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原文传递人工虎骨粉检测标志物鉴定方法

专利名称：	人工虎骨粉检测标志物鉴定方法
摘要：	本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种人工虎骨粉检测标志物鉴定方法。本发明提供了人工虎骨粉的5条特征多肽，序列为SEQ ID NO.1‑5。本发明还提供了对这5条特征多肽的检测方法，包括人工虎骨粉的特征多肽的超声提取，提取液利用同位素稀释质谱法进行定量分析。具有操作简单、快速、灵敏度高、定性定量准确的优点，能够有效用于人工虎骨粉的质量控制。
专利类型：	发明专利
申请人：	中国中医科学院中药研究所;金花企业(集团)股份有限公司西安金花制药厂
发明人：	胡少伟;吴宏伟;杨洪军;翟睿;曾艳龙
专利状态：	有效
申请日期：	2023-09-28T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-10T00:00:00+0800
申请号：	CN202311267027.2
公开号：	CN117031043A
代理机构：	北京精金石知识产权代理有限公司
代理人：	刘广南
分类号：	G01N33/68;C07K7/06;C07K7/08;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G;C;G01;C07;G01N;C07K;G01N33;C07K7;G01N30;G01N33/68;C07K7/06;C07K7/08;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
申请人地址：	100700 北京市东城区东直门内南小街16号;
主权项：	1.一种评估人工虎骨粉质量的方法，其特征在于，所述的方法是通过对人工虎骨粉的标志物进行定量；所述的标志物为特征多肽SEQ ID NO.1-5。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）人工虎骨粉待测样品的制备；（2）步骤（1）的待测样品通过LC MS/MS技术进行定量。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤（1）的制备方法为：溶剂超声提取，放冷，离心，超滤得滤液。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的超声温度为30-40 ℃；所述的离心在低温下进行。 5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤（2）LC MS/MS的色谱条件根据SEQ ID NO.1-5在色谱中的保留特性进行选择。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的LC MS/MS的色谱条件为：色谱柱为C18；流动相A选自甲酸、水中的至少一种，流动相B选自乙腈、乙醇、甲醇中的至少一种；流速为0.1-0.5 mL·min-1；柱温为25-35 ℃。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的色谱柱为luna Omega 1.6 umpolar C18 150×2.1 mm；流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为乙腈；流速为0.2 mL·min-1；柱温为30 ℃。 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的流动相洗脱条件为：。 9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的LC MS/MS的质谱条件为：多反应监测；纳米喷雾电离；正离子扫描；毛细管电压3200-3700 V；干燥气温度180-220 ℃；干燥气流速14-18 L /min；雾化气压力20-30 psi；鞘气温度300-400 ℃；鞘气流速11-18 L /min；碎裂电压350-400 V；高压离子漏斗电压140-160 V；低压离子漏斗电压50-70 V。 10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的特征多肽SEQ ID NO.1的m/z值为543.465/545.262，543.465/772.405；SEQ ID NO.2的m/z值为569.940/686.375，569.940/856.417；SEQ ID NO.3的m/z值为515.925/471.375，515.925/842.446；SEQ ID NO.4的m/z值为508.330/598.220，508.330/797.375；SEQ ID NO.5的m/z值为512.325/619.220，512.325/876.292。
所属类别：	发明专利