详情

原文传递一种同时检测7种抗新冠病毒药物含量的方法

专利名称：	一种同时检测7种抗新冠病毒药物含量的方法
摘要：	本发明提供了一种同时检测7种抗新冠病毒药物含量的方法。所述方法包括如下步骤：配制至少三种不同浓度的含有7种抗新冠病毒药物及其内标物的标准溶液，利用液相色谱‑质谱进行检测，建立标准曲线方程；将待测样品、内标物和蛋白沉淀剂混合，蛋白沉淀剂的体积为待测样品体积的50倍以上，离心，取上清液进行稀释，得到待测进样样品；利用液相色谱‑质谱对待测进样样品进行检测，根据检测结果和标准曲线方程计算得到待测样品中7种抗新冠病毒药物的含量。本发明提供的方法能够同时检测7种抗新冠病毒药物，且具有准确度、灵敏度高，重现性好，检测时间短的优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京和合医学诊断技术股份有限公司
发明人：	邱天祎;贾永娟;赵金宝;倪君君
专利状态：	有效
申请日期：	2022-12-07T00:00:00+0800
发布日期：	2023-01-20T00:00:00+0800
申请号：	CN202211562906.3
公开号：	CN115629145A
代理机构：	北京开阳星知识产权代理有限公司
代理人：	吕亚会
分类号：	G01N30/02;G01N30/14;G01N30/72;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/14;G01N30/72
申请人地址：	101111 北京市大兴区经济技术开发区经海六路5号东尚E园14号楼
主权项：	1.一种同时检测7种抗新冠病毒药物含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：标准曲线方程的建立：配制至少三种不同浓度的含有7种抗新冠病毒药物及其内标物的标准溶液；利用液相色谱-质谱对所述标准溶液进行检测，根据检测结果建立每一种抗新冠病毒药物/内标物色谱峰面积比-抗新冠病毒药物/内标物浓度比标准曲线方程；待测样品前处理：将待测样品、内标物和蛋白沉淀剂混合，所述蛋白沉淀剂的体积为所述待测样品体积的50倍以上，离心，取上清液进行稀释，得到待测进样样品；待测样品检测：利用液相色谱-质谱对所述待测进样样品进行检测，根据检测结果和所述标准曲线方程计算得到所述待测样品中7种抗新冠病毒药物的含量；其中，所述7种抗新冠病毒药物为洛匹那韦、利托那韦、利巴韦林、氯喹、阿比多尔、达芦那韦和考比司他。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准溶液的制备方法为：配制至少三种不同浓度的含有7种抗新冠病毒药物的目标工作液，然后按照与所述待测样品相同的前处理方法进行处理，得到所述标准溶液。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述目标工作液的溶剂为甲醇与水的混合液。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，不同浓度的标准溶液中同一种内标物的浓度相同。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述7种抗新冠病毒药物的内标物为同位素内标物。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述7种抗新冠病毒药物的内标物分别为洛匹那韦-d8、利托那韦-d6、利巴韦林-13C5、氯喹-d5、阿比多尔-d6、达芦那韦-d9、考比司他-d8。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品为血浆或血清。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内标物以内标工作液的形式添加，所述内标工作液为含有所述7种抗新冠病毒药物的内标物的溶液。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述内标工作液的溶剂为甲醇与水的混合液。 10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述待测样品与内标工作液的体积比为1:0.5-3。 11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白沉淀剂选自甲醇、乙醇、乙腈和异丙醇中的一种或多种。 12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白沉淀剂的体积为所述待测样品体积的50-800倍。 13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品前处理中所述上清液进行稀释时采用的稀释剂为甲醇与水体积比为3:7-7:3的混合液。 14.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测样品前处理中所述待测样品的总稀释倍数为100-5000倍。 15.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相色谱的条件包括：色谱柱为有异丁基侧链保护的C18色谱柱；和/或，柱温为30-55℃；和/或，流动相流速为0.3-0.6 mL/min；和/或，流动相由流动相A和流动相B组成，所述流动相A为含有1-50 mmol/L甲酸铵和0.1-1vol%甲酸的水溶液，所述流动相B为乙腈；和/或，洗脱方式为梯度洗脱。 16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的流动相为： 0-0.5k min：50%流动相A线性递减至0%，50%流动相B线性递增至100%； 0.5k -1k min：100%流动相B； 1k -2.5k min：50%流动相A，50%流动相B；其中，k =0.4/流动相流速值。 17.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述质谱的条件包括：质谱检测器采用电喷雾离子源，正离子模式，多反应监测，电喷雾电压为5000V，离子源温度为400-600℃，雾化气流速为30-80 L/min，辅助气流速为40-70 L/min。