专利名称: |
用于检测尿毒症的血液中生物标记物及其用途 |
摘要: |
本发明提供了一种用于检测尿毒症的血液中生物标记物及其用途。所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱‑脉冲安培法得到的半乳糖胺和葡萄糖胺。本发明的技术方案具有降解快速、批通量、兼容性、酸用量少、操作步骤简单易学,并且具有灵敏度高、准确性好等优点。所得结果显示此降解分析方法可以快速降解血样,分析血样中的单糖组成,并可以计算得到其单糖浓度,根据其浓度可以在一定程度上区分未患尿毒症人群和尿毒症患者。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
山东;37 |
申请人: |
青岛大学附属医院 |
发明人: |
张丽娟;何燕利 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2018-04-04T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-10-18T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201810298228.1 |
公开号: |
CN110346501A |
代理机构: |
青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) |
代理人: |
王晓晓 |
分类号: |
G01N30/96(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
申请人地址: |
266000 山东省青岛市市南区江苏路16号 |
主权项: |
1.用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物为血液经过微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法得到的半乳糖胺和葡萄糖胺。 2.根据权利要求1所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述生物标记物半乳糖胺的浓度为146.4 μmol/L以上,是未患尿毒症人群中的半乳糖胺浓度的1.35倍以上;生物标记物葡萄糖胺的浓度为2837 μmol/L以上,是未患尿毒症人群葡萄糖胺浓度的1.13倍以上。 3.根据权利要求2所述的用于检测尿毒症的血液中的生物标记物,其特征在于:所述生物标记物半乳糖胺浓度为189.7±46.53 μmol/L、葡萄糖胺浓度为3194±683.6 μmol/L;未患尿毒症人群中半乳糖胺浓度为140.2±45.15 μmol/L、葡萄糖胺浓度为2830±556.1 μmol/L。 4.根据权利要求1所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述的微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法包括以下具体步骤: (1) 取待检测的血液或血浆样品至微波水解管,加入水,混匀后再加入HCl得到溶解液; (2) 将所述溶解液使用单模微波蛋白水解仪进行微波酸水解; (3) 微波酸水解后的样品用水转移到离心管中,离心浓缩除酸; (4) 然后向离心后的样品中添加加甲醇,离心浓缩除残留HCl; (5) 将离心后的干燥样品用水溶解,离心取上清液; (6) 将所述上清液用于阴离子交换色谱分析; (7) 绘制半乳糖胺和葡萄糖胺的标准曲线; (8) 将步骤(6)得到的色谱图与步骤(5)中的标准曲线比对并分析计算,确定半乳糖胺和葡萄糖胺的浓度。 5.根据权利要求4所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(1)中血液样品选用2 μL。 6.根据权利要求4所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(1)中HCl的浓度为3 mol/L。 7.根据权利要求4所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(2)中微波酸水解的条件为功率80 w -100 w、温度80 ℃-100 ℃、水解时间5 min -15min。 8.根据权利要求7所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述微波酸水解的条件为功率100 w、温度100 ℃、水解时间10 min。 9.根据权利要求1所述的用于检测尿毒症的血液中生物标记物,其特征在于:所述步骤(6)中的色谱条件为: 分析柱:Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10,4.0 mm×250 mm; 保护柱:Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10,4.0 mm×50 mm; 淋洗液:0-18 min 使用18 mM NaOH; 流速:1.0 mL/min,进样体积:10 μL,柱温:30 ℃, 检测器:电化学检测器,金电极,标准糖电位,运行时间:18 min。 10.权利要求1所述的生物标记物在制备用于检测尿毒症的试剂中的用途,其特征在于:所述试剂中包括浓度为189.7±46.53 μmol/L的半乳糖胺和浓度为3194±683.6 μmol/L的葡萄糖胺的标准液。 |
所属类别: |
发明专利 |