主权项: |
1.用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法得到的岩藻糖、半乳糖胺、葡萄糖胺和甘露糖。 2.根据权利要求1所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于: 所述生物标记物岩藻糖的浓度为72.20 μmol/L以上,是未患肾炎人群岩藻糖浓度的1.32倍以上;生物标记物半乳糖胺的浓度为125.8 μmol/L以上,是未患肾炎人群半乳糖胺浓度的1.25倍以上;生物标记物葡萄糖胺的浓度为2778 μmol/L以上,是未患肾炎人群葡萄糖胺浓度的1.13倍以上;生物标记物甘露糖的浓度为969.1 μmol/L以上,是未患肾炎人群甘露糖浓度的1.33倍以上。 3.根据权利要求2所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物岩藻糖浓度为103.8±3.20 μmol/L、半乳糖胺浓度为175.0±57.93 μmol/L、葡萄糖胺浓度为3204±678.9 μmol/L、甘露糖浓度为1311±564.0 μmol/L; 未患肾炎人群中岩藻糖浓度为78.48±47.09 μmol/L、半乳糖胺浓度为140.2±45.15μmol/L、葡萄糖胺浓度为2830±556.1 μmol/L、甘露糖浓度为986.2±402.6 μmol/L。 4.根据权利要求1所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述的微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法包括以下具体步骤: (1) 取待检测的血液或血浆样品至微波水解管,加入水,混匀后再加入HCl得到溶解液; (2) 将所述溶解液使用单模微波蛋白水解仪进行微波酸水解; (3) 微波酸水解后的样品用水转移到离心管中,离心浓缩除酸; (4) 然后向离心后的样品中添加加甲醇,离心浓缩除残留HCl; (5) 将离心后的干燥样品用水溶解,离心取上清液; (6) 将所述上清液用于阴离子交换色谱分析; (7) 制备岩藻糖、半乳糖胺、葡萄糖胺和甘露糖的标准曲线; (8) 将步骤(6)得到的色谱图与步骤(5)中的标准曲线比对并分析计算,确定岩藻糖、半乳糖胺、葡萄糖胺和甘露糖的浓度。 5.根据权利要求4所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(1)中血液样品选用2 μL。 6.根据权利要求4所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(1)中HCl的浓度为3 mol/L。 7.根据权利要求4所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(2)中微波酸水解的条件为功率80 w-100 w,温度80 ℃-100 ℃,水解时间是5 min-15min。 8.根据权利要求7所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述微波酸水解的条件为功率100 w、温度100 ℃、水解时间10 min。 9.根据权利要求1所述的用于检测肾炎的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(6)中的色谱条件为: 分析柱:Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10, 4.0 mm×250 mm; 保护柱:Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10, 4.0 mm×50 mm; 淋洗液:0-18 min 使用18 mM NaOH; 流速:1.0 mL/min,进样体积:10 μL,柱温:30 ℃, 检测器:电化学检测器,金电极,标准糖电位,运行时间:18 min。 10.权利要求1所述的生物标记物在制备用于检测肾炎的试剂中的用途,其特征在于:所述试剂中包括浓度为103.8±3.20 μmol/L的岩藻糖、浓度为175.0±57.93 μmol/L的半乳糖胺、浓度为3204±678.9 μmol/L的葡萄糖胺和浓度为1311±564.0 μmol/L的甘露糖的标准液。 |