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原文传递陈皮的检测分级方法

专利名称：	陈皮的检测分级方法
摘要：	本发明涉及一种陈皮的检测分级方法，该检测分级方法采用高效液相色谱法，特别是配合合适的高效液相色谱条件，对不同品质级别陈皮间存在的差异成分进行检测，并分析这些差异成分的峰面积，特别是这些差异成分的峰面积与维采宁‑2峰面积的比值，确定待测陈皮的类型，最终实现待测陈皮品质评价，本发明检测分级方法直观且量化，能客观、准确地实现陈皮品质鉴别，为陈皮的质量控制提供稳定、可靠的技术手段。并且，本发明的检测分级方法具有实用性好和相关性特点，能推动陈皮行业的高质量发展。同时，本发明突破了以年份论品质的传统理念，为陈皮质量标准的完善提供新思路和新技术支持。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州白云山陈李济药厂有限公司
发明人：	陈明权;商雪莹;孙东;石洪超;何风雷;覃仁安
专利状态：	有效
申请日期：	2021-10-12T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-29T00:00:00+0800
申请号：	CN202111186037.4
公开号：	CN114252520A
代理机构：	华进联合专利商标代理有限公司
代理人：	王秉丽
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	510288 广东省广州市海珠区广州大道南1688号
主权项：	1.一种陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述检测分级方法包括如下步骤：提供包含维采宁-2和5-羟甲基糠醛的对照品溶液，制备待测陈皮的供试品溶液，采用高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，在检测波长为215nm～225nm下检测获得检测图谱Ⅰ，所述检测图谱Ⅰ包含色谱峰Ⅰa和色谱峰Ⅰb，所述色谱峰Ⅰa为所述维采宁-2的色谱峰，所述色谱峰Ⅰb与所述色谱峰Ⅰa的保留时间比值为0.1～0.12，在检测波长为255nm～265nm下检测获得检测图谱Ⅱ，所述检测图谱Ⅱ包含色谱峰Ⅱa、色谱峰Ⅱb、色谱峰Ⅱc、色谱峰Ⅱd和色谱峰Ⅱe，所述色谱峰Ⅱa为所述维采宁-2的色谱峰，所述色谱峰Ⅱb为5-羟甲基糠醛的色谱峰，所述的色谱峰Ⅱc、色谱峰Ⅱd和色谱峰Ⅱe与所述色谱峰Ⅱa的保留时间比值分别为0.32～0.34、0.70～0.72和0.71～0.73，分析所述检测图谱Ⅰ中所述色谱峰Ⅰa和所述色谱峰Ⅰb的峰面积，以及所述检测图谱Ⅱ中所述的色谱峰Ⅱa、色谱峰Ⅱb、色谱峰Ⅱc、色谱峰Ⅱd和色谱峰Ⅱe的峰面积，根据色谱峰面积比值的分析结果确定所述待测陈皮的品质级别。 2.根据权利要求1所述的陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述色谱峰Ⅰb为与陈皮的陈化度具有负相关变化关系的差异成分的色谱峰，所述色谱峰Ⅱc和色谱峰Ⅱd各自独立地为与陈皮的陈化度具有正相关变化关系的差异成分的色谱峰，所述色谱峰Ⅱe为茶水染色陈皮相对于其他陈皮特有的成分的色谱峰，所述色谱峰Ⅰb在所述检测图谱Ⅰ中与所述维采宁-2的相对位置基本如图2中的1号峰和3号峰所示，所述色谱峰Ⅱc、色谱峰Ⅱd和色谱峰Ⅱe在所述检测图谱Ⅱ中与所述维采宁-2的相对位置基本如图7中的2号峰、3号峰、4号峰和5号峰所示。 3.根据权利要求1所述的陈皮的检测分级方法，其特征在于，根据所述分析结果确定所述待测陈皮的品质级别，包括： R1≥0.7，所述待测陈皮对应高温加速陈化陈皮或者高湿加速陈化陈皮， R2＞0.1，所述待测陈皮对应茶水染色陈皮， R1＜0.7，且R2≤0.1，且R3≥0.9，所述待测陈皮对应烧皮或者存储于透气率＜5mm/s条件下自然陈化的陈皮， R1＜0.7，且R2≤0.1，且R3＜0.9，且R4和R5之一＞0.6，所述待测陈皮对应年份小于七年且存储于5mm/s≤透气率≤80mm/s条件下自然陈化的陈皮或者年份小于五年且存储于透气率＞80mm/s条件下自然陈化的陈皮， R1＜0.7，且R2≤0.1，R3＜0.9，且R4和R5均＞0.6，所述陈皮对应年份大于等于七年且存储于5mm/s≤透气率≤80mm/s条件下自然陈化的陈皮、年份大于等于五年且存储于透气率＞80mm/s条件下自然陈化的陈皮或者其他做旧方式陈化陈皮，其中，所述的R1、R2、R4和R5分别为所述的色谱峰Ⅱb、色谱峰Ⅱe、色谱峰Ⅱc和色谱峰Ⅱd与所述色谱峰Ⅱa的峰面积比值，所述R3为所述色谱峰Ⅰb与所述色谱峰Ⅰa的峰面积比值。 4.一种陈皮的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：提供包含维采宁-2或/和橙皮苷的对照品溶液，制备陈皮的供试品溶液，采用高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，在255nm～265nm下检测分别获得对照色谱和检测图谱，将所述检测图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析获得模式图谱，参照所述对照色谱对所述模式图谱进行特征峰指认，获得陈皮的特征图谱。 5.根据权利要求4所述的陈皮的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的条件包括：固定相为C18色谱柱，流动相A为甲醇，流动相B为磷酸体积百分比0.08％～0.12％的磷酸水溶液，采用梯度洗脱；优选地，梯度洗脱的程序包括： 0min～5min，所述流动相A的体积百分比为5％， 5min～10min，所述流动相A的体积百分比由5％上升至10％， 10min～15min，所述流动相A的体积百分比为10％， 15min～25min，所述流动相A的体积百分比由10％上升至20％， 25min～35min，所述流动相A的体积百分比由20％上升至25％， 35min～50min，所述流动相A的体积百分比由25％上升至40％， 50min～55min，所述流动相A的体积百分比为40％， 55min～60min，所述流动相A的体积百分比由40％上升至50％， 60min～65min，所述流动相A的体积百分比为50％；或/和，所述高效液相色谱法的条件包括：流速为0.8mL/min～1.2mL/min，或/和，柱温为28℃～32℃，或/和，进样量为8μL～12μL。 6.根据权利要求4或者5所述的陈皮的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备步骤包括：用提取溶剂对所述陈皮进行提取，收集提取液，制备所述供试品溶液；优选地，所述提取溶剂包含甲醇体积百分比为10％～35％的甲醇水溶液；优选地，提取的方式采用超声提取；或/和，所述对照品溶液中的溶剂包含甲醇体积百分比为45％～55％的甲醇水溶液。 7.根据权利要求4或者5所述的陈皮的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述陈皮包含低陈化度陈皮、中等陈化度陈皮、高陈化度陈皮、高温加速陈皮、茶水染色陈皮、虫蛀陈皮、高湿加速陈皮、其他做旧方式陈皮和烧皮；其中，所述低陈化度陈皮对应存储于透气率＜5mm/s条件下自然陈化的陈皮，所述中等陈化度陈皮对应年份小于七年且存储于5≤透气率≤80mm/s条件下自然陈化的陈皮或者年份小于五年且存储于透气率＞80mm/s条件下自然陈化的陈皮，所述高陈化度陈皮对应年份大于等于七年且存储于5≤透气率≤80mm/s条件下自然陈化的陈皮或者年份大于等于五年且存储于透气率＞80mm/s条件下自然陈化的陈皮。 8.根据权利要求7所述的陈皮的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述陈皮为低陈化度陈皮，所述特征图谱包含峰4、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图9所示，所述陈皮为中等陈化度陈皮，所述特征图谱包含峰1、峰3、峰4、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图10所示，所述陈皮为高陈化度陈皮，所述特征图谱包含峰1、峰3、峰4、峰5、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图11所示，所述陈皮为高温加速陈皮，所述特征图谱包含峰2、峰3、峰4、峰5、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图12所示，所述陈皮为茶水染色陈皮，所述特征图谱包含峰4、峰5、峰6、峰7、峰8、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图13所示，所述陈皮为虫蛀陈皮，所述特征图谱包含峰1、峰3、峰4、峰5、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图14所示，所述陈皮为高湿加速陈皮，所述特征图谱包含峰2、峰3、峰4、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图16所示，所述陈皮为其他做旧方式陈皮，所述特征图谱包含峰1、峰3、峰4、峰5、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图15所示，所述陈皮为烧皮，所述特征图谱包含如图17所示的峰2、峰4、峰5、峰6、峰7、峰9、峰10、峰11和峰12，峰9为维采宁-2的色谱峰，各特征峰与峰9的相对位置基本如图17所示；以橙皮苷对应的峰12为参照峰，其余各特征峰的相对保留时间在相应的规定值±10％之内，各特征峰的规定值为：峰1为3.9min，峰2为11.4min，峰3为13.8min，峰4为15.5min，峰5为23.9min，峰6为29.8min，峰7为30.6min，峰8为31.9min，峰9为43.2min，峰10为45.5min，峰11为46.7min；或者，以维采宁-2对应的峰9为参照峰，其余各特征峰的相对保留时间在相应的规定值±10％之内，各特征峰的规定值为：峰1为3.9min，峰2为11.4min，峰3为13.8min，峰4为15.5min，峰5为23.9min，峰6为29.8min，峰7为30.6min，峰8为31.9min，峰10为45.5min，峰11为46.7min，峰12为56.4min。 9.一种陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述检测分级方法包括如下步骤：参照权利要求4至8任一项所述的构建方法构建不同品质级别的陈皮的特征图谱，所述陈皮的品质级别包含低陈化度陈皮、中等陈化度陈皮、高陈化度陈皮、高温加速陈皮、茶水染色陈皮、虫蛀陈皮、高湿加速陈皮、其他做旧方式陈皮和烧皮，制备待测陈皮的供试品溶液，采用高效液相色谱法对所述供试品溶液进行检测，在255nm～265nm下获得检测图谱；将所述检测图谱与所述不同品质级别的陈皮的特征图谱进行比对，根据特征峰种类的比对结果确定所述待测陈皮的品质级别。 10.一种陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述检测分级方法包括如下步骤：参照权利要求4至8任一项所述的构建方法构建高陈化度陈皮的特征图谱；提供包含维采宁-2或/和橙皮苷的对照品溶液，制备待测陈皮的供试品溶液，采用高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，在255nm～265nm下获得对照图谱和检测图谱，参照所述对照图谱比较所述检测图谱与所述高陈化度陈皮的特征图谱，根据特征峰缺失的比较结果确定所述待测陈皮的品质级别。 11.根据权利要求9或者10所述的陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述检测分级方法还包括：所述检测图谱所含色谱峰与所述高陈化度陈皮的特征图谱所含特征峰一致，则将所述检测图谱和所述高陈化度陈皮的特征图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统获得相似度系数，并根据所述相似度系数确定所述待测陈皮的品质级别。 12.根据权利要求1至3、9和10任一项所述的陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的条件包括：固定相为C18色谱柱，流动相A为甲醇，流动相B为磷酸体积百分比0.08％～0.12％的磷酸水溶液，采用梯度洗脱；优选地，梯度洗脱的程序包括： 0min～5min，所述流动相A的体积百分比为5％， 5min～10min，所述流动相A的体积百分比由5％上升至10％， 10min～15min，所述流动相A的体积百分比为10％， 15min～25min，所述流动相A的体积百分比由10％上升至20％， 25min～35min，所述流动相A的体积百分比由20％上升至25％， 35min～50min，所述流动相A的体积百分比由25％上升至40％， 50min～55min，所述流动相A的体积百分比为40％， 55min～60min，所述流动相A的体积百分比由40％上升至50％， 60min～65min，所述流动相A的体积百分比为50％；或/和，所述高效液相色谱法的条件包括：流速为0.8mL/min～1.2mL/min，或/和，柱温为28℃～32℃，或/和，进样量为8μL～12μL。 13.根据权利要求1至3、9和10任一项所述的陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备步骤包括：用提取溶剂对所述待测陈皮进行提取，收集提取液，制备所述供试品溶液；优选地，所述提取溶剂包含甲醇体积百分比为10％～35％的甲醇水溶液；优选地，提取的方式采用超声提取。 14.一种陈皮的检测分级方法，其特征在于，所述检测分级方法包括以下步骤：提供陈皮样品，参照权利要求1至3任一项所述的检测分级方法，根据色谱峰面积比值确定所述陈皮样品的品质级别，参照权利要求11所述的检测分级方法，根据相似度系数确定所述陈皮样品的品质级别，根据以下质量分级方法确定所述陈皮样品的综合品质等级，根据确定的所述综合品质等级，对所述陈皮样品进行检测分级。
所属类别：	发明专利