将所述获得一个或者多个单细胞样品的拉曼光谱与构建的单细胞表型数据库中的标准的拉曼光谱信号或参考的拉曼光谱信号进行比较，获得确定细胞的类型。 11.根据权利要求8所述的高通量单细胞分选方法，其特征在于，所述步骤S6在第二分选电极上施加电压，使液滴进入不同的分离口进行分选包括对依次进入第三通道的液滴，根据步骤S4识别出单细胞样品进行编号，按不同的编号顺序施加不同的电压，从而使液滴进入不同的分离口。
所属类别：	发明专利