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原文传递红细胞脱核的分子标记物及其用途

专利名称：	红细胞脱核的分子标记物及其用途
摘要：	本申请涉及红细胞脱核的分子标记物及其用途。具体而言，本申请提供了一种鉴定或分选正在脱核的红细胞的方法，通过对CD44、CD235a或Ter119、CD45等标记物的检测，而特异性地识别正在脱核的红细胞。
专利类型：	发明专利
申请人：	中国医学科学院基础医学研究所;细胞生态海河实验室
发明人：	吕湘;刘雪会;张莹莹;余东林;杨冉;王佳鑫
专利状态：	有效
申请日期：	2022-04-27T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-07T00:00:00+0800
申请号：	CN202210452895.7
公开号：	CN117007796A
代理机构：	北京戈程知识产权代理有限公司
代理人：	程伟;程云
分类号：	G01N33/569;G01N33/68;C12Q1/6881;C12N5/078;G;C;G01;C12;G01N;C12Q;C12N;G01N33;C12Q1;C12N5;G01N33/569;G01N33/68;C12Q1/6881;C12N5/078
申请人地址：	100005 北京市东城区东单三条5号;
主权项：	1.靶向CD45的试剂在制备检测装置中的用途，其中：所述检测装置是试剂盒或芯片的形式；所述检测装置用于确定红系细胞的脱核状态，所述脱核状态选自以下的任一项：脱核准备、正在脱核、已脱核；所述靶向CD45的试剂是指确定CD45是否存在或确定CD45水平的试剂；所述靶向CD45的试剂选自以下的任一项：抗CD45抗体或其抗原结合片段、靶向CD45的引物、靶向CD45的探针；所述红系细胞分离自体内、或来自体外培养物；优选地，所述正在脱核选自以下的任一项：脱核早期、脱核晚期；所述CD45是指人CD45。 2.根据权利要求1所述的用途，其中：当红系细胞呈现CD45阳性时，判定所述红系细胞处于正在脱核的状态、或判定所述红系细胞处于正在脱核状态的比例统计学上显著提高；当红系细胞呈现CD45阴性时，判定所述红系细胞处于脱核准备、或者处于正在脱核状态的比例统计学上显著降低。 3.根据权利要求1或2所述的用途，其中：所述检测装置还包含靶向CD235a或Ter119的试剂；所述靶向CD235a或Ter119的试剂是指确定CD235a或Ter119是否存在或确定CD235a或Ter119水平的试剂；所述靶向CD235a或Ter119的试剂选自以下的任一项：抗CD235a或Ter119抗体或其抗原结合片段、靶向CD235a或Ter119的引物、靶向CD235a或Ter119的探针。 4.根据权利要求3所述的用途，其中：当红系细胞呈现CD235a阳性或Ter119阳性以及CD45阳性时，判定所述红系细胞处于正在脱核的状态、或判定所述红系细胞处于正在脱核状态的比例统计学上显著提高；或者当CD235a和CD45共定位、或Ter119和CD45共定位于红系细胞的表面时，判定所述红系细胞处于正在脱核的状态、或判定所述红系细胞处于正在脱核状态的比例统计学上显著提高。 5.根据权利要求1或3所述的用途，其中：所述检测装置还包含靶向CD44的试剂；所述靶向CD44的试剂是指确定CD44是否存在或确定CD44水平的试剂；所述靶向CD44的试剂选自以下的任一项：抗CD44抗体或其抗原结合片段、靶向CD44的引物、靶向CD44的探针。 6.根据权利要求5所述的用途，其中：当CD44和CD45共定位于脱出的细胞核表面时，判定所述红系细胞已脱核、或判定所述红系细胞的脱核率统计学上显著提高。 7.根据权利要求1至6中任一项所述的用途，其中：所述检测装置还包含靶向以下任一项的试剂或其组合：血红蛋白、ApoE、Vcam1、C1qa、C1qb、C1qc、Ly6D、Ighm、Igkc、Cd79a、CD79b、Ebf1、Pax5、Lef1、Elane、S100A8/A9、Prtn3、Cebpb、Lyz2、S100a4、Lgals3；优选地，当红系细胞在RNA水平上高表达血红蛋白、ApoE、Vcam1、C1qa、C1qb、C1qc，且在蛋白水平上呈现CD44和CD45阳性时，判定所述红系细胞处于脱核晚期的状态、或判定所述红系细胞处于脱核晚期的状态的比例统计学上显著提高；优选地，当红系细胞在RNA水平上高表达Ly6D、Ighm、Igkc、Cd79a、CD79b、Ebf1、Pax5、Lef1、Elane、S100A8/A9、Prtn3、Cebpb、Lyz2、S100a4、Lgals3中的一种或多种，且在蛋白水平上呈现CD44阳性、CD235a阳性或Ter119阳性、CD45阴性时，判定所述红系细胞具有显著增高的脱核潜能。 8.根据权利要求1至7中任一项所述的用途，其中：所述确定是在RNA水平或蛋白水平的确定；所述抗体源自以下的任一项：鼠、兔、人、骆驼、犬、羊、马、重组表达的抗体；优选地，所述抗体是单克隆抗体或多克隆抗体；优选地，所述抗原结合片段选自以下的任一项：Fab、Fab′、F(ab′)2、Fv片段、单链抗体、结构域抗体、多特异性抗体。 9.一种在体外富集正在脱核的红系细胞的方法，包括步骤： 1)在体外提供红系细胞， 2)使所述红系细胞接触靶向CD45的试剂， 3)分选CD45阳性的红系细胞，优选通过流式细胞术分选；其中：所述靶向CD45的试剂是指确定CD45是否存在或确定CD45水平的试剂；所述靶向CD45的试剂选自以下的任一项：抗CD45抗体或其抗原结合片段、靶向CD45的引物、靶向CD45的探针；所述红系细胞分离自体内、或来自体外培养物；所述CD45是指人CD45；所述方法不用于疾病的诊断或治疗。 10.根据权利要求9所述的方法，其中： 1)在体外提供红系细胞， 2.1)使所述红系细胞接触靶向CD45的试剂， 2.2)任选地，使所述红系细胞接触靶向CD44的试剂， 2.3)任选地，使所述红系细胞接触靶向CD235a或Ter119的试剂，3)分选CD45阳性、任选CD44阳性、任选CD235a或Ter119阳性的红系细胞；步骤2.1)、2.2)、2.3)可以按照任意顺序先后或同时进行；所述靶向CD44的试剂是指确定CD44是否存在或确定CD44水平的试剂；所述靶向CD44的试剂选自以下的任一项：抗CD44抗体或其抗原结合片段、靶向CD44的引物、靶向CD44的探针；所述靶向CD235a或Ter119的试剂是指确定CD235a或Ter119是否存在或确定CD235a或Ter119水平的试剂；所述靶向CD235a或Ter119的试剂选自以下的任一项：抗CD235a或Ter119抗体或其抗原结合片段、靶向CD235a或Ter119的引物、靶向CD235a或Ter119的探针；所述确定是在RNA水平或蛋白水平的确定。
所属类别：	发明专利