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原文传递用于检测分析物或分类样本的方法和系统

专利名称：	用于检测分析物或分类样本的方法和系统
摘要：	本发明涉及用于检测样本中的一种或多种分析物和/或用于分类样本的方法和系统。具体来说，本发明涉及可用于实时检测分析物，且依赖于使一种或多种类型的传感器分子流过微流体装置的方法和系统，所述传感器分子各自包含结合一种或多种分析物的结构域、化学发光供体结构域和接受体结构域，其中在存在和/或不存在分析物下，所述化学发光供体结构域和所述接受体结构域的间隔和相对定向在+50％福斯特距离内。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	澳大利亚;AU
申请人：	联邦科学技术研究组织
发明人：	S·C·特罗威尔;H·戴克斯;N·C·H·黎;M·格尔;Y·朱;N·吴
专利状态：	有效
申请日期：	2013-04-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201811415964.7
公开号：	CN109991211A
代理机构：	永新专利商标代理有限公司
代理人：	左路;林晓红
分类号：	G01N21/76(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	澳大利亚澳大利亚首都领地
主权项：	1.一种传感器分子，包含蛋白酶可裂解结构域、化学发光供体结构域和接受体结构域，其中所述蛋白酶能够裂解乳蛋白，且其中当所述结构域被蛋白酶裂解时，所述化学发光供体结构域相对于所述接受体结构域的空间位置和/或偶极定向被改变。 2.权利要求1的传感器分子，其中所述蛋白酶至少部分地导致奶腐败。 3.权利要求1或2的传感器分子，其中所述蛋白酶是细菌蛋白酶。 4.权利要求1-3任一项的传感器分子，其中所述蛋白酶是纤维蛋白溶酶。 5.权利要求1-4任一项的传感器分子，其中所述结构域包含氨基酸序列KZ，其中Z是K、Y、V或E。 6.权利要求5的传感器分子，其中所述结构域包含氨基酸序列LQXXXXKZKLQ，其中Z是K、Y、V或E，而X是任意氨基酸。 7.权利要求1-6任一项的传感器分子，其中所述乳蛋白是酪蛋白。 8.权利要求1-7任一项的传感器分子，其中所述奶是超高温(UHT)加工的奶。 9.权利要求1-8任一项的传感器分子，其中在不存在所述蛋白酶下，所述化学发光供体结构域和所述接受体结构域的间隔和相对定向在±50％福斯特距离内。 10.权利要求1-9任一项的传感器分子，其中所述化学发光供体结构域是生物发光蛋白质。 11.权利要求10的传感器分子，其中所述生物发光蛋白质是荧光素酶、β-半乳糖苷酶、内酰胺酶、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-葡萄糖醛酸酶或β-葡萄糖苷酶。 12.权利要求11的传感器分子，其中所述荧光素酶是海肾荧光素酶、萤火虫荧光素酶、腔肠动物荧光素酶、北美萤火虫荧光素酶、叩头虫荧光素酶、苹绕实蝇荧光素酶、细菌荧光素酶、长腹水蚤荧光素酶、水母发光蛋白、蕈蚊荧光素酶或其任一个的生物活性变体或片段、或其两个或更多个的嵌合体。 13.权利要求1-12任一项的传感器分子，其中所述化学发光供体结构域能够修饰底物。 14.权利要求13的传感器分子，其中所述底物是荧光素、钙、腔肠素或腔肠素的衍生物或类似物。 15.权利要求1-14任一项的传感器分子，其中所述接受体结构域是荧光接受体结构域。 16.权利要求13-15任一项的传感器分子，其中 i)所述生物发光蛋白质是荧光素酶或生物活性变体或片段，和/或 ii)所述底物是荧光素、腔肠素或腔肠素的衍生物或类似物，和/或 iii)所述接受体结构域是绿色荧光蛋白(GFP)、Venus、mOrange或其任一个的生物活性变体或片段。 17.权利要求16的传感器分子，其中 i)所述荧光素酶是海肾荧光素酶，所述接受体结构域是GFP2，且所述底物是腔肠素400a， ii)所述荧光素酶是海肾荧光素酶2，所述接受体结构域是GFP2，且所述底物是腔肠素400a， iii)所述荧光素酶是海肾荧光素酶8，所述接受体结构域是GFP2，且所述底物是腔肠素400a， iv)所述荧光素酶是海肾荧光素酶2，所述接受体结构域是Venus，且所述底物是腔肠素， v)所述荧光素酶是海肾荧光素酶8，所述接受体结构域是Venus，且所述底物是腔肠素， vi)所述荧光素酶是海肾荧光素酶8.6-535，所述接受体结构域是mOrange，且所述底物是腔肠素，或 vii)所述荧光素酶是海肾荧光素酶8，所述接受体结构域是mOrange，且所述底物是腔肠素。 18.一种分类奶或乳酪的方法，所述方法包括 i)使权利要求1-17任一项的传感器分子、化学发光供体的底物和所述奶或所述乳酪混合，和 ii)检测所述化学发光供体对所述底物的修饰，其中当所述结构域被蛋白酶裂解时，所述化学发光供体结构域相对于所述接受体结构域的空间位置和/或偶极定向被改变。 19.一种分类奶或乳酪的方法，所述方法包括 i)使以下各物流过包含一个或多个微通道的微流体装置， a)所述奶或所述乳酪， b)包含蛋白酶可裂解结构域、化学发光供体结构域和接受体结构域的传感器分子，其中在不存在所述蛋白酶下，所述化学发光供体结构域和所述接受体结构域的间隔和相对定向在±50％福斯特距离内， c)所述化学发光供体的底物， ii)在所述装置中混合所述传感器分子、所述底物和所述奶或所述乳酪，和 iii)使用电光学感测装置检测所述化学发光供体对所述底物的修饰，其中当所述结构域被蛋白酶裂解时，所述化学发光供体结构域相对于所述接受体结构域的空间位置和/或偶极定向被改变。 20.权利要求19的方法，其中 a)所述传感器分子未固定于所述装置，和/或 b)所述方法还包括以比率计算所述化学发光供体结构域和所述接受体结构域之间出现的能量转移。 21.权利要求18-20任一项的方法，其用于评估所述奶或所述乳酪的质量和/或保存期限。
所属类别：	发明专利