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原文传递一种缓冲液及其在流式抗体标记中的应用

专利名称：	一种缓冲液及其在流式抗体标记中的应用
摘要：	本发明提供了一种缓冲液及其在流式抗体标记中的应用。所述缓冲液包括：乙酸铵、乙酸钠和溶剂。在所述209Bi金属螯合的体系中，209Bi与双功能聚合物反应时不会产生沉淀，可以很高效地与双功能聚合物螯合且不影响双功能聚合物的稳定性，所以标记后的抗体得率提高。
专利类型：	发明专利
申请人：	杭州谱康医学科技有限公司;杭州谱育科技发展有限公司
发明人：	方伟;俞晓峰;李锐;何伟华;黄振宇
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-23T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-24T00:00:00+0800
申请号：	CN202311072681.8
公开号：	CN117110623A
代理机构：	北京超凡宏宇知识产权代理有限公司
代理人：	张金铭
分类号：	G01N33/68;G01N15/14;G01N27/62;C08F8/42;C08F8/00;C08F120/60;G;C;G01;C08;G01N;C08F;G01N33;G01N15;G01N27;C08F8;C08F120;G01N33/68;G01N15/14;G01N27/62;C08F8/42;C08F8/00;C08F120/60
申请人地址：	311300 浙江省杭州市临安区青山湖街道科技大道2468(2幢5层);
主权项：	1.一种209Bi金属螯合缓冲液，其特征在于，所述209Bi金属螯合缓冲液包括：乙酸铵、乙酸钠和溶剂。 2.根据权利要求1所述的209Bi金属螯合缓冲液，其特征在于，所述乙酸铵和乙酸钠的质量比为(0.8～1.2):1；优选地，所述209Bi金属螯合缓冲液中，乙酸铵的浓度为18～22mM，乙酸钠的浓度为18～22mM；优选地，所述溶剂为水；优选地，所述209Bi金属螯合缓冲液中还包括pH调节剂；优选地，所述pH调节剂包括醋酸和/或硝酸；优选地，所述209Bi金属螯合缓冲液的pH为5.5～6。 3.一种根据权利要求1或2所述的209Bi金属螯合缓冲液在制备提高209Bi和双功能聚合物的结合效率的制剂中的应用。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述双功能聚合物的结构式如下式I所示：其中，R为DTPA或DOTA，n为30～200。 5.一种用于标记质谱流式抗体的缓冲液，其特征在于，所述用于标记质谱流式抗体的缓冲液包括：权利要求1或2所述的209Bi金属螯合缓冲液、双功能聚合物、209Bi离子溶液。 6.根据权利要求5所述的用于标记质谱流式抗体的缓冲液，其特征在于，所述双功能聚合物和所述209Bi金属螯合缓冲液的质量体积比为0.05～0.5mg:95μL；优选地，所述209Bi金属螯合缓冲液和所述209Bi离子溶液的体积比为95:(1～5)；优选地，所述209Bi离子溶液的浓度为5～100mM。 7.一种根据权利要求5或6所述用于标记质谱流式抗体的缓冲液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：采用所述209Bi金属螯合缓冲液溶解所述双功能聚合物后，再与209Bi离子溶液进行混合，得到混合溶液；将上述混合溶液进行水浴，再转移至滤柱中进行离心处理，得到所述用于标记质谱流式抗体的缓冲液。 8.根据权利要求7所述的用于标记质谱流式抗体的缓冲液的制备方法，其特征在于，所述混合的过程中还包括添加硝酸的步骤；优选地，所述硝酸在所述混合溶液中的终浓度为0.2～1％(v/v)；优选地，所述水浴的温度为35～40℃，所述水浴的时间为40～60min；优选地，所述滤柱的截留分子量为2.5～3.5kD，优选为3kD；优选地，所述离心的离心力为10000～15000g，离心的时间为25～30min；优选地，所述离心处理后还包括采用结合缓冲液清洗的步骤。 9.一种使用209Bi金属标记质谱流式抗体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：纯抗的预处理：将纯抗和还原缓冲液置于滤柱中进行离心处理后，再与还原剂混合进行水浴，得到预处理过的抗体；抗体的标记：将权利要求5或6所述用于标记质谱流式抗体的缓冲液转移至所述预处理过的抗体中，进行水浴、离心，完成209Bi金属对质谱流式抗体的标记。 10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述纯抗的预处理中，所述纯抗和还原缓冲液的质量体积比为(50～100)μg:100～400μL；优选地，滤柱的截留分子量为45～55kD，优选为50kD；优选地，所述纯抗的预处理中，所述离心的离心力为10000～15000g，离心的时间为5～15min；优选地，所述纯抗的预处理中，所述水浴的温度为35～40℃，所述水浴的时间为20～40min，优选为20～30min；优选地，所述纯抗的预处理中，所述还原剂为TCEP或DTT；优选地，所述抗体的标记中，所述预处理过的抗体和用于标记质谱流式抗体的缓冲液的质量体积比为(50～100)μg:(60～100)μL；优选地，所述抗体的标记中，所述水浴的温度为35～40℃，所述水浴的时间为80～100min；优选地，所述抗体的标记中，水浴后还包括采用清洗缓冲液清洗的步骤；优选地，所述抗体的标记中，所述离心的离心力为10000～15000g，离心的时间为5～15min；优选地，所述抗体的标记中，离心后还包括采用清洗缓冲液稀释的步骤。
所属类别：	发明专利