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原文传递免疫色谱试验片以及测定检体中的糖链抗原的方法

专利名称：	免疫色谱试验片以及测定检体中的糖链抗原的方法
摘要：	提供一种免疫色谱试验片以及测定检体中的糖链抗原的方法，在通过亚硝酸提取来提取糖链抗原并进行测定的免疫色谱法中，通过使包含亚硝酸的展开液高效且持续地与中和试剂接触来进行中和，从而防止非特异反应。该免疫色谱试验片包括含浸有中和试剂的中和区域，并用于提取并测定检体中属于链球菌属的微生物的糖链抗原，其中，中和区域的原材料是具有吸收性高、保水性高、且释放性低或释放性持续这三种特性的滤纸或玻璃纤维滤纸，通过中和区域的高吸水性和高保水性而充分中和包含糖链抗原的酸性溶液，并通过中和区域的低释放性或持续释放性，抑制残留的酸性溶液到达检测区域或使经充分中和的试验液持续向检测区域展开，从而抑制非特异反应。
专利类型：	发明专利
申请人：	电化株式会社
发明人：	加藤大介;村松志野;服部友洋
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-14T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202311090651.X
公开号：	CN117054644A
代理机构：	北京康信知识产权代理有限责任公司
代理人：	纪秀凤
分类号：	G01N33/531;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/531
申请人地址：	日本东京
主权项：	1.一种免疫色谱试验片，用于提取并测定检体中属于链球菌属的微生物的糖链抗原，该免疫色谱试验片包括：样品垫，用于添加与亚硝酸盐或酸性溶液混合而得的检体；标记体区域，包含有将糖链抗原的抗体标记而得的标记抗体；及检测区域，对所述糖链抗原的抗体进行了固相化，在检测区域形成抗体-糖链抗原-标记抗体复合体，并对糖链抗原进行测定，该免疫色谱试验片在所述标记体区域的上游具有含浸有中和试剂的区域，进一步，在该含浸有中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而得的检体时具有含浸有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而得的检体时具有含浸有亚硝酸盐的区域，其中，含浸有中和试剂的区域的原材料是具有吸收性高、保水性高且释放性低或释放性持续这三种特性的滤纸或玻璃纤维滤纸，通过含浸有中和试剂的区域的高吸水性和高保水性而充分中和包含所述糖链抗原的酸性溶液，并通过含浸有中和试剂的区域的低释放性或持续释放性而抑制残留的酸性溶液到达检测区域或使经充分中和的试验液持续向检测区域展开，从而抑制非特异反应。 2.一种免疫色谱试验片，包括：添加与亚硝酸盐或酸性溶液混合而得的检体的样品垫、包含将糖链抗原的抗体标记而得的标记抗体的标记体区域及将所述糖链抗原的抗体进行了固相化的检测区域，在检测区域形成抗体-糖链抗原-标记抗体复合体，并对糖链抗原进行测定，该免疫色谱试验片在所述标记体区域的上游具有含浸有中和试剂的区域，进一步，在该含浸有中和试剂的区域的上游，在使用与亚硝酸盐混合而得的检体时具有含浸有固态酸性试剂的区域，在使用与酸性溶液混合而得的检体时具有含浸有亚硝酸盐的区域，该免疫色谱试验片用于提取并测定检体中属于链球菌属的微生物的糖链抗原，其中，含浸有中和试剂的区域的原材料是克重为10～400g/m2，且厚度为0.1～2.0mm的织物。 3.根据权利要求2所述的免疫色谱试验片，其中，所述织物的每1cm/m2的吸水量为10～100μl/cm2，且吸水速度为1.0～5.0μl/sec，进而将1cm/m2的片段在润湿状态下与检测区域接触，静置5分钟后，保水量为10～100μl/cm2，将1cm/m2的片段在润湿状态下与膜接触，静置5分钟后，溶液扩散面积为20mm2以下。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫色谱试验片，其中，通过含浸有中和试剂的区域的高吸水性和高保水性而充分中和包含所述糖链抗原的酸性溶液，并通过含浸有中和试剂的区域的释放性的持续力，即使残留的酸性溶液到达检测区域时，也通过蓄积充分的中和能力而抑制非特异反应。 5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫色谱试验片，其中，通过含浸有中和试剂的区域的高吸水性和高保水性而充分中和包含所述糖链抗原的酸性溶液，并通过含浸有中和试剂的区域的低释放性，抑制残留的酸性溶液到达检测区域，在阴性的情况下抑制非特异反应，在阳性的情况下防止判定时间以后的条带显色。 6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫色谱试验片，其中，含浸有固态酸性试剂或亚硝酸盐的区域存在于样品垫上或涂布有标记体区域的垫上。 7.根据权利要求1至6中任一项所述的免疫色谱试验片，其中，固态酸性试剂选自由丙二酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸和酒石酸构成的组。 8.根据权利要求1至7中任一项所述的免疫色谱试验片，其中，中和试剂是三羟甲基氨基甲烷或氢氧化钠。 9.一种测定检体中的糖链抗原的方法，使用权利要求1～8中任一项所述的免疫色谱试验片，通过免疫色谱法测定检体中的糖链抗原，所述测定检体中的糖链抗原的方法包括：当免疫色谱试验片具有含浸有固态酸性试剂的区域时，将检体与亚硝酸溶液混合，当免疫色谱试验片具有含浸有亚硝酸盐的区域时，将检体与酸性溶液混合，并添加至所述免疫色谱试验片的样品垫，在含浸有固态酸性试剂的区域或含浸有亚硝酸盐的区域中，通过亚硝酸盐与固态酸性试剂反应产生的亚硝酸的作用从检体提取出糖链抗原，在含浸有中和试剂的区域，包含所述糖链抗原的酸性溶液被中和，在检测区域中，形成抗体-糖链抗原-标记抗体复合体，所述方法通过免疫色谱法，通过含浸有中和试剂的区域的高吸水性和高保水性而充分中和包含所述糖链抗原的酸性溶液，并通过含浸有中和试剂的区域的低释放性或持续释放性，抑制残留的酸性溶液到达检测区域或使经充分中和的试验液持续向检测区域展开，从而抑制非特异反应，并测定检体中的糖链抗原。
所属类别：	发明专利