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一种易掉片组织的预处理方法及其多重免疫荧光染色方法
| 专利名称： | 一种易掉片组织的预处理方法及其多重免疫荧光染色方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种易掉片组织的预处理方法及其多重免疫荧光染色方法，属于生物医学类实验病理技术领域。本发明中的易掉片组织的预处理方法采用捞片后直接在紫外照射下进行光敏交联的步骤，结合特定的照射时间，使得所获切片牢固，避免了烤片步骤，同时解决了多重免疫荧光染色中易掉片类组织容易脱落的问题。本发明的多重免疫荧光染色方法能够缩短程序时间、提升处理效率。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 四川;51 |
| 申请人： | 四川大学华西医院 |
| 发明人： | 张忆;李越;张宛丽 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2023-09-27T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2023-11-03T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN202311258032.7 |
| 公开号： | CN116990101A |
| 代理机构： | 成都科海专利事务有限责任公司 |
| 代理人： | 刘双兰 |
| 分类号： | G01N1/28;G01N1/44;G01N1/30;G;G01;G01N;G01N1;G01N1/28;G01N1/44;G01N1/30 |
| 申请人地址： | 610000 四川省成都市武侯区国学巷37号 |
| 主权项： | 1.一种易掉片组织的预处理方法，其特征在于，包括以下步骤： 将组织切片进行捞片，收集切片后用紫外照射1~5min，得到固化切片； 将固化切片进行脱蜡，完成易掉片组织的预处理； 所述捞片采用的水剂中含有油状光敏交联剂。 2.根据权利要求1所述的易掉片组织的预处理方法，其特征在于，所述组织切片来源于软骨、骨或肌腱。 3.根据权利要求1所述的易掉片组织的预处理方法，其特征在于，所述紫外照射的过程中将切片的正反面均进行照射。 4.根据权利要求1所述的易掉片组织的预处理方法，其特征在于，所述脱蜡包括以下步骤： 将固化切片依次采用脱蜡剂、无水乙醇、95~99.99% v/v乙醇、90~95% v/v乙醇和70~90% v/v乙醇进行浸泡。 5.根据权利要求4所述的易掉片组织的预处理方法，其特征在于，所述脱蜡剂选自苯类脱蜡剂、甲苯类脱蜡剂、氯化烃类脱蜡剂或精油类脱蜡剂中的一种或几种。 6.根据权利要求4所述的易掉片组织的预处理方法，其特征在于，所述脱蜡剂的浸泡次数为2~4次； 所述无水乙醇、95~99.99% v/v乙醇、90~95% v/v乙醇和70~90% v/v乙醇的浸泡次数为1~3次。 7.权利要求1~6任一项所述的易掉片组织的预处理方法在组织多重免疫荧光染色中的应用。 8.一种易掉片组织多重免疫荧光染色方法，其特征在于，包括以下步骤： 采用权利要求1~6任一项所述的方法对易掉片组织进行预处理，得到待染样本； 将待染样本依次进行抗原修复、封闭、一抗孵育、二抗孵育、荧光基团孵育、微波处理去除抗体、染色，完成易掉片组织多重免疫荧光染色。 9.根据权利要求8所述的易掉片组织多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述抗原修复具体包括以下步骤： 将待染样本与抗体洗脱液混合，修复2~4min。 10.根据权利要求8所述的易掉片组织多重免疫荧光染色方法，其特征在于，所述修复采用高火条件； 所述高火条件的功率为600~700W。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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