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原文传递一种不同采收期南阳艾的质量评价方法及其应用

专利名称：	一种不同采收期南阳艾的质量评价方法及其应用
摘要：	本发明涉及不同采收期南阳艾的质量评价方法及其应用，有效解决快速对不同采收期南阳艾做出质量评价，同时区分艾叶不同采收期的问题，收集南阳5月的一茬艾叶、8月的二茬艾叶和11月的三茬艾叶，提取艾叶挥发油，GC‑MS检测出艾叶挥发油55个挥发性化学成分，对共有成分桉油精、α‑蒎烯、β‑蒎烯、水芹烯、侧柏酮、柠檬烯、β‑石竹烯、龙脑和樟脑进行含量测定，获得不同采收期南阳艾共有化学成分含量；利用HPLC构建不同采收期南阳艾非挥发性指纹图谱，确定了13个共有峰及相对峰面积，将55个艾叶挥发性化学成分的相对含量和非挥发性指纹图谱共有峰峰面积作为数据，筛选出艾叶挥发性和非挥发性显著差异性成分，实现对南阳艾质量评价及不同采收期艾叶的区分。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	河南中医药大学
发明人：	马蕊;陈随清;桂新景;练从龙;张宝;薛淑娟;朱晔
专利状态：	有效
申请日期：	2023-07-28T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202310941187.4
公开号：	CN117054573A
代理机构：	郑州天阳专利事务所(普通合伙)
代理人：	聂孟民
分类号：	G01N30/06;G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/88
申请人地址：	450046 河南省郑州市郑东新区金水东路156号
主权项：	1.一种不同采收期南阳艾的质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取艾叶挥发油：收集南阳不同采收时期的艾叶，所述不同采收时期的艾叶为5月的一茬艾叶、8月的二茬艾叶和11月的三茬艾叶，分别采用水蒸气蒸馏法提取艾叶挥发油；（2）挥发油化学成分分析及共有成分含量测定：采用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）检测出艾叶挥发油55个挥发性化学成分，对其中主要的9个共有成分桉油精、α-蒎烯、β-蒎烯、水芹烯、侧柏酮、柠檬烯、β-石竹烯、龙脑和樟脑进行含量测定，获得不同采收期南阳艾共有化学成分含量；（3）利用HPLC构建不同采收期南阳艾非挥发性指纹图谱，确定了13个共有峰及相对峰面积，不同采收期样品图谱的相似度在0.9以下；（4）质量评价和区分：将GC-MS测得的55个艾叶挥发性化学成分的相对含量和HPLC构建的非挥发性指纹图谱共有峰峰面积作为数据，分别进行主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）和单因素方差分析筛选出艾叶挥发性和非挥发性显著差异性成分，实现对南阳艾全面的质量评价及不同采收期艾叶的区分。 2.根据权利要求1所述的不同采收期南阳艾的质量评价方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取艾叶挥发油：收集南阳不同采收时期的艾叶，所述不同采收时期的艾叶为5月的一茬艾叶、8月的二茬艾叶和11月的三茬艾叶，分别采用水蒸气蒸馏法提取艾叶挥发油；所述的水蒸气蒸馏法是指将含有挥发性成分的艾叶与水共蒸馏，使挥发性成分随水蒸气一并馏出，经冷凝分取挥发性成分的浸提方法，公知技术；（2）挥发油化学成分分析及共有成分含量测定：采用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）检测出艾叶挥发油55个挥发性化学成分，对其中主要的9个共有成分桉油精、α-蒎烯、β-蒎烯、水芹烯、侧柏酮、柠檬烯、β-石竹烯、龙脑和樟脑进行含量测定，获得不同采收期南阳艾共有化学成分含量；气相色谱条件为：TG-5MS毛细管柱，30m×0.25mm×0.25µm；程序升温：柱初始温度50℃，以5℃·min-1的速率升至85℃，保持3min；以2℃·min-1的速率升至100℃；以4℃·min-1的速率升至200℃；以20℃·min-1的速率升至300℃，保持5min；进样口温度为250℃，载气：He，载气流速1mL·min-1；分流进样，进样量为1.0µL，分流比为10:1，分流流速为10mL·min-1；质谱条件为电离方式：EI，电子能量：70eV；离子源温度为250℃，传输线温度为250℃，扫描方式为全扫描，检测范围40～400m/z；溶剂延迟3min；（3）利用HPLC构建不同采收期南阳艾非挥发性指纹图谱，确定了13个共有峰及相对峰面积，不同采收期样品图谱的相似度在0.9以下； HPLC指纹图谱分析方法条件为：Waters Symmetry C18，5μm，4.6×250mm液相色谱柱；流动相为质量浓度0.1%甲酸水溶液（A）和乙腈（B）；流速1.0mL·min-1；柱温35℃；检测波长340nm；采用梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，85%流动相A，15%流动相B；10～22min，85%～78%流动相A，15%～22%流动相B；22～25min，78%流动相A，22%流动相B；25～35min，78%～69%流动相A，22%～31%流动相B；35～55min，69%～55%流动相A，31%～45%流动相B；55～70min，55%～40%流动相A，45%～60%流动相B；70～80min，40%～85%流动相A，60%～15%流动相B；（4）质量评价和区分：将GC-MS测得的55个艾叶挥发性化学成分的相对含量和HPLC构建的非挥发性指纹图谱共有峰峰面积作为数据，分别进行主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）和单因素方差分析筛选出艾叶挥发性和非挥发性显著差异性成分，设贡献值（VIP）＞1，单因素方差分析P＜0.05，实现对南阳艾全面的质量评价及不同采收期艾叶的区分；所述的挥发性显著差异性成分为β-石竹稀、视黄醇、萜品烯-4-醇、香树烯、艾醇、蒿酮、1-辛烯-3-醇、α-松油醇和ρ-对伞花烃，共9个，区别于共有成分的9个挥发性成分；非挥发性显著差异性成分为芹菜素、新绿原酸、绿原酸和柚皮苷，共4个。 3.根据权利要求2所述的不同采收期南阳艾的质量评价方法，其特征在于，所述的HPLC指纹图谱分析方法条件为：Waters Symmetry C18，5μm，4.6×250mm液相色谱柱；流动相为质量浓度0.1%甲酸水溶液（A）和乙腈（B）；流速1.0mL·min-1；柱温35℃；检测波长340nm；采用梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，85%流动相A，15%流动相B；10～22min，80%流动相A，20%流动相B；22～25min，78%流动相A，22%流动相B；25～35min，75%流动相A，25%流动相B；35～55min，60%流动相A，40%流动相B；55～70min，50%流动相A，50%流动相B；70～80min，45%流动相A，55%流动相B。 4.根据权利要求2所述的不同采收期南阳艾的质量评价方法，其特征在于，所述的HPLC指纹图谱分析方法条件为：Waters Symmetry C18，5μm，4.6×250mm液相色谱柱；流动相为质量浓度0.1%甲酸水溶液（A）和乙腈（B）；流速1.0mL·min-1；柱温35℃；检测波长340nm；采用梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，85%流动相A，15%流动相B；10～22min，82%流动相A，18%流动相B；22～25min，78%流动相A，22%流动相B；25～35min，77%流动相A，23%流动相B；35～55min，65%流动相A，35%流动相B；55～70min，53%流动相A，47%流动相B；70～80min，50%流动相A，50%流动相B。 5.根据权利要求2所述的不同采收期南阳艾的质量评价方法，其特征在于，所述的HPLC指纹图谱分析方法条件为：Waters Symmetry C18，5μm，4.6×250mm液相色谱柱；流动相为质量浓度0.1%甲酸水溶液（A）和乙腈（B）；流速1.0mL·min-1；柱温35℃；检测波长340nm；采用梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，85%流动相A，15%流动相B；10～22min，84%流动相A，16%流动相B；22～25min，78%流动相A，22%流动相B；25～35min，70%流动相A，30%流动相B；35～55min，57%流动相A，43%流动相B；55～70min，42%流动相A，58%流动相B；70～80min，80%流动相A，20%流动相B。 6.权利要求1-5任一项所述的方法在鉴定艾叶质量及区分不同采收期艾叶中的应用。
所属类别：	发明专利