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1.一种地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)参照物溶液的制备:取地榆对照药材或长叶地榆对照药材加水提取,滤过,取续滤液,用乙酸乙酯萃取,合并乙酸乙酯液,蒸干;残渣加甲醇溶解,滤过,取续滤液,作为对照药材参照物溶液;另取没食子酸、没食子儿茶素、儿茶素、鞣花酸、2,3,8-三-O-甲基鞣花酸对照品加甲醇制成混合溶液,作为对照品参照物溶液; (2)供试品溶液的制备:取地榆或长叶地榆粉末,加入供试品提取溶剂,提取,滤过,取续滤液,用萃取溶剂萃取,合并萃取液蒸干;残渣加甲醇溶解,滤过,取续滤液,即得; (3)色谱条件:色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;二极管阵列检测器,检测波长为225~235nm;柱温25℃~35℃;流速0.28~0.32mL/min;以乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱; (4)采用超高液相色谱法检测参照物溶液与供试品溶液,获得对应色谱图,比较参照物溶液和供试品溶液对应的图谱,得到所述地榆和长叶地榆药材特征图谱。 2.根据权利要求1所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述步骤(1)中,参照物溶液的制备:取地榆对照药材或长叶地榆对照药材加水,对照药材与水比例为0.2g:25~100mL,加热回流或超声提取20~40min,滤过,取续滤液,用乙酸乙酯振摇提取2~3次,合并乙酸乙酯液,蒸干;残渣加75%甲醇溶解,取续滤液,作为对照药材参照物溶液;另取没食子酸、没食子儿茶素、儿茶素、鞣花酸、2,3,8-三-O-甲基鞣花酸对照品适量,加50%甲醇制成每1ml各含35~45μg的混合溶液,作为对照品参照物溶液。 3.根据权利要求1所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述步骤(2)中,供试品提取溶剂为水或30%~100%甲醇,地榆或长叶地榆粉末与供试品提取溶剂的比例为0.2g:25~100mL;萃取溶剂为水饱和正丁醇或乙酸乙酯,提取方式为回流提取或超声提取,提取时间为15~60min,萃取次数为1~3次。 4.根据权利要求3所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述步骤(2)中,供试品提取溶剂为水,地榆或长叶地榆粉末与供试品提取溶剂的比例为0.2g:25mL;萃取溶剂为乙酸乙酯,提取方式为超声提取,提取时间为30min,萃取次数为2次。 5.根据权利要求1所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述梯度洗脱为: 0~15min,A相:2%→10%,B相:98%→90%; 15~30min,A相:10%→20%,B相:90%→80%; 30~35min,A相:20%→35%,B相:80%→65%; 35~45min,A相:35%→45%,B相:65%→55%。 6.根据权利要求1所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述色谱柱柱长为100mm,内径为2.1mm,粒径为1.8μm;检测波长230nm,柱温30℃,流速0.3ml/min;理论板数按鞣花酸峰计算应不低于10000。 7.根据权利要求1所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述的供试品色谱图中应呈现7~8个特征峰,并应与对照药材参照物色谱中的特征峰保留时间相对应,其中峰1、峰2、峰4、峰6、峰8应与没食子酸、没食子儿茶素、儿茶素、鞣花酸、2,3,8-三-O-甲基鞣花酸对照品参照物峰保留时间相对应。 8.根据权利要求7所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,与鞣花酸参照物峰相对应的峰为S峰,计算峰3、峰5、峰7与S峰的相对保留时间,其相对保留时间应在规定值的±10%范围之内,规定值为峰3-0.48、峰5-0.85、峰7-1.32。 9.根据权利要求8所述的地榆和长叶地榆药材特征图谱构建方法,其特征在于,所述地榆药材对应的峰8与峰6的相对峰面积为0.060~0.230;所述长叶地榆药材对应的峰8与峰6的相对峰面积为0~0.057。 10.一种地榆和长叶地榆药材的特征图谱鉴别方法,其特征在于,采用权利要求1~9任一项所述的方法进行检测,分析检测结果。 |