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原文传递一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

专利名称：	一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
摘要：	本发明公开了一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，属于中药制剂分析技术领域。所述的指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：桑白皮汤物质基准的制备；供试品溶液的制备；对照品溶液的制备；利用高效液相色谱仪测定；桑白皮汤指纹图谱的构建。色谱条件：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充材料；检测波长为250nm；流速为1.0ml/min；柱温为25℃；进样量为10μl；甲醇和磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。该方法具有重复性好、稳定性和精密度高，操作简便等优点。采用本方法建立的桑白皮汤物质基准指纹图谱有23个共有峰，指认了4个共有特征峰，选择7号峰作为指纹图谱中的参照峰，对桑白皮汤物质基准进行了研究，为其后续研究开发奠定了基础。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东祥隆医药研究院有限公司
发明人：	王美丹;于文潇;车晓青;王继鹏;于希蕊
专利状态：	有效
申请日期：	2021-02-04T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-29T00:00:00+0800
申请号：	CN202110150211.3
公开号：	CN114252518A
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	264003 山东省烟台市莱山区金斗山路5006号
主权项：	1.一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)桑白皮汤物质基准的制备：取桑白皮、姜半夏、紫苏子、苦杏仁、川贝母、栀子、黄芩、黄连、生姜片，加水，武火煮沸，转文火煎煮，滤过，冷冻干燥，得到桑白皮汤物质基准冻干粉。 (2)供试品溶液的制备：取桑白皮汤物质基准冻干粉，精密称定，精密加入一定量溶剂，超声提取，放冷，滤过，取续滤液，过微孔滤膜，备用。 (3)对照品溶液的制备：取苦杏仁苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、栀子苷对照品，精密称定，加适量溶剂溶解，过微孔滤膜，即得对照品溶液。 (4)测定：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，进行测定，记录色谱图； (5)桑白皮汤物质基准指纹图谱的构建：将不同批次的供试品色谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价软件，选择各批次供试品中共有的色谱峰，生成桑白皮汤物质基准对照指纹图谱，计算各共有峰的相对峰面积和相对保留时间。 2.根据权利要求1所述的一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)中，所述桑白皮汤物质基准的制备方法如下：取桑白皮12g、姜半夏12g、紫苏子12g、苦杏仁12g、川贝母12g、栀子12g、黄芩12g、黄连12g、生姜片75g，加水2000ml，武火煮沸，转文火煎煮至800ml，滤过，冷冻干燥，得到桑白皮汤物质基准冻干粉。 3.根据权利要求1所述的一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中，所述供试品溶液的制备方法如下：取桑白皮汤物质基准约2g，精密称定，精密加入70％甲醇20ml，超声提取10min，放冷，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，备用。 4.根据权利要求1所述的一种桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中，所述对照品溶液的制备方法如下：取苦杏仁苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、栀子苷对照品，精密称定，分别加甲醇制成浓度为100μg/ml、60μg/ml、100μg/ml、50μg/ml的对照品溶液，过0.45μm微孔滤膜。 5.根据权利要求1所述的一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(4)中，所述测定法如下：分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定。 6.根据权利要求1所述的一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(5)中，桑白皮汤物质基准指纹图谱测定的色谱条件为：色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱柱(5μm，4.6×250mm)；流动相为甲醇(A)-0.1％磷酸溶液，梯度洗脱(A)：0-10min，8％-10％；10-15min，10％-17％；15-20min，17％；20-30min，17％-25％；30-32min，25％-28％；32-37min，28％；37-50min，28％-41％；50-60min，41％-50％；65-70min，50％-57％；70-75min，57％-62％；75-80min，62％-75％；80-82min，75％-8％；82-85min，8％。流速1ml/min；柱温25℃；进样量10μl；检测波长250nm。 7.根据权利要求1所述的一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(5)中，所述建立方法得到的指纹图谱中含有23个共有峰，其中4号峰为苦杏仁苷，7号峰为栀子苷，14号峰为盐酸小檗碱，16号峰为黄芩苷。各共有峰以7号峰为参照峰的相对峰面积和相对保留时间如下：表1 15批样品共有峰相对峰面积(以栀子苷作为参照) 表2 15批样品共有峰相对保留时间(以栀子苷作为参照)
所属类别：	发明专利