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原文传递一种羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法

专利名称：	一种羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法
摘要：	本发明公开了一种羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，属于分离分析化学领域，通过合成反应，合成出单取代和二取代的羟基苯甲酰奎宁酸不同位置异构体和羟基肉桂酰奎宁酸不同位置异构体，然后对其二级质谱裂解规律和保留时间规律进行研究，并给出了区分位置异构体的方法，给没有标样的异构体的定性分析提供了一种新思路。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省分析测试中心
发明人：	李丽丽;王晓;王燕;纪文华;李月;范佳丽
专利状态：	有效
申请日期：	2022-10-20T00:00:00+0800
发布日期：	2023-01-13T00:00:00+0800
申请号：	CN202211288878.0
公开号：	CN115598251A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	郑平
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
申请人地址：	250014 山东省济南市历下区科院路19号
主权项：	1.一种羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)通过Steglich酯化反应合成一系列单取代和二取代的羟基苯甲酰奎宁酸不同位置异构体和羟基肉桂酰奎宁酸不同位置异构体； (2)通过UPLC–QTOF–MS/MS对(1)得到的不同位置异构体进行定性分析；以有标样的咖啡酰奎宁酸异构体、阿魏酰奎宁酸异构体、二咖啡酰奎宁酸异构体的洗脱规律为依据，确定其余单取代和二取代的羟基苯甲酰奎宁酸不同位置异构体、羟基肉桂酰奎宁酸不同位置异构体的色谱保留规律；将洗脱得到的不同位置异构体，在负离子模式下，以多个碰撞能进行二级质谱分析，根据异构体的主要碎片离子种类或相对强度或子离子和母离子的强度比值对不同位置异构体进行定性判断。 2.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，所述色谱保留规律的确认具体为：有标样的3-,4-,5-位单咖啡酰奎宁酸异构体和单阿魏酰奎宁酸异构体的色谱保留规律一致，以此确定其余单取代和二取代的羟基苯甲酰奎宁酸不同位置异构体、羟基肉桂酰奎宁酸不同位置异构体的色谱保留规律也是一致。 3.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，所述羟基苯甲酰奎宁酸包括香草酰奎宁酸、丁香酰奎宁酸、二香草酰奎宁酸、二丁香酰奎宁酸。 4.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，所述羟基肉桂酰奎宁酸包括阿魏酰奎宁酸、对香豆酰奎宁酸、二阿魏酰奎宁酸、二对香豆酰奎宁酸。 5.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，所述碰撞能为10-30eV。 6.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，色谱条件为：色谱柱为2.1mm×100mm，1.8μm的Agilent SB-C18柱，流速为0.3mL/min，柱温为40℃，进样量2μL。 7.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，流动相A和B分别为含有质量分数为0.6％甲酸的水溶液和乙腈溶液；洗脱程序为梯度洗脱：起始梯度为5％B；20min，线性升至25％B；35min，线性升至100％B，维持5min；最后降至5％B，维持5min。 8.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，质谱条件为：喷雾器，2.0Bar；干燥气流速，8L/min；雾化气压力，200kPa；干燥气温度，200℃；离子漏斗，300Vpp；六级杆，60Vpp；传输时间，70μs；碰撞池射频电压振幅，600Vpp；脉冲前等待时间，7μs；毛细管电压负模式下设置为3000V；质量数扫描范围为50-1200；二级质谱分析时碰撞能为10-30eV。 9.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，所述Steglich酯化反应为：在反应容器中，依次加入苯甲酸或者肉桂酸、奎宁酸、1-乙基-(3-二甲基氮基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲基吡啶，惰性气体保护下，加入有机溶剂，室温下搅拌反应，反应结束后抽滤、真空干燥即得。 10.如权利要求1所述羟基苯甲酰奎宁酸和羟基肉桂酰奎宁酸异构体定性分析方法，其特征在于，羟基苯甲酸或羟基肉桂酸与奎宁酸、1-乙基-(3-二甲基氮基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲基吡啶的摩尔比为1-1.5：1-1.5：1-1.5：0.5-1，优选为1：1.5：1.5：0.5。