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原文传递 用于检测肾癌的血液中生物标记物及其用途
专利名称: 用于检测肾癌的血液中生物标记物及其用途
摘要: 本发明提供了一种用于检测肾癌的血液中生物标记物及其用途。所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱‑脉冲安培法得到的岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。本发明的技术方案具有降解快速、批通量、兼容性、酸用量少、操作步骤简单易学,并且具有灵敏度高、准确性好等优点。所得结果显示此降解分析方法可以快速降解血样,分析血样中的单糖组成,并可以计算得到其单糖浓度,根据其浓度可以在一定程度上区分未患肾癌人群和肾癌患者。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 山东;37
申请人: 青岛大学附属医院
发明人: 张丽娟;何燕利
专利状态: 有效
申请日期: 2018-04-04T00:00:00+0800
发布日期: 2019-10-18T00:00:00+0800
申请号: CN201810298212.0
公开号: CN110346499A
代理机构: 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 王晓晓
分类号: G01N30/96(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址: 266000 山东省青岛市市南区江苏路16号
主权项: 1.用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法得到的岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。 2.根据权利要求1所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物岩藻糖的浓度为76.97 μmol/L以上,是未患肾癌人群岩藻糖浓度的1.38倍以上;生物标记物葡萄糖胺的浓度为2870 μmol/L以上,是未患肾癌人群葡萄糖胺浓度的1.21倍以上;生物标记物半乳糖的浓度为1804 μmol/L以上,是未患肾癌人群半乳糖浓度的1.42倍以上;生物标记物葡萄糖的浓度为2922 μmol/L,是未患肾癌人群葡萄糖浓度的1.20倍以上;生物标记物甘露糖的浓度为1136 μmol/L,是未患肾癌人群甘露糖浓度的1.85倍以上。 3.根据权利要求2所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物岩藻糖浓度为108.5±34.61 μmol/L、葡萄糖胺浓度为3412±784.0 μmol/L、半乳糖浓度为1672±587.1 μmol/L、葡萄糖浓度为3350±675.4 μmol/L、甘露糖浓度为1821±571.6μmol/L; 未患肾癌人群中岩藻糖浓度为78.48±47.09 μmol/L、葡萄糖胺浓度为2830±556.1 μmol/L、半乳糖浓度为1176±386.1 μmol/L、葡萄糖浓度为2781±955.6 μmol/L、甘露糖浓度为986.2±402.6 μmol/L。 4.根据权利要求1所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述的微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法包括以下具体步骤: (1) 取待检测的血液或血浆样品至微波水解管,加入水,混匀后再加入HCl得到溶解液; (2) 将所述溶解液使用单模微波蛋白水解仪进行微波酸水解; (3) 微波酸水解后的样品用水转移到离心管中,离心浓缩除酸; (4) 然后向离心后的样品中添加甲醇,离心浓缩除残留HCl; (5) 将离心后的干燥样品用水溶解,离心取上清液; (6) 将所述上清液用于阴离子交换色谱分析; (7) 绘制岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的标准曲线; (8) 将步骤(6)得到的色谱图与步骤(5)中的标准曲线比对并分析计算,确定岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的浓度。 5.根据权利要求4所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(1)中血液样品选用2 μL。 6.根据权利要求4所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(1)中HCl的浓度为3 mol/L。 7.根据权利要求4所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(2)中微波酸水解的条件为功率80 w -100 w,温度80 ℃-100 ℃,水解时间是5 min -15min。 8.根据权利要求7所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述微波酸水解的条件为功率100 w、温度100 ℃、水解时间为10 min。 9.根据权利要求1所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(6)中的色谱条件为: 分析柱:Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10,4.0 mm×250 mm; 保护柱:Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10,4.0 mm×50 mm; 淋洗液:0-18 min 使用18 mM NaOH; 流速:1.0 mL/min,进样体积:10 μL,柱温:30 ℃, 检测器:电化学检测器,金电极,标准糖电位,运行时间:18 min。 10.权利要求1所述的生物标记物在制备用于检测肾癌的试剂中的用途,其特征在于:所述试剂中包括浓度为108.5±34.61 μmol/L的岩藻糖、浓度为3412±784.0 μmol/L的葡萄糖胺、浓度为1672±587.1 μmol/L的半乳糖、浓度为3350±675.4 μmol/L的葡萄糖和浓度为1821±571.6 μmol/L的甘露糖的标准液。
所属类别: 发明专利
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