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原文传递一种人心肌肌钙蛋白I含量均相快速测定方法及其应用

专利名称：	一种人心肌肌钙蛋白I含量均相快速测定方法及其应用
摘要：	本发明涉及一种人心肌肌钙蛋白I含量均相快速测定的方法，包括：将V1体积待检测样本与V2体积心肌肌钙蛋白I抗体包被的受体溶液和V3体积生物素标记的心肌肌钙蛋白I抗体溶液混合后进行第一反应，得到第一混合物；控制所述第一反应的温度为K1以及第一反应的时长为T1；将所述第一混合物与包被有链霉亲和素的供体溶液混合后进行第二反应，得到第二混合物；控制所述第二反应的温度为K2以及第二反应的时长为T2；利用能量或者活性化合物激发所述第二混合物中的所述供体产生单线态氧，检测化学发光信号的存在和/或强度，从而确定待检测样本中是否含有人心肌肌钙蛋白I和/或人心肌肌钙蛋白I的含量；其中，T1+T2≤15min。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	科美博阳诊断技术(上海)有限公司
发明人：	洪琳;杨阳;刘宇卉;李临
专利状态：	有效
申请日期：	2018-02-11T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-07T00:00:00+0800
申请号：	CN202310760767.3
公开号：	CN117007811A
代理机构：	北京睿阳联合知识产权代理有限公司
代理人：	康志梅
分类号：	G01N33/68;G01N33/531;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/531
申请人地址：	200120 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区蔡伦路88号1幢三楼、五楼
主权项：	1.一种人心肌肌钙蛋白I含量均相快速测定的方法，其包括如下步骤：步骤S1，将V1体积待检测样本与V2体积心肌肌钙蛋白I抗体包被的受体溶液和V3体积生物素标记的心肌肌钙蛋白I抗体溶液混合后进行第一反应，得到第一混合物；控制所述第一反应的温度为K1以及第一反应的时长为T1；步骤S2，将所述第一混合物与包被有链霉亲和素的供体溶液混合后进行第二反应，得到第二混合物；控制所述第二反应的温度为K2以及第二反应的时长为T2；步骤S3，利用能量或者活性化合物激发所述第二混合物中的所述供体产生单线态氧，检测化学发光信号的存在和/或强度，从而确定待检测样本中是否含有人心肌肌钙蛋白I和/或人心肌肌钙蛋白I的含量；其中，T1+T2≤15min。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述K1和/或K2分别独立地选自35-45℃，优选选自37-42℃。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述T1+T2≤13min；优选地，所述T1+T2≤12.5min；进一步优选地，所述T1+T2≤10min；更优选地，所述T1+T2≤8min；和/或所述T1≤12min；优选地，所述T1≤10min；进一步优选地，所述T1≤8min；更优选地，所述T1≤6min；和/或所述T2≤3min；优选地，所述T2≤2min。 4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，5μL≤V1≤100μL，优选20μL≤V1≤120μL，更优选40μL≤V1≤100μL；和/或 5μL≤V2≤50μL，优选8μL≤V2≤40μL，更优选10μL≤V2≤25μL；和/或 5μL≤V3≤50，优选8μL≤V3≤40μL，更优选10μL≤V3≤25μL。 5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述方法的检测灵敏度不低于5pg/mL。 6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，在步骤S3中，使用600-700nm波长的激发光照射所述第二混合物，激发所述供体产生单线态氧，所述受体与接触到的单线态氧反应生成520-620nm的发射光，通过检测发射光信号的存在和/或强度，从而判断待检测样本中是否存在人心肌肌钙蛋白I和/或确定人心肌肌钙蛋白I的含量。 7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述第一结合单元与所述受体间接结合；优选地，所述第一结合单元与所述受体通过异硫氰酸荧光素-异硫氰酸荧光素抗体系统间接结合。 8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述心肌肌钙蛋白I抗体包被的受体溶液、所述生物素标记的心肌肌钙蛋白I抗体溶液与所述包被有链霉亲和素的供体溶液中的任一个、任两个或三个还包含表面活性剂，优选非离子表面活性剂，更优选直链非离子表面活性剂，最优选聚乙二醇型直链非离子表面活性剂；优选地，所述包被有链霉亲和素的供体溶液中的表面活性剂的重量体积浓度为0.001％-0.1％，优选0.01％-0.04％，更优选0.02％。 9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，所述心肌肌钙蛋白I抗体包被的受体溶液中的所述心肌肌钙蛋白I抗体包被的受体的浓度选自20～300μg/mL，优选30～200μg/mL，更优选40～100μg/mL；和/或所述生物素标记的心肌肌钙蛋白I抗体溶液中的所述生物素标记的心肌肌钙蛋白I抗体的浓度选自：0.2～10μg/mL，优选0.5～8μg/mL，更优选1～6μg/mL。 10.权利要求1-9中任一项所述的方法在POCT检测技术中的应用。
所属类别：	发明专利