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原文传递用于检测肾癌的血液中生物标记物及其用途

专利名称：	用于检测肾癌的血液中生物标记物及其用途
摘要：	本发明提供了一种用于检测肾癌的血液中生物标记物及其用途。所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱‑脉冲安培法得到的岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。本发明的技术方案具有降解快速、批通量、兼容性、酸用量少、操作步骤简单易学，并且具有灵敏度高、准确性好等优点。所得结果显示此降解分析方法可以快速降解血样，分析血样中的单糖组成，并可以计算得到其单糖浓度，根据其浓度可以在一定程度上区分未患肾癌人群和肾癌患者。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛大学附属医院
发明人：	张丽娟;何燕利
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201810298212.0
公开号：	CN110346499A
代理机构：	青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	王晓晓
分类号：	G01N30/96(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	266000 山东省青岛市市南区江苏路16号
主权项：	1.用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法得到的岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖。 2.根据权利要求1所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述生物标记物岩藻糖的浓度为76.97 μmol/L以上，是未患肾癌人群岩藻糖浓度的1.38倍以上；生物标记物葡萄糖胺的浓度为2870 μmol/L以上，是未患肾癌人群葡萄糖胺浓度的1.21倍以上；生物标记物半乳糖的浓度为1804 μmol/L以上，是未患肾癌人群半乳糖浓度的1.42倍以上；生物标记物葡萄糖的浓度为2922 μmol/L，是未患肾癌人群葡萄糖浓度的1.20倍以上；生物标记物甘露糖的浓度为1136 μmol/L，是未患肾癌人群甘露糖浓度的1.85倍以上。 3.根据权利要求2所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述生物标记物岩藻糖浓度为108.5±34.61 μmol/L、葡萄糖胺浓度为3412±784.0 μmol/L、半乳糖浓度为1672±587.1 μmol/L、葡萄糖浓度为3350±675.4 μmol/L、甘露糖浓度为1821±571.6μmol/L；未患肾癌人群中岩藻糖浓度为78.48±47.09 μmol/L、葡萄糖胺浓度为2830±556.1 μmol/L、半乳糖浓度为1176±386.1 μmol/L、葡萄糖浓度为2781±955.6 μmol/L、甘露糖浓度为986.2±402.6 μmol/L。 4.根据权利要求1所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述的微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法包括以下具体步骤： (1) 取待检测的血液或血浆样品至微波水解管，加入水，混匀后再加入HCl得到溶解液； (2) 将所述溶解液使用单模微波蛋白水解仪进行微波酸水解； (3) 微波酸水解后的样品用水转移到离心管中，离心浓缩除酸； (4) 然后向离心后的样品中添加甲醇，离心浓缩除残留HCl； (5) 将离心后的干燥样品用水溶解，离心取上清液； (6) 将所述上清液用于阴离子交换色谱分析； (7) 绘制岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的标准曲线； (8) 将步骤(6)得到的色谱图与步骤(5)中的标准曲线比对并分析计算，确定岩藻糖、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的浓度。 5.根据权利要求4所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述步骤(1)中血液样品选用2 μL。 6.根据权利要求4所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述步骤(1)中HCl的浓度为3 mol/L。 7.根据权利要求4所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述步骤(2)中微波酸水解的条件为功率80 w -100 w，温度80 ℃-100 ℃，水解时间是5 min -15min。 8.根据权利要求7所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述微波酸水解的条件为功率100 w、温度100 ℃、水解时间为10 min。 9.根据权利要求1所述的用于检测肾癌的血液中生物标记物，其特征在于：所述步骤(6)中的色谱条件为：分析柱：Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10，4.0 mm×250 mm；保护柱：Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10，4.0 mm×50 mm；淋洗液：0-18 min 使用18 mM NaOH；流速：1.0 mL/min，进样体积：10 μL，柱温：30 ℃，检测器：电化学检测器，金电极，标准糖电位，运行时间：18 min。 10.权利要求1所述的生物标记物在制备用于检测肾癌的试剂中的用途，其特征在于：所述试剂中包括浓度为108.5±34.61 μmol/L的岩藻糖、浓度为3412±784.0 μmol/L的葡萄糖胺、浓度为1672±587.1 μmol/L的半乳糖、浓度为3350±675.4 μmol/L的葡萄糖和浓度为1821±571.6 μmol/L的甘露糖的标准液。
所属类别：	发明专利