详情

原文传递用于检测靶分析物的方法、测定和系统

专利名称：	用于检测靶分析物的方法、测定和系统
摘要：	本文公开的条系统、方法、装置和相关试剂盒用于确定样品(例如生物样品，例如唾液或鼻拭子)中靶分析物的存在和/或水平，其中所述靶分析物可以是与健康状态、疾病或损伤或以其它方式改变的生理状况相关的微生物(例如，全病毒)或分子(例如，病毒抗原)。在某些实施方案中，系统、方法、装置和试剂盒提供了相对于横向流蛋白和本领域已知用于检测的其它测定的一种或多种改善的特性，包括但不限于测定时间、易用性、感染风险、准确度、特异性、选择性、测定的检测限、定量检测以及常见干扰物对传感器输出的影响、成本、简单性或其组合。在某些实施方案中，系统、测定、方法和试剂是多路复用的，即允许检测或监测多于一种靶分析物(例如，两种不同的病毒或病毒和细菌)。
专利类型：	发明专利
申请人：	索伦托治疗有限公司
发明人：	M·W·格林斯塔夫;S·E·绍斯;J·P·比林格;A·朗;Z·阿尔-沙姆西;D·切里亚尼
专利状态：	有效
申请日期：	2022-01-13T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-28T00:00:00+0800
申请号：	CN202280021287.9
公开号：	CN117136307A
代理机构：	中国专利代理(香港)有限公司
代理人：	任晓华;张华
分类号：	G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/543
申请人地址：	美国加利福尼亚州
主权项：	1.一种用于检测加入系统中的生物样品中的至少一种靶分析物的系统，其包括：(i)包含至少一种捕获试剂和至少一种检测试剂的测定，如果存在至少一种靶分析物，所述试剂能够在添加的底物的存在下与所述至少一种靶分析物产生可检测复合物；以及(ii)用于检测所述可检测复合物的检测装置，其中所述检测装置包括包含至少一个电极的基于酶的电流型传感器，其中所述可检测复合物在至少一个电极上方形成或在所述系统内迁移以变得定位于至少一个电极上方。 2.权利要求1的系统，其中在约30分钟或更短时间内检测到所述可检测复合物。 3.权利要求1的系统，其中在选自约10分钟或更短、约5分钟或更短、约2分钟或更短、或者约1分钟或更短的时间范围内检测到所述可检测复合物。 4.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是蛋白质或肽。 5.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是病毒蛋白质或肽。 6.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是冠状病毒的核衣壳(N)蛋白。 7.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是冠状病毒的N蛋白的表位。 8.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是SARS-CoV-2或其变体的N蛋白。 9.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是SARS-CoV-2或其变体的N蛋白的表位。 10.权利要求1-3的系统，其中所述系统检测所述生物样品中的两种或更多种靶分析物。 11.权利要求1-3的系统，其中所述系统检测所述生物样品中的两个或更多个病毒物种。 12.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是细胞因子。 13.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是白细胞介素或干扰素。 14.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是激素。 15.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是小分子。 16.权利要求1-11的系统，其中所述系统具有约1ng/ML或更低的检测限(LOD)。 17.权利要求1-15的系统，其中所述系统具有约500pg/mL或更低的LOD。 18.权利要求1-15的系统，其中所述系统具有约100pg/mL或更低的LOD。 19.权利要求1-15的系统，其中所述系统具有约100个靶分析物/mL或更低的LOD。 20.权利要求1-14的系统，其中所述系统具有选自约20、约10或约5个靶分析物/mL或更低的LOD。 21.权利要求1-3的系统，其中所述靶分析物是全病毒。 22.权利要求21的系统，其中所述病毒是SARS-CoV-2或其变体。 23.权利要求1-3的系统，其中所述系统具有约10000TCID50/mL或更低的LOD。 24.权利要求1-3的系统，其中所述系统具有小于约100或更低、约50或更低、约10或更低、或者约5或更低TCID50/mL的LOD。 25.权利要求1-24的系统，其中所述捕获试剂和检测试剂选自适体、抗体、蛋白质或其组合。 26.权利要求1-25的系统，其中所述检测试剂用酶进行标记。 27.权利要求25的系统，其中所述酶是氧化还原酶。 28.权利要求26的系统，其中所述酶选自氧化酶、过氧化物酶、氢化酶、过氧化氢酶、脱氢酶或磷酸酶。 29.权利要求25的系统，其中所述酶是碱性磷酸酶，并且所述添加的底物选自5'-磷酸吡哆醛(PLP)、5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸酯/盐、L-抗坏血酸-2-磷酸酯/盐、对乙酰氨基酚磷酸酯/盐、4-乙酰氨基苯基磷酸酯/盐、二乙醇胺(DEA)中的4-氨基苯基磷酸酯/盐、1-氨基-2-丙醇、N-甲基-D-葡糖胺或tris缓冲液。 30.权利要求25的系统，其中所述酶是葡萄糖氧化酶并且所述添加的底物是葡萄糖。 31.权利要求1-30的系统，其中所述捕获试剂固定到固体或多孔支持物上，从而提供测试位点。 32.权利要求31的系统，其中所述捕获试剂借助于第一结合试剂固定到固体支持物上。 33.权利要求31-32的系统，其中所述捕获试剂缀合到第二结合试剂，其中所述第二结合试剂与所述第一结合试剂结合。 34.权利要求31-34的系统，其中所述第一结合试剂与一种或多种另外的第一结合试剂交联。 35.权利要求31-34的系统，其中所述捕获试剂与一种或多种另外的捕获试剂交联。 36.权利要求32-35的系统，其中所述第一结合试剂选自链霉抗生物素蛋白、金、银、马来酰亚胺、丙烯酸酯、胺、羧酸、乙烯基砜、硫醇、硅烷和环氧化物。 37.权利要求31-36的系统，其中所述固体支持物进一步包括对照位点。 38.权利要求1-30的系统，其中所述至少一种捕获试剂和至少一种检测试剂中的至少一种由用户加入所述系统中。 39.权利要求1-38的系统，其中所述测定容纳在盒内。 40.权利要求1-4的系统，其中所述捕获试剂和检测试剂对于所述蛋白质具有约10-10Kd或更小的Kd。 41.权利要求1-4的系统，其中关于所述蛋白质的捕获试剂和检测试剂对于所述蛋白质具有约10-8Kd或更小的Kd。 42.权利要求1-4的系统，其中所述捕获试剂和检测试剂对于所述蛋白质具有约10-6或更小的Kd。 43.权利要求1-42的系统，其中系统允许至少约90％或更高的准确度。 44.权利要求1-42的系统，其中所述系统允许至少约98％或更高的准确度。 45.权利要求1-43的系统，其中所述系统连续地产生电化学信号。 46.权利要求1-45的系统，其中所述电化学信号是不连续地收集的。 47.权利要求46的系统，其中所述电化学信号以由通过等待期分开的间隔进行收集。 48.权利要求1-47的系统，其中所述测定是横向流测定。 49.权利要求1-46的系统，其中所述测定是垂直流测定。 50.权利要求1-49的系统，其中所述自我监测系统。 51.权利要求1-50的系统，其中所述检测是定量的。 52.一种用于检测样品中的至少一种靶分析物的测定体系，其包含至少一种捕获试剂和至少一种检测试剂，其中所述检测试剂用酶标记进行标记，并且在至少一种靶分析物和添加的底物的存在下，所述捕获试剂和检测试剂形成可检测复合物。 53.权利要求52的测定体系，其中在约30分钟或更短时间内检测到所述可检测复合物。 54.权利要求52-53的测定体系，其中在选自约10分钟或更短、约5分钟或更短、约2分钟或更短、或者约1分钟或更短的时间范围内检测到所述可检测复合物。 55.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是蛋白质或肽。 56.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是病毒蛋白质或肽。 57.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是冠状病毒的核衣壳(N)蛋白。 58.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是冠状病毒的N蛋白的表位。 59.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是SARS-CoV-2或其变体的N蛋白。 60.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是SARS-CoV-2或其变体的N蛋白的表位。 61.权利要求52-54的测定体系，其中所述系统检测所述生物样品中的两个或更多个病毒物种。 62.权利要求52-54的测定体系，其中靶分析物是细胞因子。 63.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是白细胞介素或干扰素。 64.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是激素。 65.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是小分子。 66.权利要求52-65的测定体系，其中所述测定具有约1ng/ML或更低的检测限(LOD)。 67.权利要求52-65的测定体系，其中所述测定具有约500pg/mL或更低的LOD。 68.权利要求52-65的测定体系，其中所述测定具有约100pg/mL或更低的LOD。 69.权利要求52-65的测体系定，其中所述测定具有约100个靶分析物/mL或更低的LOD。 70.权利要求52-65的系统体系，其中所述测定具有选自20、10或5个靶分析物/mL或更低的LOD。 71.权利要求52-54的测定体系，其中所述靶分析物是全病毒。 72.权利要求52-54的测定体系，其中所述病毒是SARS-CoV-2或其变体。 73.权利要求52-54的测定体系，其中所述测定具有约10000TCID50/mL或更低的LOD。 74.权利要求52-54的测定体系，其中所述测定具有约100TCID50/mL或更低、约75TCID50/mL、约50TCID50/mL或更低、约25TCID50/mL或更低、约10TCID50/mL或更低、或者约5TCID50/mL或更低的LOD。 75.权利要求52-74的测定体系，其中所述捕获试剂和检测试剂选自适体、抗体、蛋白质或其组合。 76.权利要求52-75的测定体系，其中所述检测试剂用酶进行标记。 77.权利要求76的测定体系，其中所述酶是氧化还原酶。 78.权利要求77的测定体系，其中所述酶选自氧化酶、过氧化物酶、氢化酶、过氧化氢酶、脱氢酶或磷酸酶。 79.权利要求76的测定体系，其中所述酶是碱性磷酸酶，并且所述添加的底物是5'-磷酸吡哆醛(PLP)、5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸酯/盐、L-抗坏血酸-2-磷酸酯/盐、对乙酰氨基酚磷酸酯/盐、4-乙酰氨基苯基磷酸酯/盐、二乙醇胺(DEA)中的4-氨基苯基磷酸酯/盐、1-氨基-2-丙醇、N-甲基-D-葡糖胺或tris缓冲液。 80.权利要求76的测定体系，其中所述酶是葡萄糖氧化酶并且所述添加的底物是葡萄糖。 81.权利要求52-80的系统，其中所述捕获试剂固定到固体或多孔支持物上，从而提供测试位点。 82.权利要求81的测定体系，其中所述捕获试剂借助于第一结合试剂固定到固体或多孔支持物上。 83.权利要求82的测定体系，其中所述捕获试剂缀合到第二结合试剂，其中所述第二结合试剂与所述第一结合试剂结合。 84.权利要求82-83的测定体系，其中所述第一结合试剂与一种或多种另外的第一结合试剂交联。 85.权利要求81-84的测定体系，其中所述捕获试剂与一种或多种另外的捕获试剂交联。 86.权利要求83的测定体系，其中所述第一结合试剂选自链霉抗生物素蛋白、金、银、马来酰亚胺、丙烯酸酯、胺、羧酸、乙烯基砜、硫醇、硅烷和环氧化物。 87.权利要求82-86的测定体系，其中所述固体支持物进一步包括对照位点。 88.权利要求52-80的测定体系，其中所述至少一种捕获试剂和至少一种检测试剂由用户加入所述系统中。 89.权利要求52-88的测定体系，其中所述测定容纳在盒内。 90.权利要求52-89的测定体系，其中所述捕获试剂和检测试剂对于所述蛋白质具有约10-10或更小的Kd。 91.权利要求52-89的测定体系，其中所述捕获试剂和检测试剂对于所述蛋白质具有约10-8Kd或更小的Kd。 92.权利要求52-89的测定体系，其中所述捕获试剂和检测试剂对于所述蛋白质具有约10-6Kd或更小的Kd。 93.权利要求52-92的测定体系，其中所述测定允许至少约90％或更高的准确度。 94.权利要求52-92的测定体系，其中所述测定允许至少约98％或更高的准确度。 95.权利要求52-92的测定体系，其中所述测定是横向流测定。 96.权利要求52-92的测定体系，其中所述测定是垂直流测定。 97.权利要求52-92的测定体系，其中检测并不需要检测装置。 98.一种用于检测样品中的至少一种靶分析物的方法，其包括(i)提供样品，(ii)任选地，处理所述样品；(iii)将所述样品加入权利要求1-51的系统或权利要求52-97的测定体系中；并且(iv)如果存在至少一种靶分析物，则检测所述靶分析物。 99.权利要求98的方法，其进一步包括将所述结果传输给第三方，用于审查和任选的进一步行动。 100.权利要求98的方法，其中所述进一步行动包括诊断患病或健康或健康状态。 101.权利要求100的方法，其中所述进一步行动包括诊断患病状态，并且任选地施用至少一种治疗剂。 102.权利要求101的方法，其中所述进一步行动包括诊断疾病状态，并且任选地中断至少一种治疗剂的施用或调整所述至少一种治疗剂的剂量。 103.权利要求98-102的方法，其中(ii)中的所述处理包括稀释所述样品。 104.权利要求93-102的方法，其中(ii)中的所述处理包括在(iii)中将样品加入系统或测定中之前，将一种或多种捕获试剂、检测试剂或第二结合试剂或底物加入所述样品中。 105.一种试剂盒，其中所述试剂盒包含权利要求1-51的系统的一个或多个部件以及任选的使用说明书。 106.一种试剂盒，其包含权利要求52-97的测定体系的一种或多种组分以及任选的使用说明书。 107.一种血糖计或计时电流计，其配置用于读取免疫测定的结果。 108.权利要求107的计时电流计，其中所述计时电流计利用改良计时电流方法。