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原文传递辣木叶UPLC指纹图谱建立方法及其UPLC指纹图谱

专利名称：	辣木叶UPLC指纹图谱建立方法及其UPLC指纹图谱
摘要：	本发明公开了辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法及其UPLC指纹图谱，所建立的方法包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备；(2)供试样品溶液的制备；(3)超高效液相色谱法测定条件的建立及测定。上述辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法专属性强、操作简便、方法学考察试验证明其具有良好的稳定性、重复性和精密度，可较全面的检测辣木叶中的主要成分，为药材质量控制提供科学参考。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	暨南大学
发明人：	叶文才;范春林;王英;许琳;曾瑚瑚;刘辉;张晓琦
专利状态：	有效
申请日期：	2018-07-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201810841750.X
公开号：	CN110346462A
代理机构：	北京君有知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	夏娟娟
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510632 广东省广州市黄埔大道西601号
主权项：	1.一种辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液的制备精密称取腺苷、L-苯丙氨酸、5-咖啡酰奎宁酸、L-色氨酸、4-咖啡酰奎宁酸、维采宁-2、牡荆素、异牡荆素、异槲皮素、槲皮素-3-O-(6″-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷、紫云英苷和山奈酚-3-O-(6″-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷，分别加入甲醇溶液稀释配制成浓度为0.05～1.0mg/mL的溶液，微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。 (2)供试品溶液的制备精确称取辣木叶细粉，加入溶剂，称重，加热回流或者超声提取，放至室温，补足重量。静置，取上清液，微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。 (3)色谱条件及系统适用性试验色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱检测波长：205-280nm 流速：0.3-0.5mL/min 柱温：30-45℃ 进样量：0.5-5.0μL 流动相：流动相A为三氟乙酸体积百分比为0.005％-0.02％的水溶液或者为甲酸体积百分比为0.05％-0.2％的水溶液，流动相B为乙腈或甲醇，梯度洗脱。 (3)测定：将步骤(2)的样品照超高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。 2.根据权利要求1所述的辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(3)中所述色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18 RRHD柱，规格为2.1×100mm,1.8～2.1μm；AgilentEclipse XDB C18柱，规格为3.0×100mm,1.8～2.1μm；Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱，规格为2.1×100mm，1.8～2.1μm。 3.根据权利要求1所述的辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述流动相为B为乙腈，所述梯度洗脱程序为： 0分钟时，流动相A的体积百分比为95％，流动相B体积百分比为5％； 10分钟时，流动相A的体积百分比为87％，流动相B体积百分比为13％； 20分钟时，流动相A的体积百分比为82％，流动相B体积百分比为18％； 25分钟时，流动相A的体积百分比为70％，流动相B体积百分比为30％。 4.根据权利要求1所述的辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述流动相为B为甲醇，所述梯度洗脱程序为： 0分钟时，流动相A的体积百分比为95％，流动相B体积百分比为5％； 12分钟时，流动相A的体积百分比为82％，流动相B体积百分比为18％； 14分钟时，流动相A的体积百分比为70％，流动相B体积百分比为30％； 30分钟时，流动相A的体积百分比为67％，流动相B体积百分比为33％。 5.根据权利要求1所述的辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，有15个特征共有峰，利用PDA检测器和质谱检测器，供试品溶液与对照品溶液同时检测，其中选自以下一种或多种共有峰进行指认：1号峰为腺苷、2号峰为L-苯丙氨酸、3号峰为5-咖啡酰奎宁酸、4号峰为L-色氨酸、6号峰为4-咖啡酰奎宁酸、7号峰为维采宁-2、8号峰为牡荆素、9号峰为异牡荆素、10号峰为异槲皮素，11号峰为槲皮素-3-O-(6″-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷，13峰为紫云英苷，15号峰为山奈酚-3-O-(6″-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷。 6.根据权利要求5所述的辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，对以下共有峰进行指认：1号峰为腺苷、2号峰为L-苯丙氨酸、3号峰为5-咖啡酰奎宁酸、4号峰为L-色氨酸、6号峰为4-咖啡酰奎宁酸、7号峰为维采宁-2、8号峰为牡荆素、9号峰为异牡荆素、10号峰为异槲皮素，11号峰为槲皮素-3-O-(6″-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷，13峰为紫云英苷，15号峰为山奈酚-3-O-(6″-丙二酰基)-β-D-葡萄糖苷。 7.根据权利要求1所述的辣木叶UPLC指纹图谱的建立方法，作为辣木叶、辣木茶或辣木叶制剂中的质量控制应用。
所属类别：	发明专利