详情

原文传递一种褐藻酸寡糖含量测定方法及其用途

专利名称：	一种褐藻酸寡糖含量测定方法及其用途
摘要：	本发明公开了一种褐藻酸寡糖含量测定方法。本方法通过将褐藻酸寡糖C6位羧基完全转变为羧基盐形式，基于电荷守恒原理，通过煅烧灰化使其变为碳酸盐，再通过酸碱滴定方法测定碳酸盐的量，进而按单糖残基换算得到褐藻酸寡糖的含量。本方法无需将褐藻酸寡糖降解为单糖，避免了降解程度难以控制以及降解破坏率影响含量测定的问题。本方法无需使用单糖或寡糖对照品，不同甘露糖醛酸/古罗糖醛酸比值不影响含量测定结果，而且无需绘制标准曲线，操作简易方便，可实现褐藻酸寡糖含量的快速定量分析。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛海洋生物医药研究院股份有限公司
发明人：	吕友晶;李全才;邵萌;赵峡;刘浩;王春蕾;杨萌琳
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-09T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-03T00:00:00+0800
申请号：	CN202310998494.6
公开号：	CN116990441A
分类号：	G01N31/16;G01N21/79;G;G01;G01N;G01N31;G01N21;G01N31/16;G01N21/79
申请人地址：	266061 山东省青岛市崂山区香港东路23号
主权项：	1.一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤： S1：转化，称取恒重后的待测样品，用水溶解，滴加酸液调节pH至酸性，溶液pH稳定后，再滴加碱液调节pH至碱性； S2：中和，待S1步骤所得溶液pH稳定后，滴加酸液调节pH至中性； S3：碳化，将S2步骤所得溶液pH稳定后，加热挥干水分，碳化，获得固形物； S4：灰化，将S3步骤所得固形物转入马弗炉中进行高温煅烧，直至获得白色或类白色煅烧产物； S5：复溶，将S4步骤所得煅烧产物用酸液或水溶解，水定容后获得定容溶液； S6：滴定，取S5步骤所得定容溶液适量，加入酸碱指示剂，用碱液或酸液进行滴定，依据指示剂颜色变化判定滴定终点； S7：计算，根据S6步骤的碱液或酸液用量进行待测样品含量换算。 2.根据权利要求1所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述褐藻酸寡糖包含如下结构的一种或几种： 3.根据权利要求2所述的褐藻酸寡糖的结构，其特征在于：述R为H、金属阳离子的一种或几种，优选的，R为H、碱金属离子的一种或几种。 4.根据权利要求1所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S1步骤和S2步骤中酸液为强酸，优选的，为HCl、HNO3、H2SO4中的一种或几种；所述S1步骤中碱液为强碱，优选的，为NaOH、KOH、LiOH、RbOH、CsOH、FrOH的一种或几种。 5.根据权利要求1所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S1步骤中加酸液调节溶液pH至3～4，加碱液调节溶液pH至9～10。 6.根据权利要求1所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S4步骤中高温煅烧温度为400～1000℃，优选的，为500～600℃。 7.根据权利要求1所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S5步骤中用液酸溶解时，酸液为强酸，优选的，为HCl、HNO3、H2SO4中的一种；所述S6步骤中酸碱指示剂为硝基酚类、酚酞类、磺代酚酞类、偶氮化合物类指示剂的一种，优选的，为酚酞指示剂；所述S6步骤中用碱液进行滴定，所述碱液为强碱，优选的，为NaOH、KOH、LiOH、RbOH、CsOH、FrOH的一种。 8.根据权利要求7所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S7步骤中含量换算所用公式为：式中： c1——S5步骤中酸液的H+浓度，单位为摩尔每升(mol/L)； V1——S5步骤中酸液的加入体积，单位为毫升(mL) c2——S6步骤中碱液的OH-浓度，单位为摩尔每升(mol/L)； V2——S6步骤中滴定消耗的碱液体积，单位为毫升(mL)； V’——S5步骤中定容溶液的体积，单位为升(L)； V”——S6步骤中滴定所取定容溶液的体积，单位为毫升(mL)； m——S1步骤中待测样品的质量，单位为毫克(mg)； MR——为H、一价金属离子的摩尔质量，或为二价金属离子的摩尔质量二分之一，或为三价金属离子的摩尔质量三分之一，或H或/和一价金属离子的摩尔质量或/和二价金属离子的摩尔质量二分之一或/和三价金属离子的摩尔质量三分之一乘以各所占比例后的加和； λ——摩尔质量校正数。 9.根据权利要求1所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S5步骤中用水溶解时，所述S6步骤中酸碱指示剂为硝基酚类、酚酞类、磺代酚酞类、偶氮化合物类指示剂的一种，优选的，为甲基橙指示剂；所述S6步骤中用酸液进行滴定，所述酸液为强酸，优选的，为HCl、HNO3、H2SO4中的一种。 10.根据权利要求9所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述S7步骤中含量换算所用公式为：式中： c1——S6步骤中酸液的H+浓度，单位为摩尔每升(mol/L)； V1——S6步骤中滴定消耗的酸液体积，单位为毫升(mL)； V’——S5步骤中定容溶液的体积，单位为升(L)； V”——S6步骤中滴定所取定容溶液的体积，单位为毫升(mL)； m——S1步骤中待测样品的质量，单位为毫克(mg)； MR——为H、一价金属离子的摩尔质量，或为二价金属离子的摩尔质量二分之一，或为三价金属离子的摩尔质量三分之一，或为H或/和一价金属离子的摩尔质量或/和二价金属离子的摩尔质量二分之一或/和三价金属离子的摩尔质量三分之一乘以各所占比例后的加和； λ——摩尔质量校正数。 11.根据权利要求8、10所述的一种褐藻酸寡糖含量测定方法，其特征在于：所述结构I时含量换算所用公式中的摩尔质量校正数λ为所述结构II和III时含量换算所用公式中的摩尔质量校正数校正系数λ为0。 12.权利要求1所述的褐藻酸寡糖含量测定方法在褐藻酸寡糖产品中测定褐藻酸寡糖含量的应用。
所属类别：	发明专利