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原文传递一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法

专利名称：	一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法
摘要：	本发明涉及药物筛选与评价方法技术领域，具体地说，涉及一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法；包括以下步骤：S1、建立患有DIC的斑马鱼模型，并获取该模型的心脏跳动图像；S2、根据心脏跳动图像分析该斑马鱼模型的心功能参数；S3、将化合物作用于上述斑马鱼模型中，筛选阳性化合物；S4、通过进行是否影响阿霉素抗癌性的验证来对阳性化合物进一步地筛选；整个筛选和评价方法不仅具有快速、经济、高通量、高内涵的特点，而且筛选和评价结果更为全面严谨，筛选得到的阳性化合物可以有效地减弱Dox诱导的心脏细胞损伤，同时不影响Dox的抗肿瘤活性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江大学
发明人：	赵璐;王毅;张舒静
专利状态：	有效
申请日期：	2023-06-06T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-07T00:00:00+0800
申请号：	CN202310666575.6
公开号：	CN117007756A
代理机构：	北京精金石知识产权代理有限公司
代理人：	朱宝莉
分类号：	G01N33/15;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/15
申请人地址：	310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号浙江大学紫金港校区药学院309室
主权项：	1.一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、建立患有DIC的斑马鱼模型，并获取该模型的心脏跳动图像； S2、根据心脏跳动图像分析该斑马鱼模型的心功能参数，所述心功能参数具体包括心包水肿率、心率、舒张末期心室面积、收缩末期心室面积、心室面积变化率、短轴缩短率和每搏心输出量； S3、将化合物作用于上述斑马鱼模型中，筛选阳性化合物； S4、通过进行是否影响阿霉素抗癌性的验证来对阳性化合物进一步地筛选。 2.根据权利要求1所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，S3具体包括以下步骤： S301、根据斑马鱼模型设置多组实验组，将用于筛选的化合物分别作用到不同的实验组内； S302、获取所有实验组内斑马鱼的心脏跳动图像； S303、根据斑马鱼心脏跳动图像获取每组斑马鱼的多项心功能参数； S304、分别对多个实验组内的多项心功能参数进行处理，计算出每个化合物的疗效评分； S305、将每个化合物的疗效评分与阳性命中的阈值进行比较，如果大于阈值，则为阳性化合物，反之，则不是阳性化合物。 3.根据权利要求2所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，S304中通过下述公式，获取化合物的疗效评分：上式中，Efficacy Score表示疗效评分，∑RescueIndex表示每项心功能参数的治疗指数之和，Number of parameters表示心功能参数的个数。 4.根据权利要求3所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，每项心功能参数的治疗指数通过下述公式得出：上式中，RescueIndex表示治疗指数，Xdrug表示给药组中该项参数的数值，Xmodel表示模型组中该项参数的数值，Xctrl表示对照组中该项参数的数值。 5.根据权利要求1所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，S4具体包括以下步骤： S401、通过原癌基因过度激活的斑马鱼进行自然产卵获得斑马鱼胚胎； S402、将上述斑马鱼胚胎分为多组，分别用阿霉素、DMSO溶剂或阿霉素+化合物处理24h； S403、在S402过程中，通过计数主动脉-性腺-中肾造血区的cmyb+细胞数量来判断化合物是否对阿霉素的抗癌性存在影响，并将对阿霉素抗癌效果产生影响的化合物排除。 6.根据权利要求1所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，S1中患有DIC的斑马鱼模型的获取方法具体为：通过自然产卵获得斑马鱼胚胎，将斑马鱼胚胎排列在孔板中，每个孔位设置5条斑马鱼胚胎，每个孔位内都放置阿霉素和FeCl3，在阿霉素和FeCl3共存的条件下对斑马鱼胚胎处理一段时间，然后再用新鲜E3缓冲液替换胚培养基，继续培养获得患有DIC的斑马鱼模型。 7.根据权利要求6所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，斑马鱼产卵后，将受精后30h的斑马鱼胚胎排列在孔板中。 8.根据权利要求1所述的一种筛选抗阿霉素心肌毒性活性物质的方法，其特征在于，S2中，通过人工方法，或，通过基于ZVSegNet网络和HRNet网络的深度学习方法对心脏跳动图像进行分析。 9.2"-O-galloylhyperin、氯化矢车菊素作为抗阿霉素心肌毒性活性物质的应用。 10.一种抗肿瘤药物，其特征在于：所述药物中包括阿霉素和2"-O-galloylhyperin，或，包括阿霉素和氯化矢车菊素。
所属类别：	发明专利