主权项: |
1.一种复方菝葜颗粒UPLC指纹图谱的建立方法,包括以下步骤:(1)样品的制备①供试品溶液配制:精密称取批复方菝葜颗粒1.0g,加甲醇定容至10mL,密闭,超声溶解,放冷,甲醇补足失重,摇匀,滤过,取滤液用0.22μm滤膜滤过,得到供试品溶液;②混合对照品溶液配制:取绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷、金丝桃苷、落新妇苷、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、3,5‑二咖啡酰奎宁酸,4,5‑二咖啡酰奎宁酸对照品适量,加适量甲醇制成含绿原酸90μg/mL、新绿原酸102.7μg/mL、隐绿原酸72.8μg/mL、金丝桃苷101.8μg/mL、落新妇苷133μg/mL、异槲皮苷104.8μg/mL、3,4‑二咖啡酰奎宁酸217.8μg/mL、3,5‑二咖啡酰奎宁酸93.2μg/mL,4,5‑二咖啡酰奎宁酸95.5μg/mL的混合对照溶液;(2)复方菝葜颗粒提取物UPLC指纹图谱将步骤1)中的供试品溶液和混合对照溶液,各取2μL,分别注入UPLC色谱分析,按照以下色谱条件进行测定,记录38min的色谱图,得到指纹图谱;色谱条件为:色谱柱为EC‑C18:3.0mm×50mm,2.7μm;检测波长280nm;柱温25℃;体积流量0.6ml/min;进样量2ul;流动相为A为甲醇,流动相B为0.3%甲酸水;梯度洗脱:0~2min,2%A,98%B;2~5min,2%~7%A,93%~98%B;5~12min,7%~11%A,89%~93%B;12~15min,11%~14%A,86%~89%B;15~17min,14%~16%A,84%~86%B;17~18min,16%~18%A,82%~84%B;18~20min,18%~20%A,80%~82%B;20~21min,20%~24%A,76%~80%B;21~24min,24%~26%A,74%~76%B;24~28min,26%~28%A,72%~74%B;28~29min,28%A,72%B;29~30min,28%~31%A,69%~72%B;30~35min,31%~48%A,52%~69%B;35~38min,48%A,52%B。 |