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原文传递蓝芩口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱和应用

专利名称：	蓝芩口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱和应用
摘要：	本发明公开了蓝芩口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱和用途。本发明以蓝芩口服液制备得供试品溶液，以溶解有腺苷、表告依春、盐酸黄柏碱、绿原酸、木兰花碱、栀子苷、苯甲酸、盐酸小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的溶液为对照品溶液，通过高效液相色谱仪测定液相色谱；将得到的液相色谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统分析，经多点校正，数据匹配，分析得到蓝芩口服液指纹图谱。本发明的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱能较全面的反映蓝芩口服液的质量信息，保证产品质量均一稳定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	扬子江药业集团有限公司
发明人：	陈钟;任晓亮;姚仲青;曹雪晓;游慧;邱峰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910383478.X
公开号：	CN110108825A
代理机构：	北京安信方达知识产权代理有限公司
代理人：	牛利民;张奎燕
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	225321 江苏省泰州市高港区扬子江南路一号
主权项：	1.一种蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，所述建立方法包括以下步骤： (1)供试品溶液的制备：以蓝芩口服液制备得供试品溶液； (2)对照品溶液的制备：以溶解有腺苷对照品、表告依春对照品、盐酸黄柏碱对照品、绿原酸对照品、木兰花碱对照品、栀子苷对照品、苯甲酸对照品、盐酸小檗碱对照品、黄芩苷对照品、汉黄芩苷对照品、黄芩素对照品和汉黄芩素对照品的溶液为对照品溶液； (3)采用HPLC分别测定步骤(1)的供试品溶液和步骤(2)的对照品溶液，并分别得到所述供试品溶液和所述对照品溶液的液相色谱； (4)将步骤(3)得到的液相色谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统分析，得到蓝芩口服液的指纹图谱。 2.根据权利要求1所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(1)的供试品溶液的制备包括：精密吸取蓝芩口服液100～300μl于10mL离心管中，加入4～8mL的体积分数为50％-100％的甲醇水溶液进行稀释，混匀后过0.45μm微孔滤膜；或者，所述步骤(1)的供试品溶液的制备包括：精密吸取蓝芩口服液200μl于10mL离心管中，加入4.8mL的甲醇进行稀释，混匀后过0.45μm微孔滤膜。 3.根据权利要求1所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(2)的对照品溶液的制备包括：精密称取腺苷对照品、表告依春对照品、盐酸黄柏碱对照品、绿原酸对照品、木兰花碱对照品、栀子苷对照品、苯甲酸对照品、盐酸小檗碱对照品、黄芩苷对照品、汉黄芩苷对照品、黄芩素对照品和汉黄芩素对照品，加入体积分数为70％-100％的甲醇水溶液制成每1mL含有5～8μg腺苷、2～6μg表告依春、5～8μg盐酸黄柏碱、30～50μg绿原酸、2～5μg木兰花碱、200～300μg栀子苷、100～200μg苯甲酸、2～5μg盐酸小檗碱、150～250μg黄芩苷、50～100μg汉黄芩苷、8～15μg黄芩素、8～15μg汉黄芩素的对照品溶液；或者，所述步骤(2)对照品溶液的制备包括：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加体积分数为70％甲醇水溶液溶解，配制成含量为208μg·mL-1的对照品溶液，分别取腺苷对照品、表告依春对照品、盐酸黄柏碱对照品、绿原酸对照品、木兰花碱对照品、栀子苷对照品、苯甲酸对照品、盐酸小檗碱对照品、汉黄芩苷对照品、黄芩素对照品、汉黄芩素对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，配制成含量分别为7.52μg·mL-1、3.84μg·mL-1、6.44μg·mL-1、32.96μg·mL-1、2.52μg·mL-1、284.00μg·mL-1、162.00μg·mL-1、4.56μg·mL-1、98.00μg·mL-1、10.60μg·mL-1、9.76μg·mL-1的对照品溶液。 4.根据权利要求1所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(3)包括设置HPLC色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱温25-35℃，流速为0.8-1.2mL/min，检测波长250-320nm，并开启DAD检测；以乙腈为流动相A，以体积分数为0.06-0.2％磷酸水溶液为流动相B，在体积比为5～95:100～0的范围内梯度洗脱；分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液5～20μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱。 5.根据权利要求4所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(3)包括设置HPLC色谱条件：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以Waters 2695 ACQUITYHPLCTM(4.6mm×250mm，5.0μm)为色谱柱，柱温30℃，流速为1.0mL/min，检测波长为230nm，并开启DAD检测；以乙腈为流动相A，以体积分数为0.2％磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为0～12min，A:B为5％:95％→11％:89％；12～24min，A:B为11％:89％→11％:89％；24～38min，A:B为11％:89％→23％:77％；38～50min，A:B为23％:77％→28％:72％；50～55min，A:B为28％:72％→31％:69％；55～70min，A:B为31％:69％→100％:0％；分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定，分别得到供试品溶液和对照品溶液的液相色谱。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(4)包括：采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版，将步骤(3)得到的液相色谱的数据导入、多点校正、数据匹配，分析得到蓝芩口服液的指纹图谱。 7.根据权利要求6所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(4)得到的蓝芩口服液指纹图谱包括腺苷对应的1号峰、表告依春对应的4号峰、盐酸黄柏碱对应的5号峰、绿原酸对应的6号峰、木兰花碱对应的7号峰、栀子苷对应的9号峰、苯甲酸对应的15号峰、盐酸小檗碱对应的16号峰、黄芩苷对应的17号峰、汉黄芩苷对应的22号峰、黄芩素对应的24号峰和汉黄芩素对应的25号峰，其相对保留时间分别为0.120、0.587、0.711、0.777、0.806、1.000、1.882、1.946、2.002、2.615、2.856和3.003。 8.根据权利要求7所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述步骤(4)得到的蓝芩口服液指纹图谱的共有峰还包括相对保留时间为0.382的2号峰、相对保留时间为0.453的3号峰、相对保留时间为0.846的8号峰、相对保留时间为1.400的10号峰、相对保留时间为1.499的11号峰、相对保留时间为1.731的12号峰、相对保留时间为1.812的13号峰、相对保留时间为1.847的14号峰、相对保留时间为227的18号峰、相对保留时间为2.375的19号峰、相对保留时间为2.414的20号峰、相对保留时间为2.495的21号峰、相对保留时间为2.835的23号峰、相对保留时间为3.015的26号峰。 9.根据权利要求1所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法，其中，所述蓝芩口服液可以用蓝芩口服液关键工艺中间体代替；所述蓝芩口服液关键工艺中间体包括浓缩工艺中间体I、收膏工艺中间体II、初配工艺中间体III、精配工艺中间体IV。 10.权利要求1-9中任一项所述的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法所得到的指纹图谱。 11.权利要求10所述的指纹图谱在蓝芩口服液全过程质量评价体系或者蓝芩口服液工艺关键点控制的应用。
所属类别：	发明专利