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原文传递基于MnO2纳米片和7-羟基香豆素的ZEN双模式检测试剂盒和方法

专利名称：	基于MnO2纳米片和7-羟基香豆素的ZEN双模式检测试剂盒和方法
摘要：	本发明公开了基于MnO2纳米片和7‑羟基香豆素的ZEN双模式检测试剂盒和方法，所述检测试剂盒包括酶标板、ZEN抗原、ZEN单克隆抗体、碱性磷酸酶标记的IgG抗体以及底物混合液，所述底物混合液为包括MnO2纳米片、7‑羟基香豆素和抗坏血酸2‑磷酸钠盐的缓冲溶液；进一步利用该检测试剂盒建立了ZEN比色/荧光双模式免疫检测方法，具有操作简单，特异性好，准确度高等优点，为谷物中ZEN残留检测提供了一种新方法。
专利类型：	发明专利
申请人：	长江大学;中国农业科学院油料作物研究所
发明人：	周玉;杨华林;张国豪;李培武;张奇;张兴平;唐晓倩
专利状态：	有效
申请日期：	2023-07-04T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-03T00:00:00+0800
申请号：	CN202310812517.X
公开号：	CN116990524A
代理机构：	武汉集源知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	张凤楼
分类号：	G01N33/68;G01N33/58;G01N21/31;G01N21/64;G;G01;G01N;G01N33;G01N21;G01N33/68;G01N33/58;G01N21/31;G01N21/64
申请人地址：	434023 湖北省荆州市南环路1号;
主权项：	1.一种基于MnO2纳米片和7-羟基香豆素的ZEN双模式检测试剂盒，其特征在于，包括酶标板、ZEN抗原、ZEN单克隆抗体、碱性磷酸酶标记的IgG抗体以及底物混合液，所述底物混合液为包括MnO2纳米片、7-羟基香豆素和抗坏血酸2-磷酸钠盐的缓冲溶液。 2.根据权利要求1所述的ZEN双模式检测试剂盒，其特征在于，所述ZEN抗原为偶联有牛血清白蛋白的ZEN。 3.根据权利要求1所述的ZEN双模式检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲溶液为PBS缓冲液。 4.一种基于MnO2纳米片和7-羟基香豆素的ZEN双模式检测方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、将ZEN抗原包被在酶标板上； S2、将待测样品与ZEN单克隆抗体加入S1制备的酶标板中，孵育后洗涤拍干； S3、加入碱性磷酸酶标记的IgG抗体，孵育后洗涤拍干； S4、加入底物混合液孵育后，在360nm激发光下测量466nm处的荧光强度，并测量380nm下的吸光度； S5、根据荧光强度、吸光度和标准曲线计算待测样品中ZEN的浓度。 5.根据权利要求4所述的ZEN双模式检测方法，其特征在于，所述的标准曲线包括：以ZEN浓度为横坐标，ΔF为纵坐标的荧光法标准曲线；其中，ΔF为存在不同浓度ZEN时的荧光强度值与不存在ZEN时的荧光强度之差；以ZEN浓度为横坐标，ΔA为纵坐标的比色法标准曲线；其中，ΔA为存在不同浓度ZEN时的吸光度值与不存在ZEN时的吸光度值之差。 6.根据权利要求5所述的ZEN双模式检测方法，其特征在于，所述底物混合液为含有300μg/mLMnO2纳米片、50μM7-羟基香豆素和60mM抗坏血酸2-磷酸钠盐的20mM pH9.5 PBS缓冲溶液。 7.根据权利要求6所述的ZEN双模式检测方法，其特征在于，所述ZEN抗原的包被浓度为0.725μg/mL，所述ZEN单克隆抗体的浓度为6μg/mL。 8.根据权利要求7所述的ZEN双模式检测方法，其特征在于，步骤S4中所述底物混合液的孵育时间为10～20min。 9.根据权利要求4所述的ZEN双模式检测方法，其特征在于，所述待测样品的制备方法为：向ZEN污染的样品中加入甲醇-水溶液，超声提取后离心取上清液。