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原文传递川芎水提药渣的特征图谱的构建方法及检测方法

专利名称：	川芎水提药渣的特征图谱的构建方法及检测方法
摘要：	本发明公开了川芎水提药渣的特征图谱的构建方法及检测方法，涉及中药鉴别技术领域。特征图谱的构建方法包括：将川芎水提药渣采用提取溶剂提取，得到供试品溶液；将新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A和藁本内酯对照品采用提取溶剂溶解，得到对照品溶液；将供试品溶液、对照品溶液采用液相色谱仪测定；液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以乙腈为流动相A，以0.05vol％～0.2vol％磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱。本发明所构建的特征图谱的信息丰富，能够快速、全面反映川芎水提药渣的质量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东一方制药有限公司
发明人：	林伟雄;陈仕妍;刘燎原;陈丹燕;罗毓;吴晓英;陈清怡;蒋海龙
专利状态：	有效
申请日期：	2023-06-30T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202310800834.X
公开号：	CN117054535A
代理机构：	广州三环专利商标代理有限公司
代理人：	李素兰
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	528000 广东省佛山市南海区里水镇旗峰工业开发区
主权项：	1.一种川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，包括：将川芎水提药渣采用提取溶剂提取，得到供试品溶液；将新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、洋川芎内酯I对照品、洋川芎内酯H对照品、洋川芎内酯A对照品和藁本内酯对照品采用提取溶剂溶解，得到对照品溶液；将所述供试品溶液、对照品溶液采用液相色谱仪测定，得到川芎水提药渣的特征图谱；其中，所述提取溶剂选用50～70vol％的甲醇或50vol％乙醇；其中，所述液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以乙腈为流动相A，以0.05vol％～0.2vol％磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱曲线为： 0min～4min，流动相A从8％→11％，流动相B从92％→89％； 4min～9min，流动相A从11％→20％，流动相B从89％→80％； 9min～15min，流动相A从20％→20.5％，流动相B从80％→79.5％； 15min～17min，流动相A从20.5％→21％，流动相B从79.5％→79％； 17min～20min，流动相A从21％→33％，流动相B从79％→67％； 20min～21min，流动相A从33％→38％，流动相B从67％→62％； 21min～28min，流动相A从38％→60％，流动相B从62％→40％； 28min～31min，流动相A从60％→63％，流动相B从40％→37％； 31min～32min，流动相A从63％→80.5％，流动相B从37％→19.5％； 32min～35min，流动相A从80.5％→81％，流动相B从19.5％→19％； 35min～36min，流动相A从81％→8％，流动相B从19％→92％。 2.如权利要求1所述的川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述固定相的粒径为1.5μm～2.1μm，所述流动相B为0.1vol％磷酸水溶液；所述液相色谱仪的色谱柱的柱长为100mm～150mm，柱径为2mm～3mm，柱温为20℃～35℃，流速为0.25mL/min～0.35mL/min，供试品溶液的进样量为1μL～3μL，对照品溶液的进样量为0.5～2.5μL；所述液相色谱仪的检测波长为290nm～310nm。 3.如权利要求1或2所述的川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述固定相的粒径为1.6μm；所述液相色谱仪的色谱柱的柱长为150mm，柱径为2.1mm，柱温为30℃～35℃，流速为0.3mL/min，供试品溶液的进样量为2μL，对照品溶液的进样量为1μL；所述液相色谱仪的检测波长为300nm。 4.如权利要求1所述的川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述提取溶剂为70vol％甲醇，提取方式为加热回流提取或超声提取，提取时间为10min～40min。 5.如权利要求1或4所述的川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：取川芎水提药渣1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50mL的70vol％甲醇，密塞，称定重量，水浴回流40min，放冷，再次称定重量，用70vol％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 6.如权利要求1所述的川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备方法为：取新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、洋川芎内酯I对照品、洋川芎内酯H对照品、洋川芎内酯A对照品和藁本内酯对照品适量，精密称定，加70vol％甲醇制成每1mL含新绿原酸28μg、绿原酸23μg、隐绿原酸24μg、咖啡酸38μg、阿魏酸37μg、洋川芎内酯I 103μg、洋川芎内酯H 46μg、洋川芎内酯A 100μg、藁本内酯125μg的溶液，作为对照品溶液。 7.如权利要求1所述的川芎水提药渣的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述特征图谱包括21个共有峰，其中，峰2为新绿原酸峰，峰3为绿原酸峰，峰4为隐绿原酸峰，峰5为咖啡酸峰，峰8为阿魏酸峰，峰10为洋川芎内酯I峰，峰11为洋川芎内酯H峰，峰15为洋川芎内酯A峰，峰17为藁本内酯峰；以峰8为S峰，计算峰1～峰21与S峰的相对保留时间，各峰的相对保留时间在规定值的±5％以内，其中，峰1～峰21的规定值分别为：0.30、0.34、0.56、0.62、0.65、0.69、0.82、1.00、1.29、1.34、1.49、2.05、2.19、2.28、2.55、2.67、2.74、2.75、3.21、3.22、3.23。 8.一种川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，包括：将川芎水提药渣采用提取溶剂提取，得到供试品溶液；将新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、洋川芎内酯I对照品、洋川芎内酯H对照品、洋川芎内酯A对照品和藁本内酯对照品采用提取溶剂溶解，得到对照品溶液；将所述供试品溶液、对照品溶液采用液相色谱仪测定，得到川芎水提药渣中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A和藁本内酯的含量；其中，所述提取溶剂选用50～70vol％的甲醇或50vol％乙醇；其中，所述液相色谱仪的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以乙腈为流动相A，以0.05vol％～0.2vol％磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱曲线为： 0min～4min，流动相A从8％→11％，流动相B从92％→89％； 4min～9min，流动相A从11％→20％，流动相B从89％→80％； 9min～15min，流动相A从20％→20.5％，流动相B从80％→79.5％； 15min～17min，流动相A从20.5％→21％，流动相B从79.5％→79％； 17min～20min，流动相A从21％→33％，流动相B从79％→67％； 20min～21min，流动相A从33％→38％，流动相B从67％→62％； 21min～28min，流动相A从38％→60％，流动相B从62％→40％； 28min～31min，流动相A从60％→63％，流动相B从40％→37％； 31min～32min，流动相A从63％→80.5％，流动相B从37％→19.5％； 32min～35min，流动相A从80.5％→81％，流动相B从19.5％→19％； 35min～36min，流动相A从81％→8％，流动相B从19％→92％。 9.如权利要求8所述的川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，所述固定相的粒径为1.5μm～2.1μm；所述流动相B为0.1vol％磷酸水溶液；所述液相色谱仪的色谱柱的柱长为100mm～150mm，柱径为2mm～3mm，柱温为20℃～35℃，流速为0.25mL/min～0.35mL/min，供试品溶液的进样量为1μL～3μL，对照品溶液的进样量为0.5～2.5μL；所述液相色谱仪的检测波长为280nm～330nm。 10.如权利要求8所述的川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，所述固定相的粒径为1.6μm；所述液相色谱仪的色谱柱的柱长为150mm，柱径为2.1mm，柱温为30℃～35℃，流速为0.3mL/min，供试品溶液的进样量为2μL，对照品溶液的进样量为1μL。 11.如权利要求8所述的川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，所述提取溶剂为70vol％甲醇，提取方式为加热回流提取或超声提取，提取时间为10～40min。 12.如权利要求8所述的川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：取川芎水提药渣1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50mL的70vol％甲醇，密塞，称定重量，水浴回流40min，放冷，再次称定重量，用70vol％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 13.如权利要求8所述的川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备方法为：取新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、洋川芎内酯I对照品、洋川芎内酯H对照品、洋川芎内酯A对照品和藁本内酯对照品适量，精密称定，加70vol％甲醇制成每1mL含新绿原酸14μg、绿原酸12μg、隐绿原酸12μg、咖啡酸19μg、阿魏酸18μg、洋川芎内酯I 51μg、洋川芎内酯H 23μg、洋川芎内酯A 50μg、藁本内酯63μg的溶液，作为对照品溶液。 14.如权利要求8～13任一项所述的川芎水提药渣的测定方法，其特征在于，采用三波长法进行测定，其中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、阿魏酸和藁本内酯的检测波长为321nm；川芎水提药渣中咖啡酸的检测波长为300nm；洋川芎内酯I、洋川芎内酯H和洋川芎内酯A的检测波长为280nm。
所属类别：	发明专利